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村 (1) 肽 的 研究 II. 带 保护 基 的 胰岛 素 A 链 凑 端 九 肽 的 合成 …… 汪 RR
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(8) FRASDRZE III. 牛 胰 岛 素 A 链 中 段 带 保护 基 团 的 七 肽 (N-FRBSE-SE “
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| (11) 草 麻 种 籽 蛋 白 的 涌 定 曲线 oo PEK FRA 86 “ig
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18) URE RA ET RG ILL MACK RAC 彭加木 88
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(15) 海洋 动物 肌肉 千 构 蛋白 的 研究 1. 软骨 鱼 傈 原 肌 球 蛋白 的 一 些 特 性 ………
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| (16) 在 过 量 歼 基 化 合 物 存在 时 蛋白 质 甫 基 的 测定 -pp ALM SbAKH 106
(17) 生物 高 分 子 中 激 子 和 容 实 的 转移 pp BE FE 9
© (18) 蛋白 质 分 子 的 电子 车 构 和 与 催化 作用 .ppp 从 8
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(23) 核酸 碱 基 租 成 分 析 方 法 的 研究 ”III. Wie EASON A Re Bs Fra AF A oe SE
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(24) 大 肠 查 菌 可 溶性 核糖 核酸 的 提取 及 其 性 质 的 研究 …… eee ESE) HUE
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(29) 大 白衣 尿 中 脱氧 核 狂 核酸 酶 (DNase) 的 研究 0 KBE Genet 140
| (30) 肤 的 酶 激活 作用 .ee 崔 桂 芳 ， 于 富 才 EG 151
(31) 金属 见 子 与 核酸 的 相互 作用 1. SRT RBM ee tAH Il. eee
子 对 核酸 的 沉 油 作用 .pp 李 载 平台 新 法 152
(32) .金属 肉 子 与 核酸 的 相互 作用 III. 钢 屿 子 与 核酸 和 结合 作用 的 研究 …… 景 沛 155
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(37) 木瓜 蛋白 酶 的 研究 LV. 活性 中 心 表 氨 酸 残 基 的 关 甲 基 化 KER
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(42) 蛋白 质 功 能 基 转 的 改 释 和 与 生物 活力 的 关 傈
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(44) 牛 脾 酶 制剂 催化 白 氨 酰 胺 聚合 作用 的 初步 研究 PP EE
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氨 酸 转氨酶 和 天 门 冬 酰胺 酶 的 提取 及 其 性 质 -………: 许 延 森 刘表 如
二 全 大 区 化 的 研究
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(49) 所 入 煌 钵 革 天职 生 化 机 测 的 研究
(50) 生物 化 学 反馈 反应 的 研究 idee inning a
(51) 饥 俄 大 白鼠 肝 脑 的 谷 氨 酸 代谢 …
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(64) 白地 要 机 隐 中 甘露 村 的 组 定 及 其 形成 袖 负 的 研究 .。 … 张 树 政 sisi 10
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大 射 矿 的 照射 下 ,小 白 纪 胸腺 DNP 中 DNA 的 辐射 损伤 较 同 样 人 条件 下 单独 照射 的 DNA
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村 可 能 的 扣 伤 机 制 。
”小 白鼠 胸腺 1M NaCl 水 溶液 ,分 别 经 0, 500, 1,000, 2,500, 5,000 和 7,500 aK
44 等 剂量 的 > RIN, 按 硫 酸 十 二 酯 钠 及 氧 仿 方 法 提取 其 中 DNA。 在 含有 0.014M
| 粹 榜 酸 钠 的 0.14 M NaCl 水 溶液 中 ,测定 其 物化 性 质 (DNA 的 NMP 在 1.60 一 1.70 关 )。
”从 特性 粘度 和 与 Tm 的 下 降 , 题 示 了 DNP 中 DNA oe
ESAT. 在 同样 条 件 下 ,分 别 照射 由 小 白鼠 胸腺 提取 DNA 的 1M NaCl 水 溶液 ，
粘度 和 Tm 的 下 降 比 较 在 组 。 久 [9] SRR SREB.
了 作者 从 预防 药物 ,例如 谷 胱 甘 肽 ,对 DNP 中 DNA 的 辐射 扣 伤 具有 保 久 作用 ， 以 及 ， :
和 _DNP 辐射 损伤 的 省 度 效应 中 关 明 了 DNP 中 DNA 的 辐射 损伤 主要 是 通过 间接 作用 造 thick ge
a Rte H DNP 中 DNA ARSE DNA 辐射 损伤 的 不 同 剂 量 曲 绪 形式 ， =H
Tv DNP + DNA 的 辐射 损伤 是 由 二 种 不 同类 型 的 损伤 机 制 和 组成 的 :
6) 和 蛋白质 的 加 强 效 应 : 在 DNP 中 DNA 的 辐射 损伤 曲 颖 的 前 一 部 分 ，Tm 与
tet Big SS ELA 28M , a5) TM, RAS AR ES DNA 损伤 的 剂量 曲线 ,推测 了 DNP
下 中 蛋白 质 加 强 了 DNA 的 辐射 损伤 , 2% DNA 分 子 内 部 和 分 子 之 闫 正常 相互 联系 的 破
于 ,从 而 改 释 了 DNA 的 分 子 粘 构 及 其 相应 的 物化 性 质 m。 i
AM (2) DNA 的 辐射 降解 : 在 剂量 较 大 时 ，Tm Be [7] Gey F REWE AS SEN, te mf
4 DNA 辐射 损伤 的 章 量 曲 矿 相 平行 。 推 测 了 以 电 欢 辐射 造成 DNP 中 DNA 的 任意 降解 “ 了
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者 主要 参考 文献 多
] 过 [1] Doty, P.: “Secondary Structure in Ribonucleic Acid”, Pra. N.A.S. (U.5S.) [1959], 45, ty
_ No. 4, 482. 名
工 2] Peacocke, A. R.: “The Acfion of y-rays on DNA in Solution”, Proe Roy. Soc, B (Lon-
don) [1958] 149, 511. q
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Co” y 线 致 死 剂量 照射 对 豚鼠 .大 鼠 、
脾 肝 成 糖 代谢 的 影响
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已 知 电离 辐射 会 引起 组 织 内 ,尤其 是 造血 器 官 中 核酸 的 严重 下 降 , 磷 酸化 活力 也 发 生
肆 化 , 作 篱 核酸 , 核 苷 酸 及 辅酶 等 重要 组 成 成 分 的 成 糖 , 其 代谢 受 射线 的 影 兆 ,未 见 妇 献 报
导 , 本 广 报 告 用 豚鼠 (250 克 ) 和 与 大 鼠 (150 克 ) 经 Co” y 线 700 合照 射 和 后, Fe 5 AMF, 24 rp
时 , 48 小 时 与 72 小 时 断 头 , 取 出 组 经 ( 脾 或 肝 ) 。 称 重 后 在 玻 质 与 北 器 中 配 成 了 0 毫克/
毫升 水 的 匀 兹 ,然后 按 上 文 报告 方法 ,研究 其 友 糖 代谢 的 娩 化 ,每 灵 实 验 用 二 只 照射 动 物 ，
一 只 下 常 动物 。 ae
表 11 5 100 SRACAR RUBIES ARTS, HOFer RR Ay a om A
解 , 在 照 后 5 小 时 先 增高 , 然后 逐渐 下 降 , THES CAUSE LIPS, AUR PERE Ab aS
400 俞 也 有 类 似 的 情况 ,但 释 化 比较 小 ,下 降 速 度 也 慢 。
321 700 MRHRAR, 豚鼠 脾 匀 效 中 戊 糖 代谢 的 影 澳
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对 AA 28.0+ 6 (8)* 57.36+19 (8) 32.8 +7.8 (7) 23.8 + 6.3 (7)
5 32.1+ 6 (4) 34.0 + 8.5 (4) 47.3 +7.5 (4) 18.2 + 4.6 (4)
24 28.6+ 9.5 (4) 26.0 + 6.4 (4) 41.2 +8.7 (4) 9.5+ 4.4 (4)
- 48 17.0+12 (4) 17.7 + 8.5 (4) 25.2 +3.5 (4) 10.7 + 4.4 (4)
| 72 19.6+ 8.5 (4) 36.2 +15 (4) 31.02 + 7.7 (4) 6.96 + 1.4 (4)
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复 , 而 戊 糖 的 合成 与 脾 不 同 也 是 先 升 ( 照 后 5 小时) 24 小 时 下 降 , 低 於 正 常 , 但 到 48 小 时
双 恢 复 且 反比 正常 需 高 ARACEAE IS A AB AILSA Ui) SS SB AU
其 原因 不 明 。 Bie.
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-一定 的 排列 砍 序 ,位 置 等 ,射线 破 说 了 过 种 秩序 ,也 就 援 亿 了 酶 系 之 问 正常 的 运转 ,因此 引
起 代谢 的 障碍 ,氧化 磷酸 化 的 下 降 即 是 明显 的 例子 , 戊 糖 代谢 的 改 委 , 更 进一步 说 明 射 芒
对 机 体 损伤 的 原因 之 一 “ 复 酶 系 芒 ”的 破 壤 。
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性 蛋白 质 后 所 得 的 滤液 中 ,用 纸 上 层 析 法 分 析 检定 生成 的 .对 酚 试 剂 呈 阳性 反应 的 非 蛋白
质 物 质 的 本 质 。 研 究 粘 果 明 , 演 些 物质 中 含有 五 个 多 肽 。 它 们 都 舍 有 甘氨酸 和 于 氨 酸 。
它们 的 其 父 氨 基 酸 组 分 篇 :
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ik Il: KASAM BAM MAR BAR.
ikIll: AR GAR. AAR BAR |
IV: RAR BARACAM MAM AAR GAM ZAR (RIIEARD) «
ik V: KASAM HAR SAR MAM HAM. PAM HRA RMR
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非 蛋 白质 物质 。
在 吴 害 氏 提 出 他 的 缀 性 学 说 以 后 ,一 般 均 认 人 篇 释 性 作用 破 壤 了 蛋白 质 分 子 的 付 价 键 ，
因而 改 释 了 蛋白 磋 分 子 的 二 级 车 构 和 三 狼 粘 构 。 RNR ABM be RR
白 加 热 爸 性 时 有 水 解 作用 。
测定 血清 清 蛋 自 和 球 蛋 白 的 新 方法
BRIBE 王 淑 春
《北京 大 学 生物 学 系 生物 化 学 数 研 室 )
测定 人 血清 中 的 清 蛋白 和 球 蛋 白 合 量 在 临床 人 珍 断 上 有 意义 。
在 微 酸 溶液 中 加 热 , 血 清 球 蛋白 释 性 ,而 血清 清 蛋白 不 磷 性 。 释 性 球 蛋白 可 以 在 等 电
区 域内 沉 泪 析出 。 在 微 碱 溶 该 中 加 热 ,血清 球 蛋 白 和 清 蛋白 都 释 性 。 RTE A eee
或 微 碱 溶液 中 可 以 逆转 生成 天 然 蛋白 质 ,而 血清 球 蛋 白 则 不 逆转 。 血清 球 蛋白 和 清 蛋白
在 达 性 作用 上 的 过 两 种 差别 均 可 作 篇 分 风 测 定 过 两 种 蛋白 质 的 依据 。 我 们 利用 演 两 种 蛋
白质 的 第 一 个 差别 ,研究 了 分 离 测定 它们 的 具体 条件。 实验 过 程 和 和 烙 果 如 下 :
取 人 血清 0.05—0.1 毫升 , 用 水 稀释 50 倍 , 加 HCl 调 到 PH 2-8 和 后, 在 沸水 洛 中 者
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10 Ait. IT, A NaOH 中 和 到 pH 6.0, ALOE. ARUN,
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蛋白 一 球 蛋 白 一 血清 清 蛋白 。
另 用 亚硫酸钠 法 测定 计算 同 检 血 清 楼 品 中 的 清 蛋白 和 球 蛋 白 含量 。 65 RR Aa |
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从 附 表 可 以 看 出 ,和 亚硫酸钠 法 相 比 , 用 本 方法 分 析 血 清 清 蛋白 的 烙 果 趋 要 偏 高 , 其
避 差 亦 似 较 大 。 过 可 能 因 乱 球 蛋白 帮 性 沉 沽 不 完全 。 分 此 测定 血清 中 过 十 种 蛋白 袖 的 具
体 实 险 人 条件 逮 须 淮 一 步 探 索 改进 。
酰 化 作用 对 木瓜 蛋白 酶 活性 的 影响
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《北京 大 学 生物 亢 系 生物 化 学 教研 室 )
“ Smith 等 合 明 用 亚 确 酸 不 理 木 瓜 蛋 白 酶 , 把 种 氨 酸 的 6- 氨基 转 楼 成 沟 基 后 , 木瓜
酶 失去 活性 。 但 用 甲 基 轴 脲 处 理 汞 木瓜 酶 把 顾 氨 酸 的 -氨基 转 笋 成 肛 基 时 , THA,
因此 , 加 氨 酸 的 6- 氨 基 似 需 木 瓜 酶 表现 催化 作用 的 必需 基 团 。 已 知 乙酰 酮 和 乙酸 酥 等 乙
酰 化 玫 主 要 作用 於 蛋 白 贸 的 氨基 。 我 们 研究 了 乙酰 化 作用 对 欠 木 瓜 酶 活性 的 影响 。 灶 果 ，
及 明 乙酰 化 木瓜 酶 的 催化 活性 比 木 瓜 酶 题 著 地 降低 。
我 们 使 用 的 两 批 木瓜 酶 是 从 1:350 粗 木 瓜 酶 商品 提 制 的 。 木 瓜 酶 I (简写 PIT) 对 Z
亮 氨 酰 胺 和 葵 甲 酰 精 氨 酰胺 (简写 BAA) 的 比 活性 分 别 篇 0.069 和 0.40， 木 瓜 酶 II ( 简
写 PIL) 对 和 这 两 种 底 物 的 比 活性 分 别 篇 0.071 和 0.387。 制备 乙酰 水 瓜 酶 使 用 的 乙酰 化 剂
篇 乙酸 醋 , 乙 酰 化 作用 在 含有 乙酸 敬 的 磷酸 组 种 液 (p 也 7 一 8) 中 ,在 1 一 3"C 下 进行 。 乙
BEAR ig I (AcPI) 的 酰 化 程度 篇 每 克 分 子 酶 , 28.3 克 分 子 乙 酸 ,乙酰 木瓜 酶 II (AcPII)
的 酰 化 程度 坊 15.8 克 分 子 乙酸 。 木 瓜 酶 酰 化 程度 是 按照 标准 方法 测定 的 。
AcPI 和 AcPII 在 水 中 溶解 度 很 低 ,我 们 使 用 它们 的 1 RSA, TE 1M 尿素
溶液 中 它们 在 室温 下 的 溶解 度 分 别 乱 0.53 和 0.98 毫克 氮 / 毫 升 。
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。 。 升 , 其 中 各 租 份 的 洛 度 篇 40 mm BRL SEAT (PH 7.0), 0.58 mm EDTA, 7.5 mm KCN,
a 。 也 mm FER MENE (IED) 和 0.5 M 尿素 (来 自 酶 溶液 ) 。 酶 的 省 度 志 0.045 一 0.25 毫克 氮 /
Bite 应 当 指 出 A SHH UAE 0.5 M 尿素 小 不 影响 木瓜 酶 的 活力 。
“我 个 的 实验 粘 果 避 明 ,如 果 以 木瓜 酶 (PL) 对 亮 氨 酰 胺 的 活力 需 100, ZAC I
有 有
的 降低 了 木瓜 酶 的 活性 ， 乙酰 化 的 程度 越 大 ,木瓜 酶 活力 降低 的 越 多 。
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| AE 内 乳酸 的 积累 过 程
二 由 机
《北京 大 学 生物 学 系 生物 化 学 数 研 窒 )
分 的 磷 化 ,对 於 深 入 理解 缺 氧 现 象 有 很 重要 的 意义 。
BAARAM RH.
HRUHBAB RHA ISB —-RS 1.6 克 左 右 。
后 用 液态 氧 固 定 。 正常 动物 的 不 理 傈 将 整 朵 在 液 齐 氧 中 国定 。
我 们 共 进 行 了 三 组 实验 :
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ATT PE AIG IX eS Ta FA Be FSW] Fs FUR Hk o
第 三 组 实验 : Be BT Ea a AG PSE Te DBS I] FHP PLR Eo
Peo DW PRK mS ES FE —2°C 以 下 , kA RL BSC SE
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PRS Ke Or PERSE IR FMR PARR Fy BEBURTME o
急 酸 的 定量 使 用 了 Barker 及 Summerson (1941) 的 方法 。 此 外 薄 在 部 分 实验 中
i We FAY PUBS et BH ETE ,篇 此 对 该 方法 中 的 某 些 实验 人 条件 作 了 一 些 探 讨 。
出 。。 。 实 险 桔 果 表明 ,大 白鼠 的 大 及 皮层 实际 分 篇 五 层 。 在 运动 区 和 视 区 的 胶皮 屠 厚 度 不
完全 一 致 。 但 是 不 同 个 体 同一 胶 区 的 同一 组 皮层 切片 所 含 的 帮 胞 层 基本 上 是 一 致 的 。
正常 忌 大 脑 咎 球 中 乳酸 含量 平均 篇 17 土 4.6 毫克 (ER). TERRA ESA
视 区 不 同 层 中 的 分 酸 含量 ,在 一 动 区 和 视 区 的 不 同 炎 胞 层 之 间 以 及 在 不 同 区 域 之 间 ,都 没
有 发 现 明显 的 差别 ,皮层 的 乳酸 含量 略 高 於 全 脑 。
” 0 PI) 和 乙酰 木瓜 酶 II (AcPII) 的 活力 分 别 篇 7.1 和 24。 ROE CE
SAB SNR A IE I | GAAS A RL A BF I SL RA
et AEST CAPR ED OED 2A |
BRERA IES ABS 7 HS ZAR TD he, EE i 1 一 10 a 然
胶 区 的 划分 是 根据 Woolsey (1952) 图 谐 进行 的 。 皮层 切片 的 制备 使 用 冰冻 切片
测定 木瓜 酶 I (PI) 和 乙酰 木瓜 酶 (Ace PI 和 Ac PIL) 反应 混合 液 的 炉 体 积 篇 1 毫
”在 缺 氧 时 ,乳酸 合 量 不 只 在 不 同 彰 胞 层 间 以 相等 的 速度 增加 ,而 且 在 不 同 区 域 之 间 也
等 量 的 异 高 。 乳酸 含量 的 增加 和 人 缺 氧 时 间 有 一 定 关 傈 , 断 头 后 1 EL TE
加 了 3 一 4 倍 。 2 分 甸 增 加 到 5 一 6 倍 , 5 分 猎 增 至 6 一 7 倍 。 随 时 间 的 延长 酵 鲜 强度 不 断
减弱 。 断 头 后 10 分 猎 即 看 不 到 乳酸 含量 的 明 题 释 化 。
缺 氧 状态 下 小 鼠 及 天 鼠 脑 中 氨基 移 换
5 IFLR) POS
ES BRR ATS
(北京 大 学 生物 学 柔 生 物化 学 数 研 室 )
我 们 在 以 前 的 工作 中 便 发 现 ， 缺 氧 时 脱 组 经 中 怨 酸 的 含量 超过 了 葡萄 糖 和 糖 元 所 能
OMA, 因此 提出 了 在 缺 氧 时 乳酸 可 能 由 其 他 非 糖 物质 ， 特 别 是 氨基 酸 转 才 而 来 。
研究 在 缺 氧 时 脱 组 织 中 氨基 移 换 酶 的 活性 磷 化 ， SSS PRM LAA FD
来 源 的 可 能 会 提供 线索 。
本 文 研究 了 在 缺 氧 时 大 鼠 和 小 鼠 谷 一 门 氨基 移 换 酶 活性 的 释 化 。 此 外 也 探讨 了 天 她
和 小 秘 在 缺 氧 时 是 否 表现 出 酵 解 强度 的 差 民 。
实 险 材料 需 成 年 大 鼠 和 成 年 小 鼠 的 公爵。 氨基 移 换 栈 活性 的 测定 主要 根据 了 Ohazy
(1950) 的 方法 。
造成 缺 氧 的 方法 : 体外 人 缺 氧 探 用 Thunberg 管 减 压 抽 所 的 方法 。 体内 缺 氧 是 将 去
Wy Wie SRE PUREE.
