巴斯德是怎么做成狂犬病疫苗？

曾经有一派学者误认为狂犬病只是一种心理疾病。但是，狂犬病明显的症状和几乎100％的死亡率引起了第一批现代微生物学家的好奇心。而到19世纪末，法国科学家巴斯德便制定了有效的疫苗接种程序。

1804年，德国科学家戈特弗里德·津凯（Gottfried Zinke）首次在实验中证明，狂犬病人的唾液接种动物可以传播狂犬病。1879年，法国的Pierre-Victor Galtier 在里昂将狂犬病从犬传播到家兔，之后再从家兔传播到家兔，然后使用狂犬病感染的物质静脉注射来免疫绵羊和山羊。但是，Galtier所做的工作被当时路易斯·巴斯德的盛名所掩盖。大多数狂犬病研究的荣誉最终都归属于巴斯德，但人们也不能忽略巴斯德的合作者所作的贡献，比如Roux、Chambedand和Thuillier。由于当时60多岁的巴斯德已因中风而偏瘫，他的这三位合作者完成了他实验室的大部分实验操作。

1881年，巴斯德研究小组确定中枢神经系统是狂犬病病毒复制的主要部位。通过在脑膜下接种感染物质，他们将狂犬病成功传播至家兔，并使病毒在家兔宿主中传代超过100代。Roux 注意到，将感染家兔的脊髓悬吊于干燥空气中，其病毒毒力快速下降，并在15天的时间内完全减毒。根据这次观察的结果，巴斯德制定出一种切实可行的接种方法。巴斯德使用感染脊髓碎片的系列悬液为犬作皮下注射，首先使用干燥足够长时间、完全无毒的脊髓，随后使用干燥程度略减的脊髓。免疫完成后，在大脑内注射强毒病毒时，这些犬对狂犬病产生了抵抗力。

这种方法使50只犬获得了保护。虽然实验表明，对被“疯”犬咬伤的犬进行免疫接种使其抵抗狂犬病并非总能成功，但是，进行了多次失败和未公布的人体免疫接种后，巴斯德在1885年7月6日尝试治疗人类患者Joseph Meister并获得成功。Meister 于60小时之前被一只疯犬咬伤了14处。巴斯德使用从狂犬病家兔获得的脊髓悬液对Meister 进行皮下注射免疫。免疫注射前，狂犬病家兔脊髓悬液已经在氢氧化钾溶液中保存了15天。此后巴斯德又使用毒力渐次增强的脊髓悬液对Meister 连续进行了12次接种，即在10天时间内共接种13次。这个男孩不仅抵抗了最初动物来源的狂犬病病毒，还能对抗最后5剂疫苗中所包含的大剂量高毒力病毒。

巴斯德的治疗方法引起了医学界同行的巨大兴趣，虽然有些争论，但该方法还是很快被接受。法国巴斯德研究所建立于1888年，但在随后仅仅10年时间里，世界各地便设立了多个巴斯德研究所，便于在当地提供针对狂犬病的免疫接种。