均相光激化学发光是否优于电化学发光、酶促化学发光?

对于免疫诊断,罗氏的电化学发光被认为是目前最好的发光技术,但听说均相光激化学发光(LICA)是下一代发光技术。想请教有经验的人士,基于LICA技术的产…
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光激化学发光(luminescent oxygen channeling immunite assay, LOCI)是结合纳米技术、免疫技术和化学发光技术的新技术,1994年被Ullman提出。在检测物的参与下,光敏分子和受体通过桥联耦合形式三明治结构而相互靠近,光敏分子受激发产生活性氧,活性氧扩散到邻近的受体使受体激发,从而释放出光子,达到无需任何洗涤的条件下检测待测物的目的。与现有elisa相比,该技术操作步骤少、反应速度快、特异性好、动态范围宽,样品需求量小,费用低,易于实现快速、自动化、高通量的检测,被广泛应用于靶分子检测、辅助疾病诊断、药物筛选、蛋白相互作用等方方面面,然而,由于专利保护和商业寡头等原因,该技术在过去的20年中发展缓慢。

化学发光是免疫诊断当中,目前在临床上应用最为广泛,技术最为先进的技术手段之一,其主要利用抗原与抗体的免疫反应,在发光底物的激发下,发出光信号,达到对待测样本进行定量或者半定量的检测方法。其中抗原抗体是化学发光试剂最为核心,最为重要的原料,其质量直接影响试剂的质量。在进行化学发光试剂研发,如何选择抗原抗体,其质量评价指标有哪些,本文带你了解抗体的那些事儿。


抗体

抗体:抗体是机体在抗原的刺激下,经免疫应答反应,由免疫细胞分泌的特异性识别抗原的物质。


抗体结构:

抗体是Y型的蛋白质,由四条多肽链组成,两条相同的短链称为轻链(L链),两条相同的长链称为重链(H链),以二硫键连接而成。

可变区域:四条多肽链的N末端序列有成千上百种可能,故将其称为可变区域,可变区域(V)参与抗原的结合。

恒定区:抗体其他区域在同一物种的不同抗体中排列几乎相同,称为恒定区,恒定区(C区)负责决定抗体在免疫反应中拥有相同的抗原性。

抗体分类:

基于技术发展进程,抗体可分为多克隆抗体、单克隆抗体、基因工程抗体,其中,基因工程抗体又分为嵌合抗体、小分子抗体、双特异性抗体、抗体偶联物、抗体融合蛋白。




抗原与抗体的联系

抗原-抗体反应(antigen antibodyreaction),是抗原和对应抗体在一定条件下特异结合形成可逆性抗原-抗体复合物的过程。化学发光也是利用抗原与抗体之间特异性结合的特点,定量或者半定量检测相关临床指标,为疾病诊断预防控制提供相关依据。


化学发光

化学发光免疫分析(chemiluminescence immunoassay,CLIA),是将具有高灵敏度的化学发光测定技术与高特异性的免疫反应相结合,用于各种抗原、半抗原、抗体、激素、酶、脂肪酸、维生素和药物等的检测分析技术。

化学发光包含免疫反应(抗原抗体特异性结合)和发光反应两个反应部分,发光反应是化学发光物质经催化剂的催化或氧化剂的氧化等反应过程释放光信号,出现发光现象的过程。




化学发光中的抗原和抗体

在化学发光检测试剂,抗原和抗体是最为核心的原料,抗原和抗体的质量直接影响成品试剂的质量,抗原抗体占据原料市场45%左右的市场份额。且在化学发光领域,由于检测试剂与仪器是封闭系统,也就导致上游原料的抗原和抗体无法通用,不同的仪器对应的试剂所需要的抗原和抗体的指标要求也不尽相同。正常情况下,在抗体的质量评价中主要有以下的评价指标:

抗体亲和力:

抗体与抗原表位或抗原决定簇之间的结合力称为抗体亲和力,体现了一个抗体分子和一个半抗原分子或抗原分子的一个决定簇起反应的能力。高亲和力抗体诊断原料并不代表高性能试剂,针对不同种类的标志物,对于亲和力的需求有一定差异。

线性范围:

指分析方法在给定范围内获取与样品中待测物浓度成正比的试验结果的能力,是反映分析方法检测范围和准确性的直接指标。

特异性:

指抗体单一性识别某种特定抗原的能力。特异性虽然不直接影响试剂整体反应性,但是却对于检测结果有着很重要的影响。

纯度:

在体外诊断试剂制备过程中,抗体标记效率与抗体的纯度有关。通常与细胞培养工艺和抗体纯化工艺所决定。

稳定性:

是指在特定的储存条件下,一定时间内抗体保持其活性的能力。在抗体修饰/偶联前的稳定性是抗体真实的稳定性,修饰/偶联后的抗体稳定性主要取决于制备工艺。翌圣生物是国内主要的IVD原料供应商,完善的研发质检售后体系,为您的试剂开发提供稳定的保障,可提供抗原抗体定制服务。