测定 乳酸 时 所 造成 的 缺 氧 方 法 是 将 动物 断 头 后 在 室温 停放 不 同 的 上 时间， 然后 立 投入
液态 氨 中 。 对 照 实验 是 将 动物 整体 在 液 氨 中 固定 。
HRP RA KA BA) BRIER TEOMA AR, HSM API He
酶 的 活性 都 有 所 增高 ,尤其 体外 人 缺 氧 时 更 篇 明 显 。 TERS REI OR ETEK
白鼠 高 套 小 鼠 。 而 在 缺 氧 人 条件 下 ,小 白鼠 的 转氨酶 活性 比 大 白 忌 有 更 明显 的 增高
缺 氧 状 态 下 大 白鼠 和 小 白鼠 胶 中 乳酸 增加 的 纸 对 量 有 较 题 著 的 差 慷 ， 襄 明天 自 鼠 的
酵 解 强度 高 於 小 白鼠 。 但 是 过 一 差 尼 主要 是 在 断 头 缺 氧 3 分 钾 以 后 形成 的 。
降低 体温 和 X 线 了 照 射 对 大 白鼠 肝 . 牌 和
十 二 指 肠 碍 淡 度 和 磷 更 新 率 的 影响
WE ERE aR ”高 天 笨 ” 李 建 起
(北京 大 学 生物 学 柔 放 射 生 物 学 数 研 室 )
委
本 实验 目的 在 於 对 “降低 大 鼠 体 温 能 否 对 X 菱 照射 的 损伤 有 防 访 作用 , 及 其 作用 机
itll” PA. SEAR 70 焦 ,雌雄 都 有 ,体重 在 82 一 120 克之 间 。 分 篇 四 组 : 即
不 加 任何 处 理 的 对 照 组 ;用 冰 水 降低 大 鼠 肛 温 至 18°C , 36 ZE 4 小 时 内 恢复 体温 的 降温 组 ;
”大 鼠 全 身受 到 X 线 500 y 一 砍 照 射 的 辐射 组 ;和 在 降低 体温 的 条 件 下 全 身 照 射 500 ?y 的
低温 辐射 组 。 各 粗 都 在 处理 后 4 小 时 左右 注射 用 Ps 标记 的 NasHPO4 稀释 液 (0.114 M),
腹腔 注射 ,每 克 体 重 注射 相当 0.05 微 居 里 放射 活性 的 P2? ,估计 狗 坊 0.035 毫克 / 克 体 重 的
RAB. 注射 后 再 隔 4 小 时 左右 杀 死 大 鼠 , 取 出 肝 、 脾 .十 二 指 肠 样品 30 一 60 SHA,
FUE BEA HP AE IE FBR BET
HEGRAA: 大 鼠 肝 `、 脾 、 十 二 指 肠 各 含 磷 平 均 篇 3.19, 3.27, 1.80 毫克 / 克 混 组 织 ;
肝 、 脾 的 个 体 差 殿 世 大 。 降低 体温 使 肝 、 肿 的 磷 省 度 下 降 ERA). HERI
效果 。 入 可 能 由 於 过 些 器 官 充血 ,使 磷 的 省 度 下 降 。 大 上 鼠 和 组织 的 磷 更 新 棕 用 Pa 的 相对
活性 ( 千 县 征 / 分 甸 / 毫 克 磷 ) 来 表示 。 大 鼠 肝 的 磷 更 新 棕 最 高 ,十 二 指 肠 次 之 , 脾 最 慢 。 降
温和 辐射 处理 都 增 快 了 脾 和 十 二 指 肠 的 磷 更 新 率 。 大 和 鼠 在 降低 体温 条 件 下 受到 X IR
射 , 肝 和 有 牧 的 磷 省 度 仍 下 降 ; 但 脾 和 十 二 指 肠 的 磷 更 新 李 就 不 像 单 独 受 到 X 粹 照射 处 理
HARI
X SAP RESp | Sz BUMEREAE RE UEL EIY
ETH GRRL PBL
a 中 和
(北京 大 学 生物 音 和 放射 生物 学 教研 室 )
用 电子 题 微 镭 技术 和 伍 组 给 化 学 方法 观察 了 小 家 鼠 精 原 组 胞 与 精子 组 胞 在 300 命 习 射
z Be ENS 5 KSA Ss AIL, , 赣 钢 察 到 以 下 一 些 现 象 :
精 原 粗 胞 大 量 壤 死 , 间 表 现 需 各 种 阶段 的 损伤 与 破 壤 类 型 ,最 恬 重 的 是 各 粗 胞 侣 烙 构
” 破 琅 ,整个 棚 胞 由 无 数 大 小 不 同 的 空 泡 组 成 , 核 内 的 最 小 基本 颗粒 与 蒜 状 烙 构 (100 一 200
A) SUE AICHE AIHA, TANFL BAH DNA 与 RNA 完全 销 失 。
一 ?7 一
和
?
a
AS 大
~%
一
TAMERS: 工 核 内 电子 密度 很 大 ， 圣 Schiff 试 玫 与 甲 基 要 具有 正 反 订
“的 案 状 千 构 ( 粗 1000 一 2000 A) ae BRIS, AVbHIS 300 一 400 A 的 较 大 显 粒 增多 。 核
‘A SUE HH Be GBA (1500 一 2000 A), 2. KEK ALR PMR
RE TUE TC
a 莫 .
(At KAMER)
FUP AREAS [SSL 28 (1962) ,132] MM ERAT HRT. &
BESE, FED IES 5.6 电子 伏特 ， SASL IES 0.8 电子 伏特 。 ae i UR 1B
RPE AS IEEE |
GAIA SRO ATs Gp ESTEE IE USER TSE RON
。 子 能 讲 和 提出 以 化 学 反应 的 方式 完成 量子 能 蹊 脖 的 理论 ， 从 而 有 助 认 探讨 生物 催化 电子
- 论 和 生 有 物 牛 洲 体 性 质 的 关 傈 。
3) ， 诗 算 表明 ,如 果 蛋 白质 分 子 和 电子 施主 分 子 ( 或 受 主 分子 ) 组 成 电荷 球 移 铬 合 物 时 , 则
EST MERE A IEE ERA ER EE ORE ER. CHE
RBH MBAR’ . TAMACBRET GO MEAHALE GREER) 中
CHIEMECHEE MEE). RANHETECRRERSARS MER “Et
R” RM, ZEB HUSA ET. 过 样 就 由 一 个 能 级 距离 较 大 的 路 脖 过 程 :
| (AE=1— A) 分 解 坊 两 个 能 级 距 见 较 短 的 蹊 脖 过 程 (4B:s7 一 4+Q fil 4E,=—Q
且 4E,+ 4E,= 4E, HIE ee PE eT A Re
H, QEBL—ARW litt (FE ABE) o 3
”因此 , 铬 合 物 在 吸收 jz = AE; 和 hv, = JE, 的 光量 子 和 后 ， 就 会 在 尖 带 中 出 现 自
由 电子 。 过 就 是 通常 的 由 光子 激发 所 引起 的 量子 龙 蹈 脖 。 但 值得 指出 ,在 生物 体 中 有 可
能 以 化 学 反应 的 形式 来 完成 上 述 量子 态 的 蹊 逐 , 从 而 产生 电子 转移 和 牛 潮 体 性 质 。 AS
在 和 蛋白质 DT RAD POE HT eB 过程 和 和 氧化 一 一 还 原 反 应 之 间 存 在 着 一 定 的 对 应 关
傈 。 和 蛋白 质 分 子 卫 和 电子 施主 分 子 D pb anit tity hob DP wibianiice Ses
HERA“ PRG TKRE” 0 RMR T BU EET
DP Waa FP, «.¢2) DtP? eee,
Pen e)! Pit Agee POA PAs o> Pi An,
TAFE (1) REFERERS DRI, FEET REM LAER KARA -
PER WBE S NE. WE (2) BEM ER, EE ae
AEG LRM LIA (2) HEROES ER ER AR" i Dt 和 带 一 个 自由 电
了 予 的 蛋白 质 分 子 P-。 在 解 砍 过程 中 , 随 着 D+ 和 P- ROR, ERLE eR
ROME RSL RRA ER A BS. EE (3) 表示 蛋白
Awe P- 在 使 电子 受 主 分 子 ABA, 恢复 至 原 态 P。 TEETH LIE (3) BER
id Aa iol
证 有 Ue Lot) o ) taken mmm gO Fb 六
’ 和 y 1 本 7 x ie
paneane 自由 电子 被 电子 受 主 分 子 A RHE.
因此 , 在 氧化 一 一 膛 原 过 程 中 , 蛋白 质 分 子 略 合 物 必 有 和 牛 闭 体 性 质 ， 而 氧化 St
反应 双 是 糙 助 於 志 子 转移 来 完成 的 。 通常 过 类 化 学 反应 实际 上 是 存在 的 。 另 方面 ,不 能
由 以 上 分 析 ,得 出 烙 合 物 有 牛 潮 体 性 质 必 件 有 氧化 一 一 膛 原 反应 的 灶 洽 。 ASB AS
aD, 用 光子 激发 的 路 脖 SA a HAT ETT Wo
Ls Son BAP 2 WAHT PS SEL CORSO) Ay HEL RA AU
RARE ERNE A A SAR AT AL AF
WE Be Hs Bs A ep eR RE EO ALC SR
PMBEAAOAR LDS RAKE TE, 例如 黄 素 蛋白 形成 电荷 速 移 糙 合 物 , 确 有
”电荷 球 移 吸收 光 谐 。 在 一 些 氧化 一 膛 原 反应 过 程 中 和 在 光子 激发 的 路 球 过 程 中 都 发 现
| 有 和 非 偶 电 子 的 电子 顺 磁 共 振 信 号 。 PURINE, LE EER TA
REAR
ANS DF PERU
fe | OE
(ACR ALE)
我 们 人 用 激 子 和 肉 灾 模型 研究 正 烷 属 胎 分 子 的 能 量 转移 和 电 论 问题 ,计算 电子 能 谐 、
电离 能 及 能 量 转移 殉 牵 与 分 子 链 长 度 的 关 傈 。 得 到 的 初步 辕 葵 和 实 砍 符合。 本 文 将 着 重
”探讨 生物 高 分 子 中 激 子 方式 的 能 量 转 移 问 题 和 电离 问题 。
“i FEW) te FI RA BA PEEK (--CO—NH--)y, EARNER .
和 氨基 酸 (—CO—NH—), 作 篇 单 体 形成 一 种 有 平移 对 称 性 的 粹 型 分 子 链 。 单 体 间 存在
”着 一 定 的 能 相互 作用 。 分 子 镑 被 激发 往往 体现 篇 链 中 一 个 (或 数 个 ) 单 体 被 激发 ,被 数 发 ，
”的 单 体 不 定 域 蕉 某 个 位 置 ,而 在 整个 分 子 链 中 至 动 ,形成 非 定 域 化 激 子 。 经 过 计算 ,得 到
一 个 基 龙 能 航 和 N 个 公有 化 的 激 子 能 级, 后 者 形成 写 度 篇 4M' 的 激 子 能 带 CM! 是 激 子
AUF BS AAA TE Ae Se BM’ 二 0)。 由 基 能 能 级 到 亲人 带 底部 的 距离 篇:
AEy = 4E, + 2M‘! cos—
, ; Nit i
tage AL, 和 4B y ETAT N 个 单 体 分 子 链 的 激发 能 。 因 此 ,电子 吸收 光 谐 随 分
子 链 中 氢 键 数目 的 增加 而 向 长 波 位 移 。
分 子 链 被 电台 往往 体现 乱 链 中 一 个 (或 数 个 ) 单 体 彼 电 几 ,形成 空 灾 。 由 於 空 穴 和 相
涛 单 体 的 相互 作用 (作用 能 用 M" 表示 ,通常 M" <0), ， 因 此 在 分 子 链 中 空 灾 具 有 非 定 域
化 的 性 质 。 沟 过 计算 ,得 到 含 N ALAS EERE 有 坊
太 三 六 十 2Mecos 一 区
N+1
7636 Ty EMU RERE | AUG , EERE BA Pe SE A HT ET A
us D ome
的 过 性 ,电大 能 相应 地 有 所 升 高 。 由 状 激 子 和 空 穴 的 砷 定 域 化 性 质 , 分 子 侵 中 局 部 损 介 的
REM). HEARTS, 上述 现象 得 到 一 些 实 验 的 惑 明 。
RE ， 各 果 分 子 钢 和 有 周转 的 分 子 (如 介 碳 ) 之 加 按 共振 机 再 转移 能 量 ， eee
BESS JA ESF BS BR BE BY EA BE) FS Fe PE CTE Ho
上 面 得 到 的 一 些 初步 千 论 和 人 工 合成 的 有 机 高 分 子 的 实验 事 实 符 合 ， 亦 能 解释 现 有
的 一 些 生物 高 分 子 方面 的 实验 事实 。 例如 , Cy 射线 照射 的 蛋白 质 , 克 有 非 定 域 化 电子
( 空 突 ) 的 顺 磁 共振 信号 。 实 验 亦 表明 , 灵性 蛋白 质 通 常 是 失去 局 部 或 全 部 的 氧化 一 逮 原
反应 的 功能 。 看 来 , SEE AA Oy EE ARE RR EKA RA,
a mL PA et BE
及 其 形成 机 制 的 研 完
Rene 86H
中国 科 学 院 微生物 研究 所 ,北京 )
我 们 在 进行 白地 才 (Geotrichum candidum Link) 友 糖 代谢 的 研究 时 发 现 无 痊 在
葡萄 糖 上 或 木 精 上 培养 的 白地 零 其 租 胞 中 均 有 大 量 的 多 元 醇 (6 一 7 多 乾 重 ) REE,
明 是 甘露 醇 。 eee 80 匈 乙醇 提取 ,和 经 织 层 析 和 纯化 后 ,再 由 无 水 乙醇 中 重 烙 晶 , 得
白色 对 状 烙 晶 , 融 点 165—166°C (文献 值 166°C), HEATH BBE (166°—167°C) ZR
合 融 点 亦 需 165—166°C, We 2,3,4,5 一 四 乙酸 酯 衍生 物 融 点 篇 124 一 5"C。 文献 值
(123—5°C), 已 知 甘露 醇 的 衍生 物 及 二 者 之 混合 物 融 点 均 相 同 。 RRL RRL
电泳 分 碾 均 与 已 知 匡 露 醇 相 同 。( 昂 表 IT)
表 工 SAE TTR ERE
E J Bf (Rs) 儿 | BE tk
0.1M NaV0Os
cm
一 -一 | 一 -一 | 一 一 一
4.0 EER
WSeB3+-B sis 2 cs
HE SAAR A BL FS EE PY TG a BE , TEI CR ST FE RD ,一直
未 能 解决 ， 近 来 Yamada 等 四 指出 在 稻 瘟 病菌 (Piricularia oryzae) 中 甘露 醇 形 成 途
径 如 下 式 :
技术 助理 “” 那 淑敏
LT
Ee i P ， ee
¢ SETS
6_ 磷 酸 果 糖 22 > 1- 磷 酸 甘 露 醇 二 一 > 甘露 本
我 们 的 研究 粘 果 奥 此 不 同 ， JE ATT SCP HE BI LS EF
RE.
| ae EC RR i aS ACT NSE TPNH pr,
”用 分 光 光度 计 在 波长 340 SRK RAT WMGMASI A TPNH 被 氧化 而 引起 的 光 密 度 的 下 降 -
(AO. D./8 分 钾 一 一 0.09) 。 以 果糖 磷酸 酯 代替 果糖 则 无 相似 作用 , 光 密 度 帮 化 与 内 作用
ALE, AALS. AREA ts A Lee BE sissies
SBE SD BLT BRE HS AE REESE A Ro
#775 HE LEE SE, HEI RE RE DPN 所 还 原 , 亦 不 能
催化 甘露 醇 被 DPN 所 氧化 。 可 知 催化 果糖 还 原 坊 甘露 醇 的 酶 需要 TPNH 篇 氨 供 体 。
FEA LE Be REE DPNH pre (AO. D./3 44i=—0.285) 以
Ki RMB DPN 所 氧化 (AO.D./3 分 钾 = 十 0.121) 。 但 不 能 催化 甘露 醇 被 DPN 所 和 氧
化 。 过 是 由 於 在 木 糖 上 培养 的 HG AT ACRE, TAC BLL IES 2,
3,4 WRF ZAM ROL, Ai E IE
FS SEA Ay BPR BNE) (0.50 GSE AF STD AEE / FE) 0 因此 推测 甘
” 露 醇 的 形成 机 制 如 下 :
eer
epee ———> seme TPN, ap gee ‘
S20 Yamada SHERAM. 在 一 些 租 菌 中 有 需要 DPN STROM, 8
， 未 见 有 需要 TPN 的 十 圳 本 股 秘 栈 ,我 们 所 提出 的 有 可 能 是 一 个 新 除 , 催 待 进一步 研究 一
明 。
文 es
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[2] Hiromi Yamada, Koji Okamoto, Kayoko Kodama, Shozo Tanaka, Mannitol formation
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Acetobacter suboxydans and candida utilis. Biochim. J. 1956, 64, 385.
