- 中文名
- Cre/loxP重组酶系统
- 提出者
- Sternberg和Hamilton
- 提出时间
- 1981年
- 适用领域
- 高等真核生物
- 应用学科
- 生物学
- 隶 属
- λ Int酶超基因家族
Cre重组酶:于1981年从P1噬菌体中发现,属于λ Int酶超基因家族。Cre重组酶基因编码区序列全长1029bp(EMBL数据库登录号X03453),编码由 343 个氨基酸组成的38kDa单体蛋白。它不仅具有催化活性,而且与限制酶相似,能识别特异的 DNA 序列,即 loxP 位点,使 loxP位点间的基因序列被删除或重组。Cre重组酶有70%的重组效率,不借助任何辅助因子,可作用于多种结构的 DNA 底物,如线形、环状甚至超螺旋 DNA。它 是一种位点特异性重组酶,能介导两个LoxP位点(序列)之间的特异性重组,使LoxP位点间的基因序列被删除或重组。
LoxP(locus of X (cross)-overinP1)序列:来源于P1噬菌体,是由两个13bp反向重复序列和中间间隔的8bp序列共同组成,8bp的间隔序列同时也确定了LoxP的方向。Cre在催化DNA链交换过程中与DNA共价结合,13bp的反向重复序列是Cre酶的结合域。其序列如下:
5' - ATAACTTCGTATA - GCATACAT - TATACGAAGTTAT - 3'
3' - TATTGAAGCATAT - CGTATGTA - ATATGCTTCAATA - 5'
Cre重组酶介导两个LoxP位点间的重组是一个动态、可逆的过程,可以分成三种情况:
1、如果两个LoxP位点位于一条DNA链上,且方向相同,Cre重组酶能有效切除两个LoxP位点间的序列;