如何确定合适的慢病毒MOI值？
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MOI（multiplicity of infection），即感染复数，指的是感染时病毒与细胞数量的比值。一般认为MOI是一个比值，没有单位。合适的MOI值是高感染效率的关键因素之一，那么如何确定合适的MOI值呢？
一、查阅相关文献，推荐查阅与目的细胞的种类、细胞状态、实验条件相似的有参考性的文献，对MOI值的适宜范围有基本的了解。
二、进行预实验，因慢病毒种类、实验条件、细胞状态、实验人员熟练程度等的不同，文献报道的MOI值也只能作为参考，推荐正式实验前在目的细胞中进行预实验（如梯度实验）来摸索合适的MOI值。
三、选取预实验中细胞状态较好、荧光较多的孔对应的MOI值作为正式实验时使用的MOI值。
下面提供一种慢病毒感染细胞的预实验以摸索MOI值的操作步骤以供参考：
MOI即感染复数，一般将细胞有80%被感染时所用的病毒颗粒数和细胞数目的比值作为该株细胞的MOI。MOI值=病毒滴度（TU/mL）×病毒体积（mL）/细胞个数
如何确定慢病毒MOI值？
1) 查文献：通过高分文献报道确定MOI值。
2) 设计梯度预实验摸索：以文献推荐梯度上下各设置2个梯度，每个梯度至少相差两倍，例如文献推荐MOI值为8，则设置为2-4-8-16-32。
3) 梯度感染后，选取细胞状态较好、荧光较多的，或者药物筛选后细胞存活率较高的梯度作为使用的MOI值。
慢病毒包装
枢密科技慢病毒载体是在国际通用的第三代载体系统为基础，通过一定改建构成四质粒体系。其中转移载体（transfer vector）包含转移目的基因的慢病毒骨架及其包装产生相应基因组RNA的所有顺式作用元件，可以单一或多重组合的稳定或条件诱导下表达转移基因或shRNA；另外，通过三个辅助质粒提供病毒包装所需的反式作用因子，同时采用“自我灭活”修饰，阻止子代病毒自我复制和转移，从而确保产生的慢病毒具备良好的生物安全性。
载体优势
1、对分裂期细胞和非分裂期细胞均有感染作用
2、操作方便，安全性高
3、表达稳定高效
4、实验周期短
5、多种载体可选
载体应用
● 将目的基因/RNAi基因转入难以转染的细胞，比如神经元细胞、干细胞或其它原代细胞
● 将目的基因/RNAi基因转入动物组织，以期获得长期表达
● 构建稳定表达目的蛋白/RNAi的细胞系，再用ex vivo的方法导入动物体内
● 基因治疗
● 转基因动物
● 基因敲除
● 药物研究：构建表达受体蛋白的细胞系，研究药物的作用
● 快速建立生产目的蛋白的细胞系，非常有前途的真核细胞表达方法
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