NI
eer ee
人 工 肝 上 胶 功 能 降 肆 动物 的 精 氮 酸
FAG RUBIO
WYK | Beier SRG
Cpa SSA i BT)
RED ORE EB 2 CRAKS RABE, MAR AeA e
FE FV AWRAR DD BE , ROE) PRS AE TR HE BES, TE A EB, 往往 不 能
发 现 其 障 三 程度 ,目前 , FERRARA ti See AL , PRE AP we BE
ihe Be , FPR, ICA AEA RW TRA. A i ee,
ANAM HORE HEISE. 酶 分 子 的 大 小 , RTE AUP EAR RE IF BBS eh FE,
oe MAR OAH. ARB RBA AIS , TE eee
行 研究 。
从 动物 整体 研究 肝 脆 在 代 澳 中 的 功能 ; 在 糖 代谢 方面 , 过 去 有 后 学 糖 负 荷 试验 ,在 合
RTT RT SRR, IOC ATED, 我 们 想 先 在 动物 身上 适 生
ec ee ee LS |
实验 方法 与 结果 概括 如 下 : ERERRA AM, JHETRARA OR, mE TE HI
间 , 用 CCl J Xt SFP wae Baise By HY , AR FETT AER Ae UR
| 具体 方法 是 : 将 家 腔 空 腹 探 血 合 , 按 每 公斤 体重 注射 精 氨 酸 (PH=73—7.4) 100 %
Be. PRE 10 分 , 30 分 , 60 分 , 90 分 及 120 分 间隔 进行 探 血 ， 测定 其 血 中 精 氧 酸 奥 尿素
的 合 量 。
MEXHR, KHHN BRAKE THER, 经 一 小 时 的 间隔 注射 CCl4: 0.4/kg, 0.2/
,kg， O.1/kg, 0.05/kg 毫升 , 经 24 小 时 和 后, 按 上 述 方法 ,再 进行 同 楼 的 负荷 试验。
精 氨 酸 的 测定 是 按 Sakaguti 及 Weber 氏 法 尿素 的 测定 是 按 脲 酶 法 进行 的 。
”我 们 共 做 了 11 RRR; 注射 CCl. 前 的 精 氨 酸 负 荷 试 雁 , 115 只 家 殖 中 有 5 只 在 负荷
后 60 PEEK BURA. AT 6 只 在 90 分 钾 恢 复原 来 水 平 。 但 注射 CCl 后 的 负荷 试验 ，
11 RARE 120 分 钾 都 未 恢复 负荷 前 的 水 平 ,由 此 看 出 家 驶 注射 CCl 后 , 其 精 氨 酸 的 代
RABE MAK ( 表 1)。
Kl AM RACAL HAR SASH
Al far BY ti HVE PRABR HS R me |
精 氨 酸 的 含量 rt
mg % 10 77 $% 30 47 St 60 分 链 90 47 Saf 120 37
th a 0.74 8.00 5.12 1.05 0.70 6.70";
TEM AY op UR +0.16 40.72 十 0.80 40.36 +0.15 +0.14
夏 荷 后 精 氨 酸 降低 这 ig ”一 36.0% 86.9% 91.2% 90.8%
# CCl #&H Ay 0.77 8.24 6.14 8.84 2.44 2.14
aw +0.22 +1.00 +0.79 +0.56 +0.49 +0.61
Aer ema eA | he 一 25.426 53.426 70.3% 74.0%
rr er rrr er ne er ne
ein TED cee
SE RAL RIAA HE
(1) 注射 CC 后 ,其 血 中 尿素 含量 比 正常 时 增加 。
(2) BEBE CCl Be 24 小 轩 进 行 精 所 酸 负 荷 试 双 时 ， 其 血 中 尿素 的 天 高 过 上 比 正常 凯 低
本 ( 表 2)。-
mg 和
Heh PR RH ES 最
| 60 5y4a 90 分 血 120 433
| ERA CR 29.59 | sito | . 30.5
+2.67 +8.03- 士 2.73
尿素 升 高 率 ， 29.8% 33.0% 31.5%
# CCl MAG 34.1 34.5 33.8
“etl +2.81 +2.10 Harte ，
REF A 21.8% |. . 20.0% |
由 上 面 二 个 实验 结果 综合 看 出 : ERR CCL 和 后 的 负荷 试验 中 , SAMAR
牵 降 低 同 时 ,其 尿素 生成 速 棕 亦 降低 。 根 据 动 物 肝 有 有 党 富 的 精 氨 酸 酶 存在 , 可 以 说 明 负
荷 后 的 精 氨 酸 主要 在 肝 有 受 精 氨 酸 酶 分 解 成 尿素 。 因 而 精 氨 酸 酶 是 精 氨 酸 分 解 速 棕 的 限
制 因素 。 因 此 ,由 此 试验 中 的 精 氨 酸 分 解 成 尿素 的 速 棕 ,初步 可 以 看 出 肝 有 在 精 氨 酸 代谢
中 的 功能 。 但 在 动物 身上 的 观察 ,是 否 能 应 用 瞄 床 病人 , 倚 需 进一步 深入 研究 。
BA JS an "FE-PE ENE TE 2
FW) UE I FF A
KSEE Re 李 光 展
〈 硒 建 医学 院 生物 化 学 铬 研 租 )
1958 年 神 前 武 和 发 表 了 检定 血 中 恶性 磷 酯 作坊 早期 癌 腹 特 贾 诊断 以 及 提取 和 鳅 定 用
瘤 组 织 中 恶性 磷 酯 的 报告 。 根据 该 报告 所 提出 方法 和 恶性 磷 酯 的 性 质 ,我 们 注意 了 试剂
的 高 度 纯 化 ,特别 是 无 水 , 避 灵 酶 ,阳光 和 氧 的 破 壤 作 用 ;在 进行 罗 上 层 析 过 程 中 更 注意 了
试剂 的 DH , 溶剂 的 比例 , 层 析 泪 狐 混 度 处 理 和 宝 渤 等 条件 。 在 上 述 和 休 件 下 完 人 至 按 原 法 操
TF, aR Aaa IE FS A iy FA Ate a ea FB eT 89 IGE 2) a SUAS RSE AS AR
He A FT Mid ads AE HE A PS VE — eB ARIE PS A Be ER RAS EFT RT, RSL A
SRR A BAT BA, as #5 0.38, 0.50, Ti FEAR AAAVEN KEES HS TER BR ，
FE o FABER AB ERAS +p Se HH ASE PE RS TE SS AE KI Ps IS BI AK IR A
PAR, SrA ETE FS A BN SE BBA 8S ERAS PEER ld PE TY ES
BU we EF cp HH BLA BAAS ey BAC Rit FS 0.38 F1 0.51, BLT AT RANRMAMSEA—-K, KH
PRB A A CR A HS EI — HK , HEH A IRR A Rs RR
PRATAP Oa OU ee ee BNW
PN a aoe:
也 能 成 功 地 得 到 上 类 似 以 上 的 层 析 粘 果 。 | RES QO 个 正常 人 , 10 (RED HE ES ea
20 个 腹水 癌 小 白鼠 腹水 样本 检定 粘 果 准 行 比 较 分 析 , 我 们 讽 坊 在 过 样 休 件 下 没有 性 质 不
同 的 磷 栈 存在 , 故 观 乱 亦 不 存在 恶性 硒 瘤 特有 的 恶性 磷 酯 。 我 们 看 到 所 有 的 腹水 癌 腹 水
或 少数 癌 腹 血 有 时 有 较 多 磷 酯 , 其 中 Ry 25 0.51 的 层 析 点 更 明显 ,但 是 东非 各 种 恶性 胜 瘤
的 血液 榜 本 都 有 增加 。 因 此 我 们 同意 1956 年 Haven 和 Bloor 二 氏 作 过 讨论 提出 大 瘤
生长 通 程 中 血 喜 常 出 现 酯 血 症 ,但 不 一 定 有 磷 酯 的 增加 。 RMA
se ala gains a allele
本 工作 过 程 中 承 戴 金 . 吴 徽 洽 二 同志 协助 技术 操作 ， 特 致谢 意 。
I 糖化 力 的 研究
WARE OKIE
(HES SEA Aa)
SINE We aA FYE 1724 年 , 渤 今 已 200 Phe WEA. ESM BR
JO EOE WES Be op IAEA TE, AIS RE ARTE EST
DMO FA, WCE -SUEE ET. 经 过 我 们 初步 试验 性 明 , 老 范 志和
黎 对 波 粉 的 消化 有 显著 作用 , 故 进 一 步 作 糖化 力 的 群 帮 研究 ,站 以 北京 乐 家 老 凶 同仁堂 出
产 的 神 府 作对 照 试 驹 , 根 据 糖 化 力 的 测定 粘 果 ,得 出 下 列 粘 葵 :
L 泉州 胸 药 厂 出 品 的 老 范 志 种 多 含有 糖化 酶 ,其 糖化 力 甚 强 ， et 1 Se AMM
POR HE Az ESE RAE a WH ASME DRT, HRS PTE 445 毫克 。
2 MERC SRC HHL DH OB), 2:0 ANAS 4.044, ER ACTA
EHS 4.4 一 4.8, 最 适 温 度 都 坊 50°C,
3. 老 范 志 种 谢 中 所 合 的 糖化 酶 对 酸 的 耐力 较 强 ,在 DH 2.6 已 开始 有 消化 作用 ,在 p 世
4.0 以 下 逐步 增强 ,北京 同仁 堂 种 再 耐 酸 力 较 能 ,在 pH 4.0 以 下 时 类 乎 不 旺 消 化 作用 。
4. SA IR PRE EE oS AE RIT,
5. iW HC a A ie Be PEE TEBE HBC 0
站
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中
上
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i is BE eT Wy I
See ” 施 秉 仪
CHELA RAPER 231 部 除 ,北京 )
号
核糖 核酸 、 核 糖 核 苷 酸 、 核 糖 核 昔 常 厌 5- 甲 基 间 葵 二 酚 (Orcinol) 反应 来 定量 测定 。
ABLE hs ey i ETE Fa AE BS HE BE RR, Ta RR AEE EF A HS CE
EAA J DA CS ATE PERS RU FSA, LAL DEAREST EGE MEME, CTT DO
WAR SG ZI SLI SSA Hy We AIRES 5 ACS BARC EAN s WERE TE MEE op HE
行 ,过 些 都 使 应 用 受到 限制 ,至 今 还 没有 简单 满意 的 测定 喀 啶 核糖 核 苷 酸 的 方法 。
HU RY REEL], Verwoerd RASPE ALT MORE SL mR IE Be TRON PE UR aE
BB TDR OER BRON ERIE. ARCHIE T mE BORE RR BL ULE
Bi SEMA 2 IMG FRI TE RO BPR FS FP JED CE CNT
进行 比 色 测定 。
操作 的 概要 是 :
(一 ) 尿 喀 啶 核 昔 酸 的 测定 一 一 将 适当 省 度 的 试 样 02 BE TY BB I I 0 OK WS
(3M, 以 NaOH 调节 至 pH 9.0 HER) 1 毫升 填 60° 水 浴 中 保温 3 小 时 ,加 水 至 2 BE
Ft, 加 5- 甲 基 间 茶 二 酚 献 剂 5 毫升 , 混 与 ,在 沸水 浴 中 加 热 20 SM, MS, 在 光志 比 色 诗
上 用 650 毫 微米 泪 片 比 色 。 另 用 已 知 省 度 的 标准 样品 给 婴 标 准 曲 矿 。
(=) 胞 喀 啶 核 苷 酸 -一 操作 和 与 (一 ) 相似 , EEE DH 18 7.0 GOWER AR
温 时 间 工 5 小 时 。 保 温 后 用 汉 NaOH 调节 DH 至 10, BEA 60° 水 浴 中 炎 式 保温 后 小 时 ，
加 水 至 2 毫升 ,加 5- 甲 基 问 茶 二 酚 试 剂 , 显 色 如 上 。
Pea Ue EACLE, DH, 保温 的 时 间 和 温度 , 核 苷 酸 省 度 等 休 件 与 是 色 的 关 傈 作 了
SR MeL Ws URE TCP ie of mE EEE LE ICO a
EME TEN TICLE 0.3: 微克 分 子 (489 100 微克 ) 以 下 时 是 色 深 度 与 核 昔 酸 省 度 成 直
SEU. 0.05 微克 分 子 ( 狗 16 微克 ) 即 能 产生 足够 的 颜色 深度 。 每 次 取 胞 哮 啶 核 苷 酸
[2/(8’)-CRP] 64.6 微 克 , 作 10 次 测定 , 测 得 的 粘 果 篇 63.48 士 5.88 微克 ,平均 回收 奉 98 狼 ;
$5 AIL MENE ATR [2’(3')-URP] 64.8 微克 , 作 8 ABLE, 测 得 的 平均 值 篇 64.4 士 1.73
微克 ,平均 回收 牵 99.3% . 在 上 述 条 件 下 胞 喀 啶 核 童 酸 的 显 色 牵 篱 也 -核糖 的 78.7 儿 , 18
nt AT MRE 88% + ROE MR MALIK IS 60.5% 和 68 多 。 呈 然 未 能 至 部 显 色 ，
但 因 在 一 定 站 度 和 围 内 核 苷 酸 含量 与 反应 光 密 度 成 正比 , 仍 能 用 於 定量 测定 。
HME TT REE A, ACTER DH 条件 下 的 不 同
是 色 程度 ,可 以 求 得 各 别 核 并 酸 的 近似 含量 。 FAU EN PE a HF EO
a
S12 FLEE FUROR BEE BLE 0 |
SEE I Gr HLT HE AS Tt RAB JE SA PIE IESE
敏 度 篇 高 。
ERB XK
[1] Mejbaum, W.: Z. physiol. Chem. 258, 117, (1939).
[2] Verwoerd, D. W. et al: Nature. 192, 1038, (1961).
sn SHEA ot AES Ce
吴 pF AE
(中 国人 民 解 放 军 和 后 字 231 BK, At)
我 们 用 电流 洱 定 法 测定 了 狗 在 毅 服 注射 个 胱 氨 酸 后 的 消长 曲 粮 吓 。 aR THE
双 身 分 佑 及 参与 生化 代谢 等 原因 , 在 血液 中 歼 基 含量 很 低 , 消失 速度 很 快 ,作者 以 较 老 稳
EAA DEH AK (GSH) 作 篇 典型 的 散 基 化 合 物 ,进一步 探讨 了 血清 对 呈 基 化 合 物 氧 化 速度
Po ae
以 一 定量 的 GSH 溶液 加 入 血清 中 , 使 GSH FETE IETS 3 pm/ml。 血清
Sa GSH 水 溶液 体积 之 比 坊 15:1。 混合 溶液 在 37 土 0.05"C 的 恒温 水 浴 中 保温 , TERT
以 37"C 水 蒸气 饱和 的 空气 通过 溶 芒 。 混合 后 不 同时 间 , 各 取出 样品 05 毫升 ,在 硝酸 乌
级 种 液 中 ,以 标准 GSH 溶液 作 反 涌 定 。 忆 每 毫升 溶液 中 8 也 Gr SSA (TEL 可 以 得 到 |
不 同 的 GSH By 4A 4058 Be a
| (1) GSH 4 0.66 M pH 7.4 BERR Kp Pain 30 4) SH, FIER EAR HS, vt
CTH, RAS BeBe. BE MIR —A Ari Aye 2 173 分 。
(2) GSH 在 血清 中 氧化 速度 极 快 , HEA LED TM, Ue Ee eR — PT LE 16.6 分 。
(3) MLS FRESE CRP CR (EDTA) Sie aS AE Be BE Kk, AE SR KB 0.66 M
PH7.4 的 磷酸 组 种 液 的 透析 ,测定 血清 透析 液 对 GSH AiR. GSH 合 量 在
ROBIN TH HHT LOM, GSH 渡 度 降低 一 牛 所 需 时 间 坊 88 分。
(4) 血清 对 照 在 上 述 实验 人 条件 下 保温 ,对 血清 蛋白 的 青 基 含量 没有 明显 影 澳 。
Oberst 让 篇 血清 蛋白 是 使 CS 了 HAHA HELTER AEA AR. 比
较 上 述 实验 结果 ,我 们 记 饮 在 血清 中 造成 GSH 催化 氧化 的 物质 ， ERS SAT, A
硅 亦 有 一 定 的 影响 。
血清 经 EDTA 透析 人 后， 仍 保持 部 分 催化 GSH 氧化 的 能 力 ， 推 测 其 原因 不 外 平 :
(1) 血清 内 经 EDTA 较 长 时 间 的 透析 , 倚 未 能 使 全 部 的 金属 隆子 除去 ; 2) 血清 内 含有
REARS RE RWAS BMSs (3) 合金 属 的 蛋白 质 , 例如 带 有 铀 允 子 的 Cerulop-
lasmin 的 存在 。GSH 极 易 被 过 些 金属 周子 所 催化 氧化 。 至 於 在 结合 状态 下 ,是 否 还 保
持 其 特性 , 谷 待 进一步 的 探索 。
主要 参考 文 EH
[1] Sk RE LER, Ape: “个 胱 氨 酸 在 血液 中 消长 速度 的 研究 ”， AREF
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Various Sotutions and biological fluids”, J, B. C. [1935] 111, 9.
陈 月 能 \, 唐 秀 兰 二 同志 参加 技术 工作 。
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抗 元 性 的 影响
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(中 国医 学 科学 院 实验 医学 研究 所 生物 化 学 柔 ,北京 )
本 研究 探 用 超 亏 波 乱 蛋 白质 放 性 的 人 条件， 车 察 径 超 钥 波 卡 理 后 牛 血清 清 蛋白 的 某 些
理化 性 质 及 抗 元 性 的 改 释 ,从 而 对 蛋白 质 粘 构 和 与 功能 关 傈 有 进一步 的 了 解 。
和 牛 血 清 清 蛋白 是 探 用 Nitshman 等 简化 的 Cohn 10 法 提取 ,再 用 正 两 醇 提 和 纯 沁 , 提
纯 之 清 蛋 白 在 Antweiler 微量 电泳 仪 及 狐 上 电泳 法 狂 定 呈现 一 个 罕 。 取 1 多 左右 的 清 蛋
白水 溶液 ,时 蕉 平底 玻璃 管 中 , 用 捷克 Kovo 250 W 超声 波 发 生 器 处 理 ,输入 功 棕 100 W
《电压 1000V ,电流 100 mA) , SP HA 2’, 4’, 6’, 8’, 10’ 处理 ,处理 时 之 温度 杀 持 在 25 "一
29°C,
我 们 研究 了 超声 波 卡 理 和 后 对 下 烈性 质 的 影响 : RADE EGR, HEHE IEF oe ae
Antweiler 微量 电泳 仅 测 定 。 比 旋光 度 用 Franz Schmidt & Haensch 型 旋光 仅 测 定 。
分 子 量 探 用 Nash 和 . Thompson 厂 电 子 滩 透 压 计 测 定 。 化 学 基 团 中 的 歼 基 应 用 玉 ol-
thoff 电泳 洱 定 法 测定 ”, AAAI A ORE, RABE. 抗 元 性 测定
Pia Be RK. RE SME.
超声 波 处 理 后 ,特性 粘度 [7] FAT EY, BEBE LA EB a IE ，
”有 些 兢 散 ， 但 兢 散 的 程度 普 没 有 影响 分 子 的 对 称 性 ， 因 篇 牛 血清 清 蛋 白 处 理 前 后 的 渤 原
MESA MRA EEA. 扩散 傈 数 稍 有 降低 ,分子量 自 原来 69000 增高 到
76000—77000 ,但 在 不 同时 间 的 处 理 过 程 中 ,分 子 没有 随时 间 之 延长 而 有 解 京 或 聚合 的 现
| ， 和 象 。 不同 p EE TP ETE AE, TE pH 4 一 10 之 间 些 在 -60 一 -62 pH=3 以上，
(PH=10 以 下 左旋 旋光 度 有 题 著 上 有 异 ) 说 明 螺 旋 构 型 没有 释 化 。 殖 基 是 随时 间 的 加 长 而
EW T Me. HE RAMESH BD. (VIE 2 分 饼 时 已 接近 改 委 的 最 高 点 ，
答 米 延长 处理 时 间 , 作 用 不 其 题 著 。 紫 外 吸收 光 谐 最 高 吸收 案 没 有 改 释 。
”超声 处 理 和 后, 抗 元 涌 定 未 见 降低 , 仍 是 1:5000, 玉 脂 扩散 图 上 呈现 一 条 沉 泪 线 , 不 同
a AGA, HOBIE, RGIS 粘度 是 用 ubbeléhde HEHE”, MAR
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eg Fi he PY DR ELIE PT ER RB Ke LI EAE
MUTT a BS VIR — ER HHS — eA ES RR Do EU AD
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CH ESS SB ER RO I OT eM CER, ACHE)
1956 年 Nickerson S356} HEH &A WME, TSAI
分 裂 有 关 。 Wh Hatch™ sR Pw BARE, TSR Ae TY Mo
Ko (UAL DLP EERE. AERA BARRY BI Be ee He Ba
PS. VAM AE) BU AE Sa OE, ESS. ST
Why APH) AE BR AE SY REAR, PEST T CHE oe AP.
Bi Sy EA 8 一 20 毫克 , TPN 0.044 wmole, G-6-P 3 umole, G-6-P
ARs 1.2 毫克 , 酶 蛋白 1.5—7.5 微克 ，Tris 26 Amole pH7.5, $488%5 400 微 升 。 反应
fe REA ASH Thunberg 试管 内 进行 。 於 30°C 保温 15 SHE MA 5 WE 5 N NaOH
以 停止 酶 反应 ， 取 出 25 一 50 微 升 测定 蛋 自 -SH KC, 酶 活性 以 反应 后 所 生成 之 微 当量 ，
SH E/KEWERARARLEREAB HE, RIM, 去 除 任何 一 种 物质 ， 都 不 表
现 有 酶 活性 ,或 酶 活性 很 低 。
底 物 蛋白 质 傈 自 成 年 大 鼠 肝 中 提取 ， 先 将 灌注 合 之 肝 用 0. 01. M BRR DHT 1. 0
BW KAA, 取 0.4—0.7 (NH4)。SO4 WANEMAAR Tris RAHM, 对 蒸 饮水 透析 至 不 含
(NH,)280, 坊 止 ， 痊 冻 乾 燥 和 后 即 得 蔬 县 的 乾 粉 。 样品 中 所 含 之 -8 也 及 -S=S= 基 ， 按
Kolthoff 和 Cartar 方法 测定 , 兴 批 样品 测 得 的 -SH/-S-S- 比例 狗 篇 2 一 3g。
酶 的 提纯 是 以 大 鼠 再 生 肝 篇 材 料 。 取 肝 部 分 切除 后 48 小 时 的 再 生 肚 , 先 从 渝 的 生理
嫩 水 灌注 ， 然 后 以 0.01 M Tris EwR (pH 7.5, 内 合 0.001 M EDTA) BROA, BED
和 后, 於 上 清 液 加 入 固体 (NH,).S04, 取 0.3 一 0.6 HAE TI, HME DEAE 纵 维 素 吸
附 ， 分 别 以 0.01M Tris Bae pH 7.5. 和 合 有 0.1M,02M 和 0.3M NaCl SRE
液 进 行 阶段 洗 腕 ,最 后 所 得 酶 制剂 之 活性 较 粗 提取 液 狗 提高 100 4%, EMH 32%.
部 分 提纯 酶 的 最 通 DH 狗 7.6， 酶 活性 在 最 通 DH 的 龄 性 方面 迅速 下 降 , 在 酸性 方面
BSB. 最 大 酶 活性 所 需 之 底 物 蛋 白 涌 度 狗 20 毫克 /400 微 升 反应 液 。 酶 反应 在 30
EMEA S RMR. 但 在 反应 时 间 乱 15 分 饼 的 条件 下 酶 省 度 与 活性 星 直
BTR
4 Be A — ites J ig 25 Ze. SAS Be. AAR, Cutt, Znt+ 所 抑制 。 除 大 鼠 肝
“蛋白 外 , 酶 关於 酵 母 乙醇 腕 氨 酶 制 和 己 糖 激酶 制 者 都 有 活性 ,但 对 於 牛 血清 清 蛋 自 无 活
PE, ESTE 50 度 处 理 5 MTR , ETE TITER 50%,
ARR CE Bye A ABER A -S-S- SE EEL BE i —
* SEMPLE: 天 津 市 血 研 所 技术 生生 学 校 。
- RB: 许 如 君 。
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Kvicn,
ee eG Nickerson Ww. J.; Faleone G: Science, 124, 318, 1956.
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材 料
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后 第 8 FANT. FUCHS IRL Ro es
a 法
(D MMAR EAR AAR: 子 实验 租 动 物 腹腔 注射 第 8 天
， 腹水 0.2 毫升 。 分 别 於 接种 后 第 3.6、9 天 切 头 厅 死 动物 (同时 伞 有 对 照 胡 动物 ) 。 此 时 ，
收集 血液 ,分 出 血清 以 备 做 蛋白 质 罗 上 电泳 用 。 立 即 从 条 死 动物 取出 腹水 、. 肝 、 脾 (以 上 操
作 均 在 渝 却 休 件 下 进行 ) 。 按 下 述 各 法 分 别 测定 了 腹水 癌 胃 胞 . 肝 、 脾 中 艳 蛋 白质 、 觅 氧 术
糖 核酸 (以 下 简称 DNA,) , BONAR (简称 RNA,) 等 售 量 。 用 纸 上 电 泳 方 法 测 出 了 血
清 蛋白 各 部 分 的 比值 站 测定 了 蜂 清 灰 蛋 白质 量 。
《2) 癌 硼 胞 核酸 晤 对 正常 小 白 饼 蛋白 质 .核酸 合 量 的 影响 。
区 氏 腹水 癌 硼 胞 核酸 区 制备: 取 接 种 后 第 8 天 的 腹水 癌 腹 水 。 骨 心 后 秦 去 上 清 液 。
向 沉 溅 倒 入 痊 生 理 独 水 , 洗 潍 瘤 硼 胞 。 向 洗 兆 的 癌 硒 胞 加 入 冰 痊 的 95 匈 乙醇 3 体积。 A
冰箱 中 放置 过 夜 。 吸 扯 去 乙醇 ,用 甲醇 - 氧 仿 ,乙醚 -乙醇 混合 液 除去 脂 类 。 此 和 后 将 乾燥 之
AMIDA PE. 按 每 克 乾 硼 胞 加 入 10 毫升 10% NaCl 比例 加 入 氧化 钠 溶液 在 冰箱 中 提取
过 夜 。 向 提取 液 中 加 入 95% CBE 3 HOA, PERF EDA ARENT. 将 此 沉没 再 溶解 在 少量
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BN si i ie fo tr ol Sari MN Nc
10% NaCl 中 , 然后 再 用 95% TTR. Sm SRE Re ACA 上 要
核酸 钠 二 次 后 , 放 冒 在 Ps0s 乾燥 器 中 乾燥 亚 制 成 粉末 。
由 上 法 制 成 的 癌 组 胞 核酸 钠 咯 是 白色 粉末 。 易 溶 於 水 和 生理 世 水 中 ， Se a
呈 队 性 ,对 Bial 氏 试 法 和 二 葵 胺 试 法 都 呈 阳 性 。 轻 80°C 乾燥 和 后 ， 移交 ef
12.00%; P=5.00-—5.95%; N:P=2.02—2.22,
TER Ab BB ER Hel HIATT] Eo BART MORE TT, wa. Sie
BIKANER TK SCHR, Bial 氏 试 法 ,二 葵 胺 试 法 千 果 同上 。 me 80°C 乾燥 和 后
& N=12.43—13.68% ; P=6.01—6.58%; N:P=2.06—2.08,
将 小 白鼠 分 成 三 组 : ESTE AL ESTE AS APL, 2S RL (只 注射
抗菌 素 , 因 篇 前 二 组 核酸 注射 液 中 都 命 有 抗菌 素 )。 仿 验 动 物 每 明 分 别 接受 腹腔 注射 癌 笨
” 胞 核酸 、 正 常 肝 核 酸 液 (每 毫升 含 200 y, A Beckman DU 分 光 光 度 计 测定 ) 0.6 毫
Ho MERE TI. 自 第 5 KLE . SERNA ee 4 只
-动物 进行 肛 `、 脾 中 蛋白 质 、DNA,: RNA, 含量 以 及 血清 蛋白 电泳 测定 。
REAM. Ae DNA, Fu RNA, 含量 测定 按 G. Schmidt and S. T. Thann-
_ hauser ig MUCE. MEA AR CK Slater 氏 法 稍 予 修改 。
ite 果
(1) 硒 瘤 生长 过 程 中 宿主 体内 蛋白 质 核酸 量 改 克 :
正常 小 白 矢 血清 中 每 100 ET-AAS 6.65 土 0.68 克 。 接种 后 , 自 第 3 天 起 还 渐 下
” 降 , 至 动物 涉 死 时 仅 有 正常 含量 的 60 儿 左右 。 白 蛋 白 正 常 含 量 入 5.18 土 0.89 52% , bale
IAMS HE BAM), BS 12 天 时 公有 1.884051 55%. 接种 后 第 三 天 oe
白 略 见 上 升 ,第 6 天 过 到 正常 含量 (0.86 士 0.05 5%) 的 二 倍 , 此 和 后 双 下 降 。 正常 的 B- 球
& As 0.29+ 0.03 克 儿 ,在 第 3 一 6 天 均 上 升 (0.84 一 1.45 2%) ,此 和 后 开始 下 降 至 很 低 。
7- 球 蛋白 正常 合 量 篇 0.33 士 0.04 52% ,在 接种 后 均 见 增加 , 如 接种 后 第 3 KA 0.57+ 0.08
«5% , 9H 6 KIS 0.55 + 0.02 35% , B59 KS 2.284019 H% 0 但 到 第 12 RES 9 天 入
低 , 仍 较 正 常 者 篇 高 (1.41 土 0.03 42%).
接种 腹 瘤 后 第 3 天 癌 硼 胞 中 含有 蛋白 质 50.06 土 2.66 毫克 多 (以 每 100 Ee See AN
at, PF ial), DNA, 篇 2.05 士 0.10 24%, RNA, &% 8.404114 毫克 儿 ,(DNA，RNA，
HOME). HK TEME A RE bs RIVERA. DNA,, RNA, Se
Wh, BRI (第 12 天 ) PR RNA, 较 第 3 KM, AR EVIL AEA DNA, 合 量 礁 比 第 9 天 者
GAT Fe, ABS 3 天 者 均 高。
接种 区 氏 腹水 癌 后 第 3 RB hp Ea A, DNA, RNA, asi te
加。 第 6 天 时 肝 蛋 白 较 正常 对 照 者 (45.624 4.88 Eve % /100 SCAT) 增加 了 狗
6%, DNA, 增加 了 狗 1.7 fi, RNA, HM THY 1.6 倍 。 第 12 FPL AL APA a
RNA, | DNA, 量 中 比 第 9 天 者 略 低 ,但 较 对 昭 租 题 著 增加 。
SEMI) BUNCE DNA, RNA, 的 改 杰 情况 和 肝 钥 绫 中 相似 。
(2) 腹腔 注射 艾 氏 腹 永 癌 亲 胞 核酸 曲 对 正常 小 白鼠 体内 蛋白 磋 、DNA,、RNA 售
量 的 影响 ;
小 白鼠 经 腹腔 注射 艾 氏 腹水 癌 粗 胞 核酸 厅 7 过 和 后 ,发 现 动物 肝 和 胞 活 跟 。 驳 核 和 胞
ot 20 ~~
“增多 , 核 大 小 不 一 。 在 检验 58 例 中 有 此 迹 化 者 有 38 OH, MAME TIS 。 SN LY
FEHR.
a EAL TH A AEG 7 一 10 过 注射 后 增加 到 7.80 一 8.62 He % ABE T TEE MEI
。 鼓 租 自 蛋白 量 改 情 况 同 灯 蛋 白 ,ac- 球 蛋白 在 癌 核 酸 注射 第 5 一 8 过 和 后 比 正 常 值 增加 了 狗
”到 狗 。 此 后 双 恢 复 正常 。Y- 球 蛋白 在 第 9, 10 遇 时 比 对 昭 租 二 加 了 倍 。 实 验 粗 肝 蛋 白
。” 量 自 第 7 RI, EGER RIAL
SRA DNA, 量 在 第 5 过 开始 增多 荡 逐 渐 上 升 《由 0.85 一 2.21 毫克 / 克 ) 比 对 照
。 租 高 05 至 4 He AERIS EMIT IF DNA, 量 的 1/2。 肝 RNA, 量 改 缀 较 小 , 上 升 速
Bei. WY DNA,, RNA, 量 自 第 7 遇 开 始 上 升 。
“ ， 对照 组 均 无 以 上 改 磷 。
&
主要 参考 文献
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磷酸 钙 柱 层 析 在 动物 组织 RNA 的
分 此 及 稳定 性 研 先 方面 的 应 用
SIME 林 沁 瑛 ARC BH
(PR BaE SE Aes SS ah Amite, 北京 )
Gierer 和 Schramm (1956) 及 Fraenkel-Conrat (1956) 首先 肯定 了 TMV-
RNA 有 致 病 活 性 以 来 , 大 分 子 RNA 的 分 离 及 其 性 质 的 研究 进入 了 一 个 新 的 阶段 。 在
若干 植物 病毒 和 多 种 动物 胶 炎 病毒 中 相 萎 一 再 症 明 了 RNA 是 决定 感染 性 的 物质 以 后 ，
DeCarvallo (1961) 、Niu (1961,1962) 及 Griffin :和 O’Neal (1962)° 报告 了 肝 RNA
有 抑制 腹 瘤 生长 的 作用 , 有 诱导 分 化 的 作用 ; Weisberger (1962) 以 镰刀 形 粗 胞 贫血 症
患者 的 红血球 RNA 与 不 成 熟 的 红 血 炎 胞 保温 后 ， 以 电 访 、 层 析 等 方法 分 析 发 现在 后 者
， 有 新 种 的 蛋白 质 合 成 。 近 二 年 Nirenberg 等 (1961, 1961—1962, 1962) 及 Ochoa 等
(1961a, 1962a, b, c) 所 进行 的 有 关 RNA 决定 蛋白 质 合 成 的 研究 ,第 一 次 在 分 子 水 平 上
取得 了 密码 传 珀 信息 学 说 的 直接 性 据 。 过 些 都 说 明 RNA 生物 学 性 质 的 研究 在 探讨 得 胞
分 化 及 恶性 释 机 制 中 估 有 极 篱 重要 的 地 位 。
RMS IE RM RNA 性 质 的 比较 研究 作 淮 备 ， 对 应 用 磷酸 钙 胶 柱 层 析
DMR RNA 方面 进行 了 一 系列 的 观察 。
、 磷酸 钙 柱 层 析 过 去 全 被 用 来 分 风 蛋 白质 ，Main 和 Cole (1957) 及 Vizoso 和
Burness (1960) 4 31/AZ HD DHRA DNA 及 高 聚合 RNA GAT ES, 满意 的
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5%, Burness 和 Vizoso (1961) W/) RUS DLR RNA 过 柱 , BRR
导致 活性 的 消失 。 但 Bernardi 等 (1962) HIRAM ARBRE RNA
从 部 向 低 一 级 降解 的 作用 ,因此 他 们 钢 坊 不 能 用 此 法 分 欢 核 酸 。
”我 们 按 Tiselius 等 (1956) 法 裂 备 磷酸 钙 粘 晶 。 FEE 8 一 10cm x 1cm (每 cm? 吸
«AYR RNA 量 乱 0.7 一 0.8 毫克 ) VME (Stepwise，0.005 一 0.2 M Bema
pH 6.8) 洗 胶 法 或 省 度 圳 夸 表 二 (Gradient, 0.8—0.005 M 或 “0.4 一 0.005 M 磷酸 组 种
WE, pH 6.8) 洗 脱 法 对 冷 酚 法 (ERM 80% , 0.005.M, pH 6.8 PARE 20%) BUR
ABM BUS, Rous SAMHMMS RNA 或 高 聚 (1.2 M NaCl 沉没 的 RNA 作 了
分 析 。 实 脸 在 室温 进行 (24 一 29*C) , 流速 每 小 时 12 毫升 ,每 管 收集 1 SA. MER RNA
HA E258 my 0. D. 值 表示 之 。 多 砍 重复 岗 察 层 析 人 条件 稳 定 , 回 收 量 在 90 一 95 多 到 右 。
-以 大 鼠 肝 高 聚 RNA 准 行 层 析 , 得 一 单 分 散 相 室 ,反覆 上 柱 没有 降解 现象 。 以 05NX
及 0.3N NaOH RY (25°C) 及 37?C 水 解 此 RNA 再 进行 分 析 划 得 到 部 分 及 至 部 降
解 的 层 析 图 谐 。 BS Cnpwa (1961) 条件, 将 此 RNA # 60°C PAIR 15 FH, FE OC
Bee MATT, RNA 分 子 的 洗 股 性质 没 有 改 克 ,和 原作 者 的 粘度 实验 相符 。 Set
此 RNA #8 90—100°C 处 理 2 小 时 , 徐徐 冷却 , Fa ALE ARR
”” 象 ,但 无 明显 降解 :( 按 : 指 无 单 核 苷 酸 产 物 ) 。 这些 实 验 说 明 磷酸 钙 柱 层 析 可 以 粗略 地 作
篇 反 映 高 聚合 RNA 分 子 稳定 性 的 指标 。 Bh, WB TIEMA MAR °C 透析
(对 0.005 M BREEAM. DH 6.8), —14°C 灶 辣 保存 RNA 溶液 一 过 、 痊 并 乾燥 处理 一
RNA 柑 品 等 对 高 聚合 RNA 分 子 没有 题 著 影 响 ， 但 87°C SHAE RNA 分 子 部 分 解
iE 0
a ABR SS ET SEVERE MT MLR RNA (EFA AHRD 得 4 个 a
RRA (ALB, C.D), A SS NLBARRRAT, BRB <38 分 子 ;) CHM SRNA
(4S 左右 ) 相应 ，D #58 1.2 M NaCl (RAR (50—100 万 以 上 分 子 水 平 )，
ATE REE RNA 量 的 比例 。 值 得 注意 的 是 B 岩 的 卫 258 mp/E230mp RH
值 在 4 以 上 ,文献 中 未 见 有 类 似 的 报告 ,其 生物 学 性 质 有 待 进 一 步 分 析 。
WESTIE REE) BUS REE LAD BSR A RNA ,未 发 现 三 者 有
何 差别 , SUF RNA fer MAR, HN RNA 含量 较 少 ,过 种 差别 可 能 与
a Soe Et ee ae eas
ge Paes +3 —
“~~ v SS
SA Mth ABH ROR RNA 及 蛋白 质 代 谢 状 况 不 同 有 关 。
Rous 肉瘤 高 聚 RNA fest ABUT, 筷 脱 等 组 织 的 高 聚 部 分 洗 膀 人 条件 类 似 ， FT
BMA R RNA 分 子 的 共同 性 。 4
VANS LWA EME BUS RNA BRST BOE RNA 活性 的 影响，
所 得 车 时 熏 Vizoso Ail Burness (1960) 者 一 致 ， 即 仍 保有 活性 ， 但 较 未 过 柱 者 有 所 降
EB ATS LD; : <67 RNA/BUS; ATH LDao : 207 RNA/BUS)o
ft Li PT RS PSE A: 磷酸 钙 柱 层 析 可 以 : (1) RE A Ie
RNA 在 组 成 上 的 比较 研究 的 一 个 方法 ; (2) 用 来 粗略 地 反映 高 聚 RNA 分 子 的 稳定 性 ;
(3) 粗略 地 轿 察 和 狂 定 不 同人 条 件 降 解 RNA 的 作用 和 程度 (如 降解 Degradation sk AFRE
Dissoclation); 该 方法 的 缺点 是 在 层 析 过 程 中 不 能 将 其 他 高 分 子 如 DNA, 5c Be
RNA 完 公 分 开 , 而 且 RNA MAME,
一 02 一
ee ee ee a ee eS ee ee ee
eg a es ee ee eee
ROSEN ICT Be
Kno WOE TRIG ERIE
LEE DEER EPI SHOCK, A)
POE, AREAS, 因此 超声 波 的 冲击 对 RNA Crate RO
| 萎 是 值得 探讨 的 问题 。 本 研究 企图 通过 超声 波 对 RNA 的 作用 ,再 和 它 对 DNA 的 比较 ，
希望 能 对 RNA 的 车 构 有 所 了 解 。
本 文中 探 用 大 鼠 肝 核糖 核 肝 粒 RNA SHEL, He RNA PEMA”, RAM
RNA EASE RHE
RMA 样品 的 役 备 傈 探 用 改良 的 Kirby GE, URH 提取 RNA, 然后 用 1.2 M
NaCl (UR. Rint Cc) 258 mw 一 8160 (eA 0.1.M 的 NaCl 中 )。 超声 波 辐 射 是
用 捷克 Kovo 250 W 超声 波 发 生 器 。RNA YH 0.05 M pH 7.2 的 磷酸 组 种 液 中 , 放 在
”至 底 玻璃 管内 ,以 固定 的 辐射 条件 (输出 195 A) 进行 态 理 。 管 壁 厚 0.1 厘米 。
我 们 计 研 究 了 超声 波 卡 理 对 下 烈性 质 的 影响 : 粘度 , IRB, 紫外 吸收 光 谐 ,甲醛
” 料 合 , 碱 水 解 的 高 色 性 ,对 核糖 核酸 酶 的 敏感 性 ,沉降 行 篇 等 。 此 外 还 进行 了 超声 波 处 理
ah RNA 再 经 乙醇 沉 泪 处 理 , 粘度 能 否 恢复 的 试验 。 粘度 测定 傈 探 用 自用 Ubbelohde
式 粘度 计 。 扩散 傈 数 测 定 探 用 Antweiler 微量 电泳 仅 , 所 有 光 密 度 的 测定 都 应 用 Uni-
cam SP 500 分 光 光 度 计 。
经 过 超声 波 上 处理 ,RNA 的 膛 原 粘度 下 降 , 开 始 杰 化 迅速 ,至 25 分 甸 后 粘度 即 下 降 很
. 少 或 不 再 下 降 。 下 降 最 大 二 度 在 ,40 多 左右。 另外 也 看 到 RNA 友 25 HRB REE,
所 表现 的 还 原 粘度 对 洛 度 的 依 顿 性 消失 。RNA 经 超 声波 不 理 后 粘度 的 下 降 , 比 DNA #8
相同 朝 量 的 超声 波 处 理 后 的 粘度 下 降 篇 少 。
在 其 他 分 析 中 我 们 此 探 用 了 固定 超声 波 休 件 ,在 同一 输出 功率 处 理 25 BE
理 后 的 RNA 撤 散 傈 数 销 有 增 大 ,但 普 不 很 明显 。 半 核糖 核酸 酶 的 敏感 性 也 稍 有 增加 ,但
不 显著 。 测定 甲 醛 桔 合 反应 时 , 探 用 了 两 个 温度 ,25。 及 45*C, MERA TAIL. 猎
-超声波 处 理 后 ，RNA 的 此 外 吸收 光谱 未 见 改 释 ， 也 没有 高 色 效应 产生 。 应 用 龄 水 解
RNA 所 表现 的 高 色 性 与 正常 的 完全 一 致 。 应 用 乙醇 沉 泪 经 超声 波 处 理 的 RNA, eH
其 粘度 ,发 现 与 沉 泪 前 相 比 没 有 什 床 磷 化 ,小 没有 粘度 的 恢复 。
根据 以 上 实验 结果 , 径 超声 波 处 理 后 , ADT RNA Gey ESE SHEL JE HA BE BE, 过 一
点 和 DNA 很 相似 ， 只 是 程度 较 小 。 TARR HR RNA 的 柔 地 性 较 大 不 易 折 断 之 故 。
粘度 对 省 度 依 顿 性 的 消失 表示 轻 超 声波 处 理 后 ,分 子 的 不 对 称 性 明 题 下 降 , 说 明 RNA 的
RBERKARBE. 紫外 吸收 光谱 , 瞪 水 解 高 色 性 ， 人 Hi A A RA
化 , 题 示 氢 键 没 有 受到 明 题 的 影 兆 。 73
= 25 一
BRENNER LOW ARA RAPA REA. Laland 99 peas
RDS Bentewe (DNA) 作用 时 ,指出 超声 小 可 使 DNA Sei wei (0 eRe
氢 鳃 很 少 破 卉 。 由 克 核 糖 核酸 (RNA) 具有 和 DNA 不 同 的 灶 构 !-a., 如 单 链 组 成 , 具有
‘Eyl, to Se
ee Pa
See So ,
i ene wee! fg) sy
«hed
en ae ee ee
* J z
t : 他 le
# oom rhea —. ,
Seat Pa er”, Sey al. 4e~ 9S
应 用 醋酸 氧 铝 沉 泪 核 酸 的 方法 , 亚 未 发 现 经 超 击 波 和 后 有 很 小 分 子 的 核 苷 酸 生 成 。 由
扩散 傈 数 及 对 核糖 核酸 酶 敏感 性 中 有 改 磷 但 改 释 不 大 看 来 ，RNA 的 降解 可 能 只 在 很 小
的 程度 上 生成 较 大 的 降解 碎片 。 另 外 粘度 下 降 的 不 可 恢复 性 也 说 明 RNA FERS
RE AR AA EB, TL RAE ITH
4ST BE RNA MMU EBA 降解 ， RE |
FEET Ho
主要 参考 文 南 |
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核 ie
亚 觅 气 核 糖 核酸 顺 哈 和 喀 喧 衍生 物 直
分 光 光 度 测 定 法
a ee oe
CHRP SE be Fi Ge ere OT Mt EE, Iba)
4
测定 核酸 碱 基 租 成 对 核酸 的 研究 工作 有 重要 意义 。 直 接 测 定 核酸 组成 含量 的 工作 近
年 来 已 有 很 大 发 展 。 在 一 个 多 粗 分 体系 中 , 当 已 知 各 硼 分 的 吸收 光 谐 汪 是 它们 具有 芒 性
加 合 性 质 时 ,混合 体系 在 一 定 波长 的 炉 光 密度 值 将 等 於 体系 中 各 粗 分 光 密 度 值 之 和 。 本
六 根据 此 原理 薄利 用 了 核 碱 在 不 同 DH 人 条 件 下 发 生 遇 构 而 在 此 外 区 表现 出 不 同 的 吸收 性
里 的 特点 ,提出 了 自 水 解 液 中 直接 测定 觅 氧 核糖 核酸 核 碱 A, G, C, 工 的 简易 方法 。
样品 在 100°C 和 过 氧 酸 (11.5 一 12 N) 作用 工 小 时 ,水 解 液 加 水 稀释 至 2.0N 通气 酸
的 温度 , 旋 欢 , 取 上 清 液 两 等 分 ,分 别 加 入 同体 积 的 标准 酸 碱 溶液 ,以 笛 正 测定 溶 沪 相 当 炙 .
0.10N HCl (pH1) 和 0.10N NaOH (pH13)。 在 波长 249, 262.5, 271 和 290mz 测
定 p 也 1 溶液 的 吸收 值 , 在 258, 262, 282.5 A 290 mm 测定 pH 13 溶液 的 吸收 值 , 代 大
焉 烈 公 式 求解 出 样品 中 A, G, C, T 各 核 碱 的 微克 分 子 合 量 。
人 9
G=0.192 « ADois,-258,, ° V—0.8257
C=0.150 + ADor1,-262,, * V—0.466T
cad A=0.105 , AD 2¢2.5,-282.5;3 “了 一 0.317 了
时 和 和 IN Nhs Pe Det gl MRmCwe Ce kT a ai Nee ha cs ea
, aa prt ey
» AD 1st ee y SRE MIO OTR.
“由 不 同 核 碱 比例 组 成 的 混合 体系 的 实验 表明 , 当 A+ T/G +C 比值 篇 1.02,1.18,0.42
: 和 2.09 Fe AT ALG 奥 C AREER, SERVIC NCR ICRP, ES: A,
ies : si 98—99% ; G, 94—99%; C, 95—99% Fu T,; 97—106%. ay eee ray
Wl se ae ce |
AAA A, G, C, T DORE TE MURA BOE ER A AOR
BREE. WE PAS RET. HREM SD, ICR
(ARNE HTL: 2—8 小 时 内 究 成 。 但 车 楼 品 中 合 有 其 他 新 碱 基 PTE ATA ICA TE
在 降解 人 条件 方 面 应 用 本 法 则 必须 降解 成 自由 碱 基 。
P
SERRNPAS ABUT nRNA 代谢 的 影响
I. Co” SRN SARUIT nRNA 含量 的 影响
RE AE ER I BRR aR
(SS DURE ASAE CBOE SS, 西安 )
MARA SDA ih ARRAS EAS DNA 的 合成 受到 明显 抑制 ,而
—sORINA RAB(LAR As (ISZHERS RELL NUIT, 我 们 知道 RNA 蓄 非 均一 体 ，
TMI RNA (nRNA) 只 然 较 和 胞 质 中 RNA (CRNA) 篇 少 , 但 DRNA 代谢 未
PSR CRNA 篇 快 ,而 且 易 受 外 界 影响 。 最 近 Welling 也 指出 X 射 绕 对 早期 再 生 肝 能
引起 DRNA PH PS, 因此 可 以 推 想 射 三 除 影响 动物 组 秆 DNA 的 代谢 外 , BIE
nRNA 的 代谢 可 能 也 有 一 定 影响 。 乱 了 进一步 关 明 过 一 问题 ,我 们 岗 察 了 大 白鼠 在 接受
Co 外 照射 后 肝 中 DRNA 含量 和 代谢 速度 的 要 化 。
HRA &# iY
试验 动物 : ”雄性 大 白鼠 ,体重 200420 4, RRA OM, EARLE
对 照 两 组 ,每 组 动物 7 只 。
照射 休 件 : Co 一 砍 全 身 照 射 , 球 死 量 750y， Hl 4500 1/54 Gio 对 照 组 同时 进
行 假 照 射
PPR RE: | RIK Philpot % (AHWR BHA) me, BT RD
DRNA-P fe US APB, ASST A PRP HT SR Ss , MES Sy SE Fa SE ADE STR, FOR
MLR A SERENE, PRR LKR . SEAN 1000 g 10 FS REMI, FE
2240 g 10 4)-GH HE 分 层 ”" RPC AK, RA 0.25 M ERE ( CaCl, 0.0018 M)
VEAP A RHE RS 0.25 M BEBE (4 CaCl, 0.0018 M) 中 。 题 微 镭 下 观察
Fe EAN — BE 17% AE, REAR GG TH HE EAM Yee, PBA aA
Rane. Mika Be i Eat BIE
qe ”了 ?3 BAM: 48K Rees (200mM pH7.2 tris HC] SiR, 750 mM KCl. +1
i 50mM MgS0,, RR 1 ml, NaH Ps 0, 20 wc) 87°C 保温 ， BR 30, 60. Slit 4
“到 楼 , 按 ST 22 RNA, 用 玻璃 碟 液 体 铺 样 计数 。 oe
WE: 探 用 Youngburg 法 加 以 改进 ， Sc OR BOR 5
RNA 9m 仍 用 ST 法 。 ae car
eR elie 2
IRA —- ATOM ANOKA, 多 在 照射 后 第 8 天 开始 死 亡 ; maRneR
SS 8 RADON. WUE AT DRNA BHAA RS
| AGUMAEIE nRNA-P 含量 的 变化 Nes
xl0-/ 核
ra
1
2 1.550 0.610 Fe
3 2.730 0.705 df. 6 BENE:
4 1.040 0.440 2.447
5 1.024 0.486 ty onan y
6 0.631 0.598
7 0.956 0.572 相差 显著
| REBIRTH RRA RI DRNA 含量 较 对 照 组 有 题 著 降低 。
LES ORRMGHETT P48 7 BURR, ATG AURAL RRS A SEE I, Sa
”RNA-P 含量 的 减少 完全 一 致 ,不仅 如 此 , 即使 在 照射 后 36 小 时 ，nRNA-P Fate
HEBBAL, P? 的 捧 入 速度 已 有 显著 降低 ,过 也 说 明 Cos 外 照射 对 大 鼠 肝 nRNA 的 个 成
”有 明 题 的 抑制 。 AR
£BSS xm
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4
5 8 8 BG
(吉林 医科 大 学 44 CEOs)
(一 ) 血清 铀 氧化 酶 (Ceruloplasmin)
旬 瑞 瑜 ” 杨 同 书 朱 育 吉
本 文 对 1961 ere et es 66 例 克 山 病 住院 病人 ,分 成 四 组 :第
‘IHL: SAGA 25 Hs BI ML: 亚 急 型 21 例 ; By LIT A: AIO Hs AVIV ML: 可 疑 病
K11 Bi) (过 组 病人 经 追踪 观察 ,在 本 文 写成 后 , 均 已 确诊 篇 克 山 病 )。 BOSS VAL: 健康
对 照 组 : 当地 正常 成 人 16 名。 按照 再 ouchin AERA MMA HM
车 果 如 下 :
ARK =| BE (单位 ) ， 和 图 (单位 )
第 1 a - 67 2.14 0.48 一 5.43
第 II 粗 oe 2.88)». ,1.22 一 5.89
第 III 41 Dx: 2.55 1.57—3.44
SIV 粗 11 2.41 1.57—4.38
BV i: 2.02 1.22—2.52 (15 例 )
( 另 有 一 例 3.56)
忆 在 上 SSE PEE REE, 与 第 V 粗 对 比 , 除 第 III A a SER,
过 和 与 病 期 参 杂 SEERA ES , 测 值 分 获 有 密切 关 傈 。 如 果 在 测定 砍 数 较 多 的 第 I 粗 选择 每 个
病人 多 次 测定 中 的 最 高 值 , ET MAR HE 25 例 灵 测定 平均 值 篇 2.84 单位 , 与 第 V Hl
Wht, RAMA, 可 晃 血 清 中 鲍 氧 化 酶 测定 的 时 机 ， HARIRI BY cia Ay ee Be
的 意义 。
is 14 4s ——Ja Hohe: rs 19 PH EK BRE, EE I, I
7) 68 Bl Ze FER, Beas A ET aT, DO PE, DE) PE a, BEE He
a) AAC RSS II —JR A HER RTE: 在 第 2 J ABR TT, 2 3 2
始 上 升 ,第 5 HASZHRES VRMRETH, RED 9 一 10 病 日 可 恢复 正常 转 范 ,过 种
曲 毋 除 在 上 还 的 芳 计 千 果 外 ,在 具体 病人 也 被 屋 实 ,小 进 行 了 讨论 。
RA 还 对 血清 铀 氧化 酶 的 上 升 机 制 进行 了 讨论 。 虽然 县 前 对 血清 钢 氧 化 酶 的 生理
功用 迁 不 完全 清楚 (Rice E. W."™, Scheinbery I. H.™), {AA ACH SRRE BA Vallee
B. L.™, Sullivan J. 了 .oa S8¢¢ 2: LSEDE IGA FUGR REE wa: 因此 我 们 推 想 克
本 By REAP A > LEER EE
= = X 而
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a es
oe in (S. GOT)
ew Be AW
按 Frankel (1957), King™ 的 改良 方法 对 66 例 克 山 病人 CAE RSA
ABE (一 ) ] 的 8. GOT erm AEAT HEAT, stRERIOT
AXK 平均 值 〈 单 位 ) Ee 转 《单位 )
第 I a 60 | 286.4 64—~F40
第 II 4 “17 235.7 15—530 |
第 III 粗 9 156.9 68 一 287 、
ss IV 4 10 122.5 48—200
第 V 粗 16 52.5 15 一 82
ERR HIER RAR ICH He, RS TE, MB AR BES 8 =
AST, TL, TUL, TV 奥 第 V AUER aR, i
‘S.GOT 活力 最 高 的 ， 在 生存 病人 过 680 单位 ， 篇 正常 值 的 10 数 倍 , 在 死亡 病人 过
1140 单 位 ,篇 正常 值 的 20 倍 以 上 。 在 第 工 粗 至 部 都 观察 到 8. GOT -活力 升 高 的 精 果 。、，
S.GOT 活力 一 一 病 日 曲 绪 ; BRM EKBERZ, TRE AE Jie HH eS 22 sm, 亚
和 忽 型 病人 , 按 不 同 病 日 测 值 和 病 日 给 成 。
S.GOT 活力 病 日 曲 粮 : 其 性 质 ,从 发 病 并 妈 ，S. GOT GSM ET, 23H
SER. HIST BH, SS 5 一 6 I BER BSE ITE HS Mio | s
Mie — A LIBR, 从 18 BSI APA eh EI EB eR, AB
| YRS 2.2 病 日 。 此 时 各 病人 的 S.GOT 最 高 值 平均 值 篇 417.5 哩 位。 与 前 述 规律 完全
符合 ,只 是 曲 著 上 升 更 快 ,上 升 程度 更 高 。 此 外 在 具体 病人 ,和 这 一 规律 也 被 六 实 。
DER FD J BE CHK (Wrohlewski 卫 .四 ，Agress C. M.“°) 的
”8S.GOT FHRGCK BHA). HR AAICH ALA ME, PAIS LIAN S. GOT 活 ，
力 磷 动能 够 正确 的 反映 出 心肌 损伤 的 存在 及 其 程度 ， HN CS ES IEE A
定 的 指标 。
Ss 考 文 南
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‘ ig e 了
~
AN 人 as ied ae pues ead
r wae » ‘ fais ( a | 7
en) fn. i Me i He (S. Ald)
bil lage ACA
， 硬 用 TopapHuykun 方法 的 改良 法 中 探 sii 66 例 克 WA [材料 及 分 LZ BR Hi 要
es ] Sc tngpnaige a ABE) KR BOT + see
PKR 下 均值 (单位 ) #5 转 (单位 )
ye 第 I 粗 62 17.0 1.82—125.6 »
Bet os Te 1 12.6 1.32—58.5
Bi oe oe 10 sae 0.6—16.1 ，
第 IV 粗 at 19.8 11.1—38.2
第 V 粗 7 9.9 7.06-—13.1 > 5
| 这 些 病 人 8. Ald 活力 最 高 的 ， 在 生存 病人 过 58.5 单位 ， FEU IRAE 125.6 单位 ， 分
AS TERS ALES 5 一 10 数 倍 。 但 是 在 无 选择 抽 楼 测 值 舟 计 的 结果 , 与 第 V MLN, 只 III，
OV AER, 1, II 两 组 因 筷 测定 砍 数 多 ; 病 期 参 杂 , 测 值 分 散 而 没有 题 著 差 展 ，
如果 和 从 第 工 租 选 择 每 个 病人 多 次 测 值 中 的 最 高 值 MET CRT EEE, 其 25 IAM BS
31.9 单位 ,与 第 V 组 相 上 比较 ,就 有 显著 的 差 虹 。 因而 ,在 心肌 梗死 病人 ,未 能 确 媳 S. Ald
| 意义 的 文献 (White L. P., West M." 等 ) 如 能 注意 趋 样 时 机 , BACH S. Ald 活
DE, RARE
. S. Ald 3-98 H AWB [ 作 注 参照 摘要 (一 )] : 从 20 例 病人 的 测 值得 出 一 定型 式 +
hee. HER: S. Ald 活力 ,从 发 病 开 始 上 升 , 比 S.GOT 稍 绥 慢 ,第 3 HH EBA -
最 高 案 , 其 后 开始 下 降 ,到 第 8 一 9 JH SSIES 在 具 钵 病人 也 可 以 得 到 同样 规
律 。
以 上 千 果 ,与 Volk B. W. (41, Petersen V. P.™, JR Tl. E. © pyri ee py
VULCAN PAP, PAAR ES AHL, BURL S. Ald 37S RHE
AB EIS 90 A DLE GS HF
多
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eee
on
fi
4 ‘errr "Fh fy
(四 ) iin we Ge ME AT BS
张 行 海 ” 杨 同 书 ” 朱 育 惠
应 用 我 们 对 ;Philpot EB. J. 方法 的 改良 法 巴 (BK AK) 观察 23 SEAL A Mm 4
碳酸 酝 酶 (C. A.) YEA) ABH SRR ANT
第 I a
第 II wl
第 III 4
第 IV ML
a V al
ARK 平均 值 〈 单 位 ) i, cee) :
22 2.04 1.55—4.38
. 2.54 1.63—3.52
5 eae 3.53 一 6.77
1 3.55 ar
12 4.71 3.2—6.0 (11 例 )
(PAB 2.42)
FE SI AS SEES, C. A. TETAS RAKE, BARE 1.55
单位 , BIER MH 1/3 EA WIAA C. A. ALAS.
Lace
HCO OERT AER ,与 第 V 组 比较 ,第 I, 11, III MAAR, RC. A. 活力 恢复 较 慢 ，
BREA — EW Ro :
”这 些 粘 果 ,如 按 病 期 进行 分 析 AAA TBS) C. A. 活力 在 发 病征 不 久 ，
就 开始 下 降 ,其 后 延 奈 相当 长 的 上 时间。 有 的 病人 其 他 酶 活力 ,已 经 全 部 恢复 ;而 CA i
力 仍然 保持 在 一 定 低 值 。 过 是 0. A. 活力 与 其 他 酶 活力 赤 动 的 显著 不 同 之 点 。
C. A. 在 红 绷 胞 中 含量 篇 实 际 需 用 酶 量 的 数 十 倍 , 所 以 直到 有 目前 篱 止 的 文献 中 , 倚 未
RB) C.A. 活力 下 降 的 医学 报 半 ，Kpenc E，M. 全 报告 败血症 垂危 之 前 C.A. 活力
降低 , 但 如 以 C. A. 活力 / 秆 绷 胞 数 比值 计算 时 ， 蓄 不 减少 ,而 不 是 C.A. 活力 的 其 下 下
降 ) o AICI FER, WL C.A. 活力 / 血 秆 蛋白 量 。C. AL 活力 /条 站 胞 数 比 值 计算 时 ，
C.A. 活力 也 仍然 这 此 正常 水 平 ， 可 见 克 山 病 人 ， 委 性 发 作 时 “C. A. 活力 的 下 降 ， 礁 是
C.A. 活力 的 趴 正 降低 。 BMRA C.A. 活力 上 升 与 慢性 心肺 疾病 病人 的 C.AA. =
se Sues F. H. = Shepard T. H.™ 有 相似 之 处 。
ere oe WL IBY Ee PENS, Ae C. A. 活力 的 下 降 及 其 恢复 的 绥 慢 ， WEL
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= 考 xX 页
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(五 ) Sen aby Ma (Enzymogram )
| pitas 朱 育 惠 |
nis 本 文 根 据 66 例 克 山 病 大 的 S.GOT, S.GPT, S. Ald, MARR BRAS. Ui Att
。。 酶 ,血液 碳酸 丁 酶 ,血液 谷 胱 廿 肽 等 七 和 酶 的 活力 移动 , 找 出 了 克 山 病 人 血液 栈 讲 的 特 徽 ，
冰 对 其 实用 意义 ,进行 了 讨论 。
“上述 七 种 酶 ,在 克 山 病 急 性 发 作 时 ,可 以 看 到 三 种 类 型 的 爸 动 规律 :
(1) S.GOT, S.GPT, S. Ald 活力 上 升 ,与 莉 床 所 昂 的 程度 , 常 呈 平行 的 增长 关 傈 。
(2) 血清 铀 氧化 酶 , 血清 胆 栈 酯 酶 有 其 独特 的 磷 化 规律 ,已 如 前 述 , 尤 以 两 个 酶 的 活
力 一 一 病 日 曲 芒 , 恰 成 组 像 关 傈 ,值得 注意 。
(3) 血液 碳酸 酝 酶 活力 呈 高 度 抑制 状态 , 恢复 缓慢 ， FFE LM ACHE
血液 谷 胱 甘 肽 含量 在 具体 病人 ,有 下 降价 向 。
根据 血液 各 种 酶 活力 的 移动 的 特殊 规律 性 , 厄 动 时 期 不 同 ,在 克 山 病 的 病程 中 , 其 一
_ 般 规律 是 : 在 发 病 开 始 时 ，S. GOT 活力 最 先 上 升 ，8. GPT，8. Ald AZ. MSA
酶 有 轻 度 上 升 价 向 , 血清 铀 氧化 酶 有 下 降 的 趋势 。 随 着 病情 好 畦 ，S. GOT 活力 急剧 下
降 ，S. GPT，S. Ald 活力 也 相 徽 下 降 , 当 8S. GOT FHTRAERMMUM, MAA
化 酶 活力 已 开始 缓慢 上 升 。 血 清 胆 栈 酯 酶 活力 开始 下 降 。 在 S.GPT, S. Ald 等 酶 活力
正 降 接近 正常 范 围 时 ,血清 铀 氧化 酶 活力 也 越过 最 高 点 开始 下 降 , 血清 胆 栈 酯 酶 活力 也 越
= 5h SAIS Sa BH DL FY, HS LT SA ALR RL TE
但 在 还 延 病人 , SUED MAM OR, RIA, ABER S. GOT，
SGPT,，S. Ald 4, #287.
因此 ,我们 现 坊 利用 克 山 病 的 血液 酶 谐 分 析 ， SARI, IN TEE, 也 后 的 估计 ，
进行 综合 刊 定 ,具有 特殊 意义 。 过 熏 最 近 文献 报告 的 综合 刊 定价 向 是 一 致 的 (Hamalsky ~
M. W.™!, Hargreaves T.™, Topxecky B.™!, JIykancKknti®!) 。
参 2 x ff
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[4] Hamalsky M. W.: Circulation. 23 102 (1961).
pace
酸 钙 油 度 , 麻 香 草 酚 调度 试验 , 左 反 应 , 血 兹 灯 蛋 白 量 等 项 肝 腾 功能 ,但 没有 得 出 肯定 性 的
都 低 於 对 照例 ,但 肝 腊 组织 GOT, Ald 活力 没有 朋 题 差别 。 克 山 病 必 体 心 脐 租 答 GOT
Ai 活力 下 降 届 死亡 前 S. GOT，S. Ald 活力 上 逢 之 机 显现 了 间 相 天保 ， 轩 关子 角 和
ey ee eee ee
me A 1 7) OA) dk lt, Da ei ¥.u< >) 7 +, oT hr we 4 4 1 J mi OL le y — yO TS | en a 下 全
人 AE i J Z MUA sly ht yh t
1 a yy hy ’ 5 iy 88 | Masha
(天 ) Tee ，
pall | ATH | ,
根据 66 PATE IA si Pe EE A DU EAR, 病理 解剖 ， 肝 腑 功能 , 心 电 间 , 钥 弧 |
酶 学 等 检查 的 天 傈 ,对 克 山 病人 血液 酶 伙 动 的 机 制 ,进行 如 下 探讨 : a
ic Lc FLAT LAR AAC, SESE A a
有 相应 的 波动 。 AIRARRATE TM TEP RCM, SGOT 活 ，
HLFBRHBATFERR. 过 组 病人 中 ， 在 死亡 病人 其 S.GOT 活力 相当 高 ， 但 是
S.GOT 活力 300 单位 以 上 的 病人 , 与 文献 报告 的 心肌 梗死 病人 相 此 较 , 死亡 率 很 低 , fi
得 注意 。
血液 酶 位 的 杰 动 与 病理 解剖 所 见 的 关 傈 : 5 Tarte 在 死亡 前 都 有 S. cor,
S. Ald 活力 的 明显 上升。S$. GOT 3B 304—1140 Hr, F 3 例 超 通 800 单位 ; S. Ald
$5 BEIAS 24.1—125.6 单位 ,有 3 例 超 过 70 单位 。 过 些 酶 活力 ov 8)
型 克 山 病 病理 硼 绪 学 所 见 ,呈现 明显 的 平行 并 傈 。 ，
FHSAA, SOUTER EMT ERIE, DL S. GOT,
S. Ald 活力 高 度 上 升 的 病人 篇 其 ,与 Killip T. See, AI
Mn eA OAS) ST RARE MDA: 在 S.GOT 活力 上 升 的 20 例 病 人 ， 检 查 了 硫
cite. 过 点 与 急性 克 山 病人 的 S.GOT/S.GPT 比值 >1 eR, 似乎 都 就 明 克 山 病人 4a
By AP aK hp BA
7 A BL EO AK: 对 9 例 S. GOT 活力 上 逢 (122 一 525 单位 ) 的 病
人 ， 同 时 检查 其 心志 圆 的 千 果 ， 有 7 了 HSA DED, 2 BARES DE, BS
DRL CMM RAR — Be. 可 见 S. GOT EYE) Ae, 是 特别 值得 重视 的 ，
(Tatyuimacknii™) , ae
ti 2 ag SE yg HE: 55 3 Bis LEER LPR CRA
APF BE 7 HL Fe OR ESE LER ( 左 心 , 右 心 ) MLB GOT, Ald 活力 ，
ARE LEK SVE LL I HE A HEAT TR
参 者 文 加
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[6] Agress C. M. et al; Ibid. 6 641 (1960°.
一 32 一
”， 抗 腹 瘤 药 对 核酸 代谢 的 影响
I， 和 - 甲 酰 溶 肉瘤 素 、 谷 氨 酰 溶 内 冲 素 对 动物 移植 性
胜 瘤 及 正常 组 线 中 核酸 的 含量 的 影响
ER FSR RS RIOT
(PRESS TT HER, AL)
N- 甲 酰 溶 肉瘤 素 (N-formyl-sarcolysine, f§# NW- 甲 ) 及 谷 氨 酰 溶 肉瘤 素 (N-ph-
thalylglutamyl-sarcolysine， 简 称 PGS) 不 仅 对 某 些 动物 移植 性 腓 瘤 有 明显 抑制 作用 ，
而 且 在 了 床 上 也 表现 了 肯定 的 治疗 效果 。 ST OSE A ET
物 移 植 性 硒 瘤 及 正常 组 织 中 核酸 含量 的 影 兆 。
实验 动物 篇 小 鼠 及 大 鼠 , 每 组 动物 5 一 10 只 。 移 植 性 用 瘤 包括 艾 氏 腹水 瘤 (腹水 型 及
实体 型 ) MAMIE Lo, 肉瘤 180 及 吉田 腹水 肉瘤 等 。 核酸 合 量 测定 方法 按 Schnei-
der 修正 Schmidt 及 Thannhauser EY, fal RE BAF} CIE BREET IE.
实验 粘 果 表 明 : 正常 小 鼠 每 日 口服 VY- 甲 (50 毫克 /公斤 ) HBS 日 , RNA RDNA
ARABS Raa: N- 甲 在 同样 剂量 下 对 胜 瘤 动物 Got oe, Mee
LS) CARH RNA, DNA 及 胜 瘤 粗 筱 (站 胞 ) 的 DNA 含量 均 有 明显 的 降低 作用 , 但 对
RNA 的 影响 却 不 明显 。
不 同 剂 量 的 PGS (30, 50, 200 毫克 /公斤 ) 每 日 一 砍 , 连 苇 4 一 12 天 , 对 肉瘤 180 及
ASAHI La DNA 含量 均 有 了 明 题 降低 作用 。
从 上 壕 实 验 千 果 看 来 ,在 治 癖 剂 量 下 此 二 克 均 能 降低 硬 瘤 组 织 中 DNA 的 含量 ,此 作
用 可 能 奥 抗 三 瘤 作 用 有 一 定 的 天 傈 。
Du Noe Fi BRS SEY Ay WE AN ead IN BG
IL. NHR ASK 3 EIEN BBA
LOL a Page ea ope
FDA | Eel ROBE
(HB SENT EER, At)
作者 前 已 伍 明 N- 甲 酰 溶 肉瘤 素 (N- 甲 ) ,及 谷 氨 酰 溶 肉瘤 素 (PGS) SB AE
瘤 及 正常 组 缀 核酸 ,特别 是 DNA 的 含量 有 上 明 题 降低 作用 。 篇 了 浊 一 步 研 究 N- 甲 及 PGS
对 核酸 生物 合成 的 影 史 ,又 秽 察 了 对 Ps? BE A I Be TE SLAP BE,
<a Oy
实 驮 粘 果 表 明 ,正常 大 鼠 仔 日 口服 X- 甲 80 毫克 /公斤 ,或 PGS 30 毫克 /公斤 连 戎 5
Rik, BHCRAAR P? BAM RNA 及 DNA 明 题 受到 抑制 。 RAM
水 型 及 网 绫 租 胞 肉瘤 Le 的 小 鼠 , 口 服 Y- 甲 80 毫克 /公斤 或 PGS 30 毫克 /公斤 连 苇 5 天 ，
2 AGHA PO BANE RNA 及 DNA 与 对 照 组 比较 均 显著 受到 抑制 。 人 接种 艾 氏 癌
AREY) . HNO AI Ls 及 吉田 腹水 肉瘤 后 不 同日 期 痊 动物 口服 N- 转 50,80
| 毫克 /公斤 , 或 PGS 80 毫克 /公斤 连续 2-7 IK, N-PR PGS 对 Pa BA LI MT
4 Skis RNA YSEHI TRIE. N- Way Po BD Ie CHE TO BAO Le 的
Bis DNA 无 抑制 作用 。 但 N- 甲 及 PGS 对 P? BAR WAH DNA 均 有 不 同 程度 的
-和 抑制 作用 。
Bari LER TE BUR T YSN (G10 毫克 /公斤 ) Wt Pa Ze ATE RL
B RE, DR SL N- R PGS 基本 相似 。
oe ARUEDLLSTIR, BED ASTEMLTLOY NIP J PGS 对 Po ATE HER RTA RUT
SBI FAL, Bee DNA 的 作用 篇 最 明显 。 上 述 粘 果 与 Y- 甲 及 PGS BAH
‘ie 降低 作用 基本 相符 。
SRE A RESP EAA
ii 健 BRR 关 力 WS 印 苏 可 SEAT
(河南 警 记 院 生 化 数 研 组 )
” ，。” 禁 食 或 贫 俄 上 时， 人体 的 代谢 和 与 正常 不 同 凸 ， 亦 有 报告 某 些 癌 厢 可 引起 尿 硫 分 配 的 改
SB, PE IAA EA I AA RE, BEER, 特别 是 蛋白 质 缺 乏
5] MRO, 可 能 在 血尿 成 分 上 有 所 反映 , 因而 分 析 了 60 PIED INRIA
的 血 波及 尿 液 的 若 于 成 分 , 范 和 与 有 关 正 常 值 作 了 半 照 , 坊 降 床 治 冶 及 汶 理 提供 参考 。
ie 床 材 料
河南 厦 瘤 医院 ,住院 的 食管 癌 病 人 ,血液 空腹 静 服 取 血 , 取 用 24 小 时 尿 楼 的 一 部 分 做 ，
实 脸 。
t RR at
由 表 1 AH aI A LB, DO 56 EAA EE EY ETE FS OS, 48
60 例 病 人 血清 中 全 有 酸性 磷酸 酶 活性 ， 最 低 限 也 是 4.03 Hifes Dow MEE EE AYR ECE TE
MRA Es BRS SE EE 4.77 BS TE a BY SMR 5 TTT RSE FH HL
已 知 前 列 腺 癌 引 起 酸性 磷酸 酶 活性 升 高 TI BIR TER CPS | eS A AK, GE
本 妇 测 定 炳 果 酶 活性 改 释 的 趋势 看 来 , 似 与 食管 瘤 是 有 关 的 。
一 86 ivr if
有
/
. 2
#1 ih
ii 定 fa 方 法
， 瞪 性 碍 酸 酶 | 血清 King-Armstrong 拱 法 器
REE DRNRAG 血清 cpollinn King-Armstrong KR}
ef | 一 | 一 一
68.7 一 260.0
(159.0)
wR 酶 | 血清 ~W. T. Caraway 5635")
Ee. | Se
8.39—5.60
i KM +46)
meres | 全 血 | Oe ay nOs WE
还 原 8 | Sm er i. Shaffer-Hartman-Somogyi 滴定 法 中
* 正常 值 见 所 载 方法 的 文 坪 ,未 另行 测定 。
BET 尿 ， 液 ，( 克 /24 小 时 )
尿 成 分 正 篇 值 * % 法
8.19—10.4 Folin-Farmer s}¢f
(9.30) 法 蔬
外 一 一 一 一 一
氨 六 Folin-Bell KBR
; Henriques-S¢rensen
N
conga 甲醛 滴定 法 四
; Benedict-Franke 5
尿 酸 30
肌 at Folin 34)
aw ied | | oom
(ss%mih) | 0.041 ee ae
8 Fi E 0.635 Fiske sve) Rose-
(ES HE) . heinand-Drummond
BS TE it 0.075 . 10° t =e
$e 0.453
中 性 硫 0.106
N:S 4.5:1
74.3% ‘ :
黑 尿 酸 病 人 病人 有 此 酸 em nr +
+ 共 测 定 60 例 。
* 共 测 定 12 例 。
从 表 II FY LIE MABE N 量 篇 9.30 克 , 其 氨 -N $5 7.64% , BIL-N 篇 2.8 允 ,尿酸 -N.
$5 2.7% ,WLBT-N 235 5.4% 3 但 食管 癌 病 人 尿 炉 氮 乱 4.73 克 , 其 中 氨氮 篇 5.07 钨 , 钴 论 测定
BHR (hk N 的 百分数 均 降 低 ,氨基 氨 佑 粮 N 的 百分数 则 升 高 , IE 74.3% AR
中 有 尿 黑 酸 ,与 人 aplanskyt 全 报告 蛋白 质 缺 乏 所 引起 某 些 氨基 酸 代 谢 ( 股 氨 基 作 用 及
转 氨 基 作用 ) 的 案 钢 有 相似 之 处 。 就 从 尿 硫 测定 辕 果 看 ,虽然 患者 尿 中 粮 硫 量 降 低 ,其 本
2
inet ee
7 a, *
Be ee
a
~
Se
pares yt
==
sere
Se
a
>,
ee
研 硫 及 中 性 硫 估 硫 量 的 百分数 却 有 增加 ， 氨 与 硫 的 比率 降低 (患者 4.5, 正常 90)， 与
Papadopoulou™ 全 报告 的 肺癌 胃癌 及 喉 癌 患者 尿 氮 与 尿 硫 磷 化 结果 一 致 ， 可 能 是 条 胞 ，
内 合 硫 氨基 酸 和 与 其 他 含 SH 基 化 合 物 氧 化 率 有 改 释 之 故 。 同 时 88 儿 病人 出 现 肌 酸 尿 , 也
是 氮 代 谢 案 亿 的 表现 。 从 以 上 事实 看 来 食管 癌 病 人 胜 瘤 组 织 本 身 以 及 进食 困 闪 ,缺乏 蛋
AREA RARELY, BS Re EU
抵抗 力 。
Hl he RR DAR
根据 H. A: Konosazona 0 报告 方法 : 用 -定量 的 血清 ，
逮 原 一 定量 甲 烯 蓝 的 时 间 篇 指标 测定 压 果 。
例 数 阳 性 & 阳 thE 率 (%)
食管 瘤 病 人 60 48 80
= SAA 16 15 : 93
FER A 60 0 0
克 汀 渍 人 7 7 100
Ze III BEA aS (ARE. BSE. TIAA) 血清 还 原 力 与 正常 人 及 非 腹 瘤 病 人 不
同 , 篱 了 解 过 一 释 化 的 本 质 亦 作 了 些 探讨 ,用 共生 素 丙 及 条 蛋清 在 同样 条 件 下 固 可 还 原 甲
烯 蓝 使 之 退色 , 所 需 时 间 长 ; 但 一 毫升 血清 中 共生 素 丙 含量 不 足 10 HE AE A ERE
AOA Bb > AIFS REWER AR. MER” MVM BR em, hs SH 基 比 正
BMRSS, MIRIAM SH 基 减 少 ， 因 而 推测 引起 退色 的 原因 可 能 是 血清 中 具有
SH 基 的 化 合 物 , 如 蛋白 质 分 子 中 含有 SH 基 ,血清 中 迁 原 力 的 大 小 与 血清 中 蛋白 质 分 子
PSH 基 的 多 少 和 蛋白 质 含量 有 关 叫 , 至 克 汀 病人 何以 血清 膛 原 力 亦 比 正常 人 低 , 因 蚀
乏 小 孩 血 清 还 原 力 的 材料 倚 不 能 作 何 推测 。
CASBC HRM A BA AR Be ETE BTL NG ta EB BEEBE Ae A 8
Pils LE, — EBB) 0 |
= 考 x &
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a, 88 a
SS Se
ee eee
SCRE RIVER REVI ALE PUD LEED
YG LURE SRR Be i A ET Sa
RRR Pe HE
SERRE Blin REME
/ (Fae PPS Get)
酶 促 转 氨 作 用 在 氨基 酸 的 中 间 代 谢 及 生物 合成 蛋白 质 等 方面 起 着 重要 作用 。 此 外 ，
谷 氨 酰 胺 及 天 门 冬 酰 胺 在 运输 和 储藏 氨 以 及 合成 氨基 酸 等 方面 之 作用 亦 颇 需 是 要。
蔓 的 氨基 酸 代谢 研究 之 一 个 重要 方面 是 紧密 和 和 攻 条 蛋白 质 的 合成 相 联 系 。 桑 华 中 蛋
白质 和 游 砍 氨基 酸 和 区 秋 蛋白 质 之 差别 其 篱 显著 。Fukuda 等 发 现 甘 氨 酸 及 糙 氨 酸 等 可
直接 形成 千秋 蛋白 质 。 由 闪 琶 条 蛋白 质 之 主要 成 分 篇 甘氨酸 、 丙 氨 酸 及 赫 氨 酸 ; 因此 , 丙
人 氮 酸 之 形成 机 制 值得 深入 研究 。 Koide 及 作者 全 对 家 八 一 些 重要 转氨酶 进行 测定 ,发 现
五 龄 四 日 左右 村 腺 体 中 活力 最 高 ,而 此 时 期 贤 条 蛋白 质 之 形成 也 最 篇 旺 麻 ,过 襄 明 转 氨 作
用 和 移 秋 蛋白质 形 成 之 紧密 天 傈 。 KARR A SAS RARE o- MIKO
SVE, TEAR ZIG SH. FERPA EEE ZAR RSS ,都 具有 活力 强 的
Dis Lr eet ele eee
BREA RAKASRRE. FABER BET TEM. HERE A}
1. 家 笃 和 野 贤 各 种 不 同 氨基 酸 和 o- AK PR CREA: AREER A SPEER GS ED
和 脂肪 体 各 种 氨基 酸 和 o- 酮 成 二 酸 之 间 的 转 氨 作 用 烈 艾 表 1。
FA 1 Fh, REAR R ARGS AH RAB ARARMAM. Ast, i
He PS ARR il, FLSA ASAE (CHS HAS A oH BE A A
氨 酶 作用 于 之 加 氨 作 用 等 ) 形成 谷 氨 酸 ,条 而 在 谷 两 转 氨 酶 之 作用 下 ,形成 两 氨 酸 。Flor-
kin 等 利用 C: 和 丙酮 酸 ,. 惑 明 可 以 合成 CHARM. 此 外 , 桑 革 中 合 大 量 的 谷 氨 酸 和 天
门 冬 氨 酸 ,它们 在 谷 两 及 谷 天 转氨酶 之 作用 下 , 力 是 合成 两 氨 酸 的 重要 来 源 。
SMAI o-M ROR CRATE, ERM CIRO, BRR BMS
的 是 支 链 氨基 酸 。 ROT FN ES RS a A AE I , ARE RRSP BRE ( 表
1). AR HRATRAZERR MRE ACA RRR ZARA
代谢 的 酶 系 竹 上 。 丙 氨 酸 天门 冬 氨 酸 及 支 链 氨 基 酸 之 转 氨 作 用 有 可 能 通过 间接 的 途径 ，
BUSCH o-AZEE AA RETA o- 酮 友 二 酸 和 进行 加 氨 作 用 而 成 。 作者 用 提取 的 酶 制剂 , 冲
实 了 不 存在 以 上 腕 氨 及 加 氨 作 用 ,以 上 反应 是 酶 促 转 氨 作 用 。
SRR AXBALR- CARMA, HEP MARR, 可 能 估 有
BBL PE A AAR eA ES nL RR AS, SS ASC BE AER APS PRE FT AS OE Fs BE
SAR Ea PR ese BE ATER AE FE D7 BE) , TE HE RRS ZS AI BER. A AER
麻 紧 条 腺 体 中 ,可 能 存在 支 链 急 基 酸 - 丙 氨 酸 转 氨 酶 ,但 也 不 排斥 另 一 可 能 , 即 支 链 氨 基 酸
<6-RAGHFRERRA RR, MEA x- 酮 成 二 酸 之 存在 及 在 谷 丙 和 支 链 氨 基 酸 转氨酶
iis
fA
“之 作用 下 ,间接 形成 丙 氨 酸 。 由 此 ， 5 ERC eR AS EAL PAR
ZHAN.
Rl KRACK 4AM o- dr RZ SHER PEP Zee
2 野 0
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1K RM MR eR HS ARR (umole)
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局
= 了
”以 上 所 形成 之 谷 气 酸 量 已 减 去 空白 管 ( 酶 溶液 十 ac- 酮 友 二 酸 ) 所 形成 之 谷 扼 酸 量 。
** 3 104M EDTA fF BARRA EI, ;
Rae 2 Bh i FieAARR: 0.15 M KCl (1:6) 9 MRS LI
JHE EH ——2298 FAR 0.8 S65}, ABTA 0.4 毫升 , ac- 酮 皮 二 酸 及 气 基 酸 各 起 0.2 豪 升 (SE ah dita
4 DL-G ERIN 28unmole, GME c- 柄 成 二 酸 均 洲 从 0.05 M wether , 最
#8 pH 7.4, 37 度 , 保 温 革 小 时 。
。 家昌 和 村 时 前 肪 甬 中 ， 主要 存在 谷 两 和 谷 天 转氨酶 ， 其 他 转 氨 作 用 之 活力 区 胶 低 。
与 Koide ZRH RABRERA BMRB, 都 存在 谷 天 转氨酶 ，
而 杆 竹 体液 向 具有 谷 两 转氨酶 。 同 时 ,比较 了 五 龄 草 麻 和 览 不 同日 子 谷 两 及 谷 天 转氨酶 ( 体
溢 ) 及 支 链 氨 基 酸 - 谷 氨 酸 转 氨 酶 (RE) 之 活力 。 随 着 五 舱 日 子 增 长 ,过 些 酶 的 活力 是
落下 降 , 另外 游 欢 氨 基 酸 之 含量 也 平行 下 降 , 由 此 可 见 , 过 些 酶 系 业 的 活力 是 和 和 雹 赫 蛋 白
质 的 形成 相 平行 的 。
一 秋 腺 体 是 否 存 在 两 天 转氨酶 的 问题 尚未 解决 。 我 们 利用 DL-ARM(10-“M),
”” 谷 丙 转氨酶 抑制 99% ,而 谷 天 转氨酶 抑制 甚 小 。 同时 , 天 门 冬 氨 酸 和 丙酮 酸 之 转 所 作用
吕 EBT STU OR AISE A SCS RL A RAD Z FPS PS
是 谷 两 及 谷 天 转氨酶 联合 作用 之 车 果 。
2. 家 父 和 野 八 谷 氨 酰 胺 酶 及 天 门 冬 酰 腕 酶 : SRE ch Ay FHL EIR BK PUREE,
过 些 酰 胺 一 方面 可 通过 转氨酶 之 作用 ,形成 各 种 氨基 酸 , 同 时 , 双 可 在 酰胺 酶 作用 下 ,形成
其 相应 的 二 羧 酸 而 参加 以 上 所 述 之 代谢 。 在 家 的 和 野 移 杰 腺 体 等 组 徐 中 , 较 普 逼 地 存在
以 上 两 酰胺 酶 ,其 中 以 划 麻 移 穆 腺 体 之 天 门 冬 酰 氨 酶 的 活力 篇 最 强 。
SF Be Wich RR ASHE He Sk So A J PRBRE EAN SHIRE:
A
(一 ) 支 链 氨 基 酸 - 谷 氨 酸 转氨酶 之 提取 ， 取 狗 30 FTA KF RRB
| 清 液 对 水 透析 过 夜 。 加 入 固体 硫酸 针 , 取 他 和 度 篇 0.35—0.65 ZI YATRA ，
国 酶 反应 条件:， 粮 体 积 篇 2 EF, A 0.5 毫升 aH — Me (20 w mole), 0.5 毫升 DL-
«REA (60 w mole), WYK PH 7.4 0.05 M ZR MM, 工 毫 升 酶 溶液 。 37 度 ，
| 保温 工 小 时 。 用 低层 析 定 量 测定 酶 作用 形成 之 谷 氨 酸 量 。 a
| (ZS) 天 四 冬 酰胺 酶 之 提取 HU 20 RRS A 4 1% 0.15 M pH8.0
BABAR, ARERR TARR EDs 1 (5,000 转 / 分 , 4 BE), LIBS SE
胺 酶 。 将 沉 波 溶 大 0.02 M pH 8.0 确 酸 钠 维 街 液 中 , FEDERY Sy MERE op BY RAE, BEA
RE. FTE LR, ROM, Te OTE RR, AED
RASCAL. EER SRL REAR A RAK
HS .. |
RTH: ， 同 Meister, ERA Speck HR, WACK
} 酸 量 。 rs ;
. 4. 曹 麻 老 条 腺 体 支 链 氨 基 酸 - 谷 氨 酸 转氨酶 及 天 门 冬 酰胺 酶 之 性 质 :
(一 ) 底 愧 省 度 和 反应 速度 之 天 傈 ”在 提取 之 转氨酶 作用 下 , 体积 篇 2 毫升 ; 其 中 酶
a )
SNE 1 AEFt, DAR DL- REAM (0.5 毫升 ) (EB o- BAA, oA ROMY (0.5
so Ft) 20w mole (反应 条 件 同 上 ) 。 RA, SAME RE DL-REABE Ee
上 升 ， 至 DL-RE RB 60 w mole Miko 取 DZ- 爱 亮 氨 酸 60 w mole (0.5 毫升 ), 而
， 改 绍 w- 酮 成 二 酸 之 滤 度 ; 在 20 mole 以 下 时 , 反应 速度 随 省 度 增加 而 上 升 , AAR 20
wmole， 反 应 速度 反而 下 降 。 在 提取 之 天 门 冬 酰胺 酶 作用 下 ， 天 门 冬 酰 胺 在 40w mole
。 以 下 时 ,反应 速度 随 底 愧 省 度 增加 而 上 升 。
(=) 酶 促 反 应 和 时 间 的 天 傈 DL-RARA ax- 酮 成 二 酸 之 转 氨 作 用 及 酰胺 解 作用 ，
| 在 相应 的 酶 催化 下 ,在 工 小 时 内 ,产物 形成 之 速度 ,基本 上 是 直线 关 傈 。
(=) 对 热 的 稳定 性 “该 两 酶 对 熟 均 不 稳定 ,以 不 同 温度 和 酶 溶液 作用 10 ER
及 反应 人 条件 培养 , 支 链 氨基 酸 - 谷 氨 酸 转 氨 酶 及 天 门 冬 酰胺 酶 分 别 在 50 度 和 60 REF, K
活 80 儿 左右 。
党 (四 ) pH Hees ARE KASH PHS OTR FSR. Hui pH
a
» 8
. litt, PH 篇 8 时 ,活力 最 高 。
CR) 各 种 抑制 剂 的 作用 ” 副 基 抑制 剂 对 支 链 氨基 酸 转氨酶 具有 显著 的 抑制 作用 ; 桨
AAA Be (10-4 M) 抑制 60%, 10-°M 及 10-* M 之 省 乙酰 胺 分 别 抑制 67% BK 37%_
DLE (LO M) 抑制 307% 0 抑制 禾 对 天 门 冬 酰胺 酶 活力 影响 不 大 ; BARA
酸 (10-* M) 抑制 20 多 ,省 乙酰 胺 (10-* M) HEHE 15%. DL-RARAM UK SZ
糙 构 相似 ,但 10-* M PERKS 15% ]
* * *
BABE. ea AS SREP AD A PS AI AB TE
— 41 —
- A4 4% 0.15 u 氧化 钾 溶 液 , FAROESE i IIE. BeTy (4,000 转 / 分 ,4 度 ) 30 FH Ek
ie TE GE SELL ke
HE ig 4-4 5 09 BH GR
“EIU =| RAR ES
(中 国 科学 院 生物 物理 研究 所 ,北京 )
有 了 关 过 氧化 氢 在 辐射 损伤 过 程 的 作用 问题 ,以 往 , 有 人 便 加 入 相当 长 辐射 产生 的 过 氧
化 氨 量 ,与 照射 引起 的 损伤 比较 。 或 者 在 照射 时 加 入 过 氧化 氢 酶 ,观察 对 从 楼 体 的 影 兆 。
也 有 人 上 比较 了 不 同 机 体 过 氧化 氧 酶 含量 与 辐射 敏感 度 的 关 傈 。 然 而 外 加 入 的 明 氧 化 氢 是
一 灵 加 入 的 ,而 辐射 产生 的 过 氧化 氨 是 铬 纺 产 生 的 ,对 帮 机 体 的 损伤 作用 也 就 不 会 完全 相
同 。 同 时 ， BASES AAA SE SES CER PA TCR PS ST 而 加 入 的 过 氧化 氨
酶 能 否 泛 过 条 胞 膜 进 入 壮 胞 内 ,也 是 疑问 。
我 们 利用 酵母 菌 有 饼 通 应 前 后 ,由 共通 应 酶 的 产生 , Se I, SE
“对 於 有 氧 适 认 比较 敏感 的 和 比较 不 敏感 的 同属 二 个 菌株 ， 分 别 比较 它们 对 志 陛 辐射 敏感
KR HET MBS REAM, 以 及 观察 了 抑制 过 氧 化 氢 酶 , BR
射 损伤 的 影响 ,来 探求 过 氧化 氨 与 辐射 损伤 过 程 的 作用 关 傈 。
“在 本 工作 中 ,从 微生物 研究 所 保藏 的 18 株 酵 母 菌 中 , ESE HIDE REE Saccharomyces —
cerevisiae 同一 属 的 2.23 菌 及 2.559 菌 ，2.23 BEE AEE Be A
PEK, Qo, 比值 坊 3.5 一 4.9; 另 一 株 2.559 菌 在 有 氧 通 应 前 后 的 过 氧化 氢 酶 活力 构 化 较 小 ，
Qo. 比 值 篇 1.5 一 1.8。 分 别 接受 相同 条 件 剂量 的 X 射线 照射 后 ,; 2.23 菌 有 所 适应 前 和 后 的
存活 率 比 值 需 1.0 一 2.1, 2.559 ASSIS 1.1 一 1.8。 每 区 照射 均 附 有 Frick 化 学
PTL, (ESI TRE. BLA Co” y 射线 照射 2.23 菌 ,存活 牵 的 比值 伍 X 射线 照射
车 果 相 一 致 。 在 我 们 实验 粘 果 中 ,不 论 是 2.23 菌 或 者 是 2.559 菌 ,在 有 氧 通 应 后 的 过 氧化
AME MARE MA ESET. HARMAN EEE EBA. PRISE
AT ASME AAD 2.23 PASE He 2.559 PAL GBA, EEE ES,
ROARS ASMA BEN , TE ARE EA HE Ro
AFIS LAS SUM ATH 2.23 苗 及 2.559 菌 过 氧化 氨 栈 80—
908 KE GET A AE A LR CPE, BE
At 2B
根据 以 上 烙 果 , AR UEEAR I — ZEEE, BA ae A FE, aa
能 直接 影响 辐射 损伤 程度 。
—42—
和
对 刺 足 三 里 对 尿 中 17- 关 皮 贤 类
固 醇 合 量 的 影响
SB MOE OE
CBRN ES Be eC HAL )
| TAS R= ERAS SBIR. WARS RS Pee ke
皮质 的 作用 ,加 强 楼 体 的 防御 机 能 。
BRA ER
Fae Se Lee ae Oe ee ee Sa a
ORCA. RAMESH AS TR , Thin ta JER) 15—20°C, APiRLHRML, AL SRE L, B—
MSHA FLA AL ATE SR, SE 20 GH, EH Shh, MBL 6 一 8 日 ,最 后 二 日
fH HR SRSEs ( 狗 5"C 左右 ) 2—4 小 时 。 每 日 或 隔日 测定 尿 中 17 $e TARY
进行 比较 。
取 穴 方法 :在 猫 的 十 个 后 腿 上 取 人 体 足 三 里 相应 的 位 置 。( 人 体 足 三 里 位 置 狗 在 中
ATES MATT). | |
尿 中 17-9 He OLLIE AU: Porter-Silber He, (MARRBE: 医学 检验 ,1960)
Rm t ®
Fe 1 KAMAE PU AST RIAL PF 17- FE Re A
ASH (mg /24 小 时 ) 与 针 刺 前 的 比较
A 数 | 实验 前 三 日 平均 st We EF YF 针 刺 加 痊 环 卉 和 后 平均
10 0.1906 0.1982 0.4730
平均 过 加 (a) 0.0076 0.2824
MR (sd) 0.0236 0.0435
t 0.322 6.47
P > 0.08 P< 0.01
差别 不 显著 差别 很 显著
ont AS ane
, : : ¥ 4
3 . ne . ta ClO 9) hn 和 ie . 5
半生
Lele whe - wee if)
1 RR at AAD
«yy , J .
Fe2 JET AMS RIERA PIMP EE RRP 17- 状 皮质 关
固 醇 含量 (mg/24 小 时 ) 与 针 刺 前 的 比较
A 数 | 装 哈 前 三 日 平均 at 刺 续 平均 St sl) bu Yar EG eB
a 6 032313 0.2368 ¢ 0.2520
r 7 #38 m (d) 0.0055 0.0207
Bac ee wk ® (sd) 0.0685 0.0847
ax! Wh t 0.08 0.244
‘: i ws P > 0.05 P > 0.05
B 差别 不 显著 差别 不 显 闭
FE, 未 观察 出 针 刺 足 三 里 对 尿 中 17- 状 皮质 类 固 醇 合 量 有 何 影 沁 。 人 针 刺
”，” 非 湾 位 腿 部 肌肉 ,遭受 寒 痊 后 , 尿 中 17- 故 皮质 类 固 醇 合 量 的 增加 亦 不 题 著 。 什 刺 足 三 里 ，
SERRE, 尿 中 Te Pe RE. 足见 针 刺 足 三 里 所 起 的 是 调节 作
用 ,在 正常 一 境 中 不 能 体现 ,在 某 些 不 利 开 韦 中 ,能 通过 色 上 腺 皮质 的 活动, 加 强 机 区 的 防
LBB.
ARE: 人 针 刺 穴位 应 该 包括 两 个 作用 : (1) She RE, (2) AALATE. JAS
， 刺 非 穴位 的 腿 部 肌肉 ”作坊 “人 针 刺 足 三 里 穴位 ?的 对 照 , 比 用 “不 针 刺 > 作 篇 对 照 , 更 能 体现
出 足 三 里 穴位 的 作用 。 所 以 我 们 探 用 了 前 者 。
FRING CK BSBA ALU
Zz | aE
CGOEAKS LAC)
Ba ie FE BY BAS A Tie ER RS TE Bs SA EK
aah. FOOD BIH, BEATA eA MEA (Greenstein 等
1942, Appleman 2 1950, f£#8/\ BS 1957, Utsuqi Kazno 1960, —XEW 1961), Thi
WEES Pe SE A aR ESL, Rees BS I SA
” MBTEPE, AT ESI HY (Zerner 1922, Massarelli 等 1957); 另 一 些 彰 者 的 意见 时
。 此 相反 ,， 瘤 与 健康 人 血 过 氧化 毛 酶 活性 的 爸 化 没有 了 明显 差别 (Richardson 1953, Pa-
‘ak : _ padodonlou 1953), 3c ik_E Ar AAS Meier HOLA Be, Ta) RE A RRB
原因 之 一 。 我 们 检查 了 64 例 癌 与 贫血 病人 及 35 Pile EA 5 i Jad WF BE
其 活性 但 单位 体积 血液 、 和 红血球 数 及 血红 蛋白 量 的 关 傈 以 狂 别 其 活性 区 化 的 特 园 性 。 我
们 考虑 到 ， 血 液 过 氧化 氨 酶 的 测定 方法 简易 ， 如 其 活性 释 化 砍 可 作 篱 诊断 癌 胜 的 可 靠 指
标 , 则 具有 很 大 的 实际 意义 , 过 是 本 文 的 目的 。
一 44 一
Se Se ee eee
eS ee ee ee ee
SS eee
EE ee a nee iO ee A ae 4
种 单位 表示 : 1) ASA — 7 HO, 毫克 数 /30 分 锌 氏 毫 升 血液 ; 2) MC BRI
氧化 氨 酶 指数 一 分 解 了 0。 毫克 数 /10* 红血球 ; 3) 血红 素 过 氧化 氨 酶 指数 一 分 解 HO,
”毫克 数 / 克 血 本 素 。 血 季 素 量 是 按 Hellige 改良 Sabhli 法 测定 的 。 Heys Neubauer
式 血 球 计数 板 计算 红血球 数 。
根据 我 们 的 材料 ,健康 人 单位 体积 血液 中 过 氧化 氨 酶 活性 与 红血球 数 天 傈 不 大 (相关
傈 数 r=0.26, P>0.10), 而 与 血 红 素 量 则 密切 相关 (y=0.73, P<0.01), 过 可 能 和 与 过 氧 ，
CET RAE ALAR ES HO. 破 培 的 作用 相 联系 。 健 康 妇女 血 过 氧化 氨 酶 活性 比 男性
低 10% , 过 是 因 雪 的 红血球 和 血 征 素 含量 低 撩 男 的 10 儿 的 缘故 。 很 可 能 ,性 激素 的 差别
通过 影 兆 和 红血球 和 血红 素 的 含量 而 影响 其 中 过 氧化 氨 酶 活性 ， Pal aL DK PS sh SA A ER .
血 儿 素 量 之 比 男女 两 性 没有 差别 (ES 0.114, HER 0.112).
检查 的 辕 果 表 明 ， 癌 症 患 者 血液 过 氧化 氨 酶 活性 均 比 健康 人 的 该 酶 活性 低 ， 除 以 着
血球 计算 酶 单位 外 , 过 氧化 氨 酶 数 和 血红 素 过 氧化 氨 酶 指数 的 差别 均 SSS (CHL BS
2.94, 2.06; P<0.01 及 一 0.05)。 贫血 病人 血 过 氧化 氨 酶 活性 只 亦 普 涡 下 降 ,但 其 中 只 单
位 体积 血液 内 酶 活性 下 降 有 明显 差别 。 至 从 癌 病 人 和 伍 贫 血 病人 的 血 过 氧化 氨 酶 活性 的 比
Be: 及 红血球 数 计算 时 , 癌 和 与 非 癌 病人 该 酶 活性 无 差 民 ; mM PRS Lat, Ae As
的 酶 活性 高 基 贫 血 病 人 ;而 以 血红 素 过 氧化 氨 酶 指数 表示 活性 时 ， 人 但
Je ERD AR tat S LAR (P 4H >0.05)。 a
我 们 检查 26 例 瘤 病 人 中 有 一 全 是 女性 器 官 癌 (乳房 癌 、 SSM), 10 PB
(ER LAURIE) MERTEN TEAR FL TA OE SA AR, ST TI
人 该 酶 活性 和 与 正常 值 相 近 , 甚 至 稍 高 些 。 West (1958) RS, FABRE
”乳酸 膛 氨 酶 及 谷 草 转 氨 酶 的 影 澳 亦 不 同 ,在 肺 . 胃 等 的 癌 释 时 升 高 ,而 在 咽 部 癌 、 食 道 癌 时
则 不 大 厂 动 。 由 此 可 网 ,不 同 器 官 的 癌 杰 对 血液 中 酶 的 影 法 旨 不 都 是 一 样 的 。 在 我 们 检
查 的 瘤 病 人 中 ， 只 有 女性 器 官 癌 病 人 血 过 氧化 氨 酶 活性 以 单位 体积 血液 或 血红 素 量 计算
时 , 才 有 题 著 的 下 降 。 但 也 赣 非 女性 器 宫 癌 的 特 徽 , 因 其 释 化 与 姑 科 贫血 病人 上 比较 没有 什
BES UN: 并 和 在 球 内 所 售 的 过 氧化 氨 酶 和 血红 素 之 比 , 二 者 均 降 低 25 儿 ， 女 性 器 官 癌 病 人
和 妇科 贫血 病人 的 过 氧化 氨 酶 指数 相近 。 rhe
EAE, MBER PAAIL, EAE TI EDA AD) MALS eM
(Strong 等 1937, 1940, Tayler 等 1942), (tAM MRA RBA, EA IA
FED, KA WIG A OAL MERA ARATE BA. FIA ASR LIE
AFBI] (2075 1 85 11.3% ) , (SE MAL Se a A A EE AA 86% 3 女性
2 ES TI A SUE BETA AS MAL Ie 45 10.4% , 但 其 酶 活性 下 降 27 多 ， 红 血球 内 酶 活性 与
血 首 素 量 的 比值 ,从 0.112 降 至 0.083, A Id, 癌 采 对 血 过 氧化 氨 酶 具有 一 定 的 抑制 作用 ，，
呐 是 与 贫血 病人 的 该 酶 释 化 无 明 题 区 别 而 已 。
Greenstein, Appleman, F/R He, RMS IA Ae Ae ae
A MH EF, TSE AS CE A ES, Ee
氧化 氨 酶 活性 不 受 抑 制 外 ,女性 器 官 癌 对 该 酶 有 明 题 的 抑制 作用 , PRT BH RE EBD
断 的 专 一 指标 , 因 妇科 和 贫血 病人 亦 有 类 似 的 释 化 。 至 帮 癌 对 血 过 氧化 氨 酶 的 影 法 机 制 究
葛 作 用 帮 酶 的 生成 楼 转 抑 是 直接 作用 从 酶 本 身 , 过 些 关 题 都 有 待 进一步 的 研究 。
rhe Oa ta ds We 和 机 sw
7 ‘ : . { } yy Peeve ae
- 本 1 5 , ‘
我 们 探 用 Bax i 3yGxoaa MIPEVIVE T MT. MS
|
SLRS FE in
gy F-30066 iy AE 1t BT FE
dae : (浙江 医科 大 学 生化 数 研 组 )
‘3 工 F-30066 RAPT DRE AA SEED
ia 45 Ue
| ee ARS PRBS = ear tI
if F-30066 FEE HI A DE AEA BI CL se 1 AL PA
机 能 和 精神 状态 失常 等 现象 。F-30066 B—M ILENE TTA, BLUR (Fu-
racin) 有 共同 的 5- 硝 基 陵 喃 性 。 Green 等 全 报 洲 叶 喃 星 篇 一 表 基 抑制 剂 ,能 抑制 脲酶 、
hi PETA MAE AES. BRP BLED) F-30066 可 以 使 稀释 血液 中 的 血 ，
> 儿 蛋 白 迅 速 氧 化 需 正 铁血 红 蛋 白 ， 引 起 我 们 对 了 -30066 BACH HI (GSH) RE
: 白质 中 殖 基 天 傈 的 注意 。 本 文 作者 进行 了 F-30066 对 血液 中 GSH, Mise ARES
量 的 影 澳 以 及 动物 服 殉 和 后 血液 .和 组 经 中 GSH 合 量 释 化 的 矣 察 。
GSH 合 量 的 测定 探 用 Woodward 和 Fry 的 KIO。 汉 定 法 。 所 用 血液 标本 都 在
隔 邦 空气 的 条 件 下 探 集 , 以 防空 气 氧 化 。 无 蛋白 组 第 滤液 的 制备 基本 上 按 Leaf 和 Neu- —
berger 的 方法 。 血清 蛋白 质 歼 基 含 量 的 测定 旭 探 用 Weissman Sm Ewe,
以 一 每 秒 振动 50 次 的 铂 微 电 极 配合 一 稳 速 电磁 撮 拌 器 代替 原文 献 所 用 PTET GE
所 得 实验 结果 如 下 。
1. F-30066 可 直接 揭 GSH 作用 。 以 1.0 4M F-80066 与 104M GSH & pH7.4
PR HM , HO 37°C 保温 二 小 时 , 另 取 GSH ERIE, 10-* N KIO; ii
ies GSH 量 计 算得 一 分 子 F-30066 狗 可 与 3.6 分 子 GSH (Eo .
. F-30066 在 体外 可 使 血 中 GSH A HRD. Rie MMA F-30066 (18 ~.M/
3 ml 隔 存 空气 搓 填 二 小 时 (21°C) 后 制备 无 蛋白 滤液 , 测 得 对 照 组 血液 中 GS 百 &
BS 1.73 uM/ml 比 物 组 篇 0.68， 和 从 而 计算 得 1 uM F-30066 AHA HL 0.18 si GSH
VER Lamkek BAL F-30066 W434 VRE.
3. RELL. AF. BAS GSH 的 正常 值 经 测 得 分 别 篇 1.65 士 0.15 datjmD， 6.34+
1.08 (uM/gm), 4.72+ 0.46, 2.27+0.28 ( 共 八 例 ) 。 BY POME (1 g/L ke) 和 后 均 出 现 战
” 标 、 和 后 腿 部 肌肉 部 苟 等 中 毒 症状 ,但 只 小 部 分 动物 在 12 小 时 和 后 血液 及 肝 中 GSH 降低 , 13
例 中 的 二 例 血 中 GSH 444% 1.21 .M/ml, 0.99 上 MA/ml, 肝 中 GSH & 443 4.28 和 401。
MGS BIS GSH 含量 均 无 释 化 。 以 呐 喃 星 代 F-30066 也 得 相似 结果 。
4. F-30066 与 人 血清 共同 置 .37?"C 保温 二 小 时 ,和 糙 果 表明 葛 物 渡 度 在 0.86 一 4.5 mM
之 间 每 1wM F-30066 平均 可 使 血清 蛋白 质 中 原 合 散 基 (平均 篇 0.36 上 wM/ml) >
0.060 上 M。 我 们 还 观察 到 於 血清 中 添加 血红 蛋白 后 再 加 入 了 -80066 保温 ,每 KM F-30066
使 此 混合 液 中 歼 基 的 减 少 比 血清 与 血红蛋白 分 别 与 了 -30066 PRM mAs — Le, 其 作
—46—
ee ee ee ee een ON as
2 人 = a
用 数 (uM-SH/uM F-30066) 以 一 次 实验 篇 例 ,混合 液 需 0.055, 血清 篇 0.043, meres
es 0. 023,
§R bese, F-30066 和 与 纯 GSH He Pe FBC 8 2 4, 其 作用 方式 从 该 殉 物 的 化 学
本 质 来 看 可 能 是 对 歼 基 的 氧化 。 但 血液 中 GSH & Me ABM > AEE
此 作用 数 ， 估 计 其 原因 可 能 是 由 於 不 少 一 部 分 药物 被 血 液 中 的 其 它 RE
同时 逮 可 能 由 於 在 我 们 所 用 的 实验 人 条件 下 , 蛋白 质 分 子 的 青 基 与 了 -30066 作用 不 完全 。
肪 鼠 口 服 F-30066 和 后 仅 能 有 少数 动物 肝 肪 和 血液 中 GS 也 含量 降低 ,其 原因 可 能 是
多 方面 的 ,该 药物 在 动物 体内 明 收 快 、 排 港 快 , 组 纳 的 探 样 时 间 可 能 不 是 药物 在 体内 淡 度
”最 高 点 秒 转 内。 而且 在 整体 人 条件 下 , 了 -30066 对 吾 基 的 氧化 可 能 会 受到 某 些 抑制 的 阻 肆 。
Sein, GSH 被 氧化 后 迁 可 以 通过 GSSG 还 原 酶 与 需 TPN 觅 氢 酶 类 协同 作用 利用 代谢
物 的 氨 所 还 原 。 本 实验 所 用 的 人 条件 下 中 然 健在 少数 动物 的 肛 肪 和 血液 中 观察 到 GSH 合
FRAN BEALL, {AEA PER F-30066 作 短 一 种 呈 基 氧化 剂 使 机 体 的 其 些 呈 基 酶 遭受 破 壤 或 抑
制 的 可 能 性 。 我 们 检查 了 F-30066 对 脲酶 COB NF Be HC) Be WL PEA PIE Se EE A
ROE, RADY ,药物 在 2.23 mM 渡 度 时 对 西瓜 子 汪 出 液 中 的 脲酶 没有 什么 抑制 。 | BHR
F-30066 对 琥珀 酸 腕 氨 酶 的 作用 的 枫 察 , HS RT F-30066 可 使 已 退色 了 的 甲 烯 蔓 重 双
生 色 而 未 能 肯定 车 果 。 RANA GAA MSA F-30066 的 感受 性 不 一 定 相同 , 因 此
F-30066 熏 于 基 酶 类 的 作用 有 待 进 一 步 研 究 。 但 我 们 认 乱 该 药 对 斑 基 的 氧化 作用 可 以 作
筷 对 其 药理 机 制 的 认 埠 的 一 个 重要 方面 。
I. F-30066 多糖 酵 解 的 影响
ABE =| ES
Green 便 报导 哮 喃 星 对 抽 苗 糖 酵 解 有 抑制 作用 。 | BRA) F-30066 检查 的 粘 果 表 明
PRET FY i Ly Be eae CR) 的 糖 酵 解 。
1. RHE Ri: BAR AKA RAPE LALA 0.1 M 磷酸 咯 和 组
ie (DH 7.8) PMKR1OZ SAE. MERA MLZ, DER SAD URE, HSE
aR FAAP K VEYA =A, 加 Krebs-Ringer GREG. 体内 实验 时 ,家 如 按 每 日
0.5g/kg 欠 更 连续 二 日 ,每 日 取 血 样 作 乳酸 含量 测定 及 血球 酵 解 力 试验 。 MRA
试验 取 咸 染 尾 蚁 60 天 的 家 免 ,机 死 后 用 生理 食 熙 水 将 成 患 自 门 有 版 及 肝 胶 中 洗 出 , 置 0.1M
BARR (pH 7.8) 中 研 成 5 儿 匀 浆 人 备用 。 AMAA MA) A aR, AE
ahi Tyrode 溶液 按 1:4 混合 的 培养 液 中 ,每 2.5 ml 放大 合 抱 体 二 对 , KH 32°C 保温 16
小 时 ， 全 部 操作 在 无 菌 人 条件 ， 保 刘 完 后 测定 对 照 组 和 丝 物 组 培养 液 中 乳酸 量 及 圳 体 氮
量 。
2. 糖 酵 解 的 观察 : 取 和 组 织 匀 浆 1ml, Bee err 2.5 ml (ak MERE MA 3.5 ml) 加
合 有 20 上 KM MgCl 1% His HRA 0.5 ml 及 4.9mM 或 9.8mM 的 下 -30066 0.5 ml,
以 液体 石 星 杜绝 空气 於 37?"C 保温 120 分 猎 , 加 入 10 儿 三 氧 醋酸 2 ml, MPRA Pe PLB
呈 47 一
5
生成 量 作 篱 糖 酵 解 强度 的 指 醒 。 以 类 元 作 基 质 时 加 肾上腺 素 0.5mg 代替 MgCl。 体内
PERRI, SNRAERT EAE HI 1 ml BENZ 20 KM MgCl 的 1 和 葡萄 糖 溶液 05ml 及
0.1M, pH 7.8 BEE 3.5 ml, DRI AURA MZ SIR 87°C PRIM 90 分 甸 ， 每 隔 30
ASG 1 ml PLT ，
eg RR HM 论
1. FIER MBE IR ERR: «=| Me YR PEAS 0.98 mM PR, ‘eok mS
EAN Hs VA iA BER LAM TC AS HET He TT RS (没有 乳酸 生成 )。 HEIDI EAS 0.49
mM 时 均 有 一 牛 左 右 彼 抑制 。 在 部 分 以 葡萄 糖 篇 基质 的 肌 与 浆 酵 解 实验 ,同时 测定 得 比
物 组 有 磷酸 丙 糖 的 积累 。 | | |
2. RIE ON F-30066 0.5 ¢/ke HSM— A, Hi PhS AP eS, HH 88 pe/
ml 下 降 至 21 we/ml, EM BREE 90 44H 87°C 保温 的 乳酸 生成 量 则 由 23 we/ml 下 降 至
2, PRON F-30066 th Se ALS i AL
B.D se) AE WE PE EE BRE BH , MEU YE FES 0.98mM 及 0.49mM ( 即 在 岳 哺 乳 动物
$0 AEA Ie] ES ES) 没有 乳酸 生成 。 而 血 吸 吓 的 体外 培养 实验 ,对 照 组 共 16 J
时 保温 中 怨 酸 的 生成 量 塌 6.11 mg/nig RAB, F-30066 省 度 篇 3.6 mM 的 培养 液 中 强
体 的 乳酸 生成 量 乱 4.42 mg/mg 器 体 氮 ,1.8 mM 时 篇 6.00 mg /me Tae A aie
#).
F-30066 FRR TARE De IA EAE BSL POR SE, TS HOES BETES ALT BE
BIR AZ—o WL PS SLi MERE LTE A SRE SS AE RS ER BIG
tin De se SEE He ASH POSE SE OS RED, ARR PRRAORe FAVEE AS Ee Se BB BE AE
代谢 。 了 -30066 35 th seh Bs VE AE SHE FE wR Sy SE SR a ES (EE aR
Bifida Fe Ee oP 1B FER tes Re ee Be BE SL, Ree ae
YR SE FS AB
Fel PERSE (1) 已 指出 F-30066 SSRI AE ILE. eee
HARA HE EER BARE OGL, (EL PRMe ARORA
F-30066 SUL) + BER CME PEN SS I AR BL. 估计 了 -30066 在 所 使 用
He EE SOLA A SE, SA HTC Ae 。
百分数 是 接近 的 。 SRMPLIRIE AM, Ha OAS ETT FPL AT Se a RAE
色 , 测定 乳酸 时 实际 上 已 包括 丙酮 酸 在 内 , PRL “PL” BS EAI) Fe AS MR, (SIE AR
排除 乳酸 脱 氨 酶 也 同时 有 受 抑 制 的 可 能 。 WLEVAEHA F-80066 共同 保温 后 乳酸 生成 量 降
低 的 同时 有 磷酸 两 糖 的 累积 , 者 一 事实 我 们 推 想 磷 酸 甘 油 醛 股 氢 酶 受 抑 制 的 可 能 最 天 , 因
乱 该 酶 是 一 个 “敏感 "的 允 基 酶 , 冰 且 在 酵 解 过 程 中 起 着 重要 的 调包 作用 。 酵母 的 磷酸 菇
HE AMA EKG MN), LIL Brodie abaaipw
用 。 PUM AED AP WASH) F-30066 Beek iy EAE DE REE A AE,
ARR EE RIL Ie ROR AGEL E, 进一步 落实 F-30066 Herr,
ER EERIE AE AS ETE HEAT Fo
AM ass
Cee ee PE OS AE,
Il. F-30066 BaKRA KA ee
李 英 储 8 Bee
Hits WE F-30066 使 用 的 副作用 之 一 , 据 降 床 报 告 对 血 吸 患 病人 能 引起 阵 发
性 肌肉 疼 侈 和 神经 机 能 失常 等 症状 ,肌肉 总 列 时 血 钙 和 丙酮 酸 均 正 常 RE RE
六 前 驱 症 状 , 有 血 氨 升 高 现象 。 降 床 观 察 和 动物 试验 都 表明 NH4C1 与 该 药 合 供 使 用 时 可
， 以 增加 其 毒性 。 可 见 F-30066 的 毒性 和 机 体内 氨 代 谢 的 授 仙 有 所 联系 。 本 文 报 六 F-
30066 BARR. AAR RRB MOA» MGB BR Fe BARE | |
ARCH PI, RAR i. 测定 正常 值 的 血 氨 、 血 脲 ,所 用 血样 都 是 在 动
MARA. MAN SH, RR Seligson 微量 扩散 法 (A AWM R RHR) Russell 比
色 法 测定 。 MRIS LEER RHR. 尿素 合成 用 肝 切 片 (Gor-
nall #1. Hunter 1943) 或 匀 装 (Ratner 等 1949) 在 通 氧 的 Krebs-Ringer YAM xe
TH, AACRRKASAME NA; 的 来 源 ， MAR IC. ALB HAR ATP PRTRE ，
HB BTC 保温 1.5 Fo SKARKRNEDER UK. ERERR Swe
ii) ik AS 4S Fy — et SAR Jd BE EMR MR BEL, BS 6.5 一 7 小 时
PH MIE RIL AE IT PRBS Ko
«BRDU ARRAS AE RS. 在 预备 试验 中 首先 检查 了 F-30066 SYR BREE
ME, 其 粘 果 表 明 , 在 我 们 的 实验 条件 下 , A MR ER 2.23x10- M 对 西瓜
子 及 黄豆 提取 液 中 脲酶 的 活性 都 没有 什 床 抑 制作 用 。
需 了 探索 血 氨 和 肝 腾 尿素 合成 之 间 的 关 傈 ， 需 要 礁 定 的 是 动物 葵 将 后 是 否 引起 血 氨 ，
的 升 高 及 其 党 动情 况 。 在 预 试验 中 , 豚 饼 认输 桨 后 血 氨 礁 有 明显 升 高 。 秋 而 ,我 们 测定 了
HE ERR HB REGS A TS PU AR, 其 结果 表明 , BARES 5 一 7 小
MMA LERE ES. FRM SH, OME LI EA dn th BE
显 。
药物 对 肝 尿 素 合成 的 影响 不 论 在 试管 内 或 在 体内 试验 中 ， 均 可 观察 到 有 明显 的 抑制
作用 。 党 药物 省 度 篇 111X10-3 M 时 , 二 只 大 白鼠 肝 切 片 尿 素 合 成 的 影 鸣 ,以 糖 元 作 篇
能 源 时 抑制 70% , FLERE RED 40%, DU PS REE, Se RE EEA
SUIS SER Se CHA ll ee BEIK AS fe] , BEBE MBA. 但 二 者 之 间 无 平行 关
傈 ,在 体内 试验 中 , NRHA AFIS EK ATT es BS PA GB) P65 —7 PAE, BG
肝 切 片 进行 尿 素 合成 的 试验 , 我 们 发 现 , 与 血 氨 升 高 的 同时 , 尿素 合成 均 受 抑制 ,平均 篇
20% 7-70 |
根据 以 上 实验 所 得 材料 ,口服 -30066 可 引起 血 氨 升 高 , 过 是 肯定 的 。 MRE
RRS 5 小 时 因 氨 中 毒 (此 时 血 氮 上 升 过 17 倍 之 多 ) 而 死亡 。 卫 死 时 表现 烦 燥 和 抽筋 等
症状 。 血 氨 升 高 的 原因 是 尿素 合成 受 障 肆 。 呆 外 试验 比 体 内 试验 药物 对 尿素 合成 的 破 玉
更 加 刁 重 ,过 可 能 是 友 物 有 效 涛 度 不 同 造 成 的 差 民 ,体外 试验 所 用 丝 物 省 度 其 高。 这 非 生
理 状 态 下 丝 物 在 体内 所 能 达到 的 水 平 。 应 该 指出 ,在 体内 试验 时 ,动物 一 次 欠 药 1 FE/H
厅 体 重 ,其 剂量 相等 於 临 床 大 剂量 15 天 疗程 的 不 和 。 其 所 造成 的 对 氨 代 谢 干 援 程 度 比 降
2 Be aS Subs «Nee Fae 4) Se eT a ued) i ‘erg ‘ ni 8 : a |
* , J y
PRINS RET AEB ZS, RT i RII A NE GS BE AE IDL PE A TS
相伴 出 现 。 测定 病人 的 血 氨 释 化 对 防治 该 药物 的 毒性 有 一 定 的 意义 。 FRR, Ay
UB, ARBEALE F-30066 毒性 作用 的 一 个 重要 环节 。 MCRAE EEE
降 床 上 预防 使 用 该 药物 时 产生 副作用 的 措施 之 一 。 上 海 精神 病 防治 院 便 给 病 者 车 合 使 用
谷 氨 酸 钠 。 其 效果 良好 。 但 亦 有 报 六 (和 皇 赴 铝 等 ,1962) 用 谷 氨 酸 钠 防治 无 特殊 疗效 。 氢
中 毒 的 机 制 目前 膛 不 完全 清楚。 据 Bessmen HEE, 可 用 三 尖酸 循环 速度 降低 学 说
来 解释 , 胶 中 大 量 的 氨 奢 取 了 三 状 酸 循环 上 的 oA —
u- 柄 友 二 酸 ON. pam -二 > 谷 氨 酰胺 |
HEAR , OTT BEL All TT AE ALS op RE OS AE WL, TEI ORS REI. 如
S38 PEE TEES, A oO SAE Ae, (AS BI o- HK —
WEAR RES MIS BR” , TS - 酮 成 二 酸 它 要 由 葡萄 糖 生成 ; BH, RE ay
除 NH, 的 能 力 而 降低 血 NHs 省 度 , 我 们 认 篇 同时 应 用 和 葡萄糖, 谷 氨 酸 和 精 倪 酸 更 能 提
高 其 疗效 。 至 於 精 氨 酸 可 降低 血 氨 改 善 NHs Pa, KR a
Bo
IV. F-30066 SUNT ORR
OR BIT ED |
RARE HL, BRIM, F-30066 HK 4.9x10-* M YS EA Mey CR.
FB. 豚鼠) 的 肌肉 、 血 球 、 脾 等 组织 的 糖 酵 解 50% AeA, HU DE SR NC wR EEE 100% ,
这样 ,相应 地 也 抑制 了 动物 和 串 体 内 糖 在 无 氧 分 解 产生 的 能 量 。
F-30066 43 5- 确 基 陵 喃 类 化 合 物 , 其 分 子 中 含有 确 基 和 不 蚀 和 键 ,非常 可 能 ， 也 同时
喃 星 一 样 , 作 篇 电子 接受 体 干 援 租 胞 呼吸 作用 ,从 而 在 生物 氧化 过 程 中 也 抑制 了 ATP 的
生成 ,过 对 该 药物 的 条 嚼 和 毒性 都 有 着 重要 作用 。 本 文 作 者 初步 观察 了 下 -30066 MITE
系 的 氧化 磷酸 化 作用 的 影 兆 。
A 5
(1) FREER: | HED (APL 7A) WE WTA, et, 迅速 取出 肝 腾 ,放大 冰
Wz 1.15% KCI-KHCO, 组 街 液 (pH 7.4) VER MIG, ADH UR RS, A, BD
Si, BEA YON th SIRE DUK BH KCI-KHOO; GpiwG 10% FBR, WHR
APE TEDK IKEA
(2) 氧化 磷酸 化 作用 的 测定: 实验 是 用 Warburg 呼吸 仪 进 行 的 。 在 冰 溢 上 加 作用
液 各 成 分 ，E- 必需 最 后 加 , VTA. KORA fd bt i 0.2 毫升 20 匈 KOH
及 0.8x3 em HPCE Re CO:。 通 氧 10 ASH, 移 放 80° 水 浴 模 中 ,平衡 温度 10 分
$i, HEBUATE 20 分 钾 , 屠 取 氧 的 吸收 量 , 用 外 推 法 计算 30 5} POFE A. PRU SCSI,
ne
ete
Idk Mes 14 儿 三 氧 醋酸 2 毫升 以 停止 作用 ,滤波 中 芙 正 无 机 磷 按 Fiske 和 Subbarow
法 测定 之 。 对 照管 中 先 加 三 氧 醋酸 后 加 匀 浆 ,以 便 立 即 固定 蛋白 质 。 蛋 月 质 回 定 和 后 均 你
存 礁 低温 ,以 防止 酸 不 稳定 磷 的 分 解 。
(3) 酵母 已 糖 激 酶 傈 按 Sols SAVER, 酶 俐 剂 的 蛋白 质 用 你 净 腺 法 或 分 光 光 度 计
ERE. 1 ST GRA SEA A 31 毫克 。
FEB AS ETE , FAAS BE A Be HE SR PR REE
“检查 了 F-30066 对 酵母 已 糖 激酶 活性 的 影响 。 TRE TCEIEM
上 ，, 我 们 预先 用 大 白鼠 做 了 一 批 体外 试验 ， 其 粘 果 表 明 ，10-? M F-30066 半 以 丙酮 酸 和
琥珀 酸 篇 基质 的 氧化 磷酸 化 抑制 40—5 0% , Be Mey Ye BES 10-8 M 时 抑制 狗 10%. RK,
用 家 腕 同 时 进行 了 体内 和 体外 的 实验 ,体外 实验 的 结果 以 大 白鼠 材料 相似 。 eR
省 度 对 肝 与 浆 的 氧化 磷酸 化 呈现 明显 的 抑制 作用 。 10-°M F-30066 WRITS RAB
酸化 以 丙酮 酸 篱 基质 抑制 47.0 多 、wo- 酮 友 二 酸 40.6% . HEF 40.07, , 主要 抑制 磷酸 化 作
用 ,对 氧化 的 抑制 均 不 甚 题 著 。 不 加 基质 时 耗 氧 抑制 17.5% , 磷酸 化 抑制 44.2% ,外 加 各
种 基 质 时 耗 氧 的 抑制 更 低 些 ,只 抑制 10 儿 左右 ,但 磷酸 化 的 抑制 平均 将 近 50% 。 在 体内
实验 时 家 台 给 更 每 公斤 体重 132, WREST 小 时 左右 杀 死 , 此 时 ,只 有 丙酮 酸 和 cx- 酮 友
二 酸 在 名 肝 匀 兹 中 的 氧化 磷酸 化 受 抑制 ,其 抑制 强度 坑 19.5 % Fl 23.0% , VERSA ET a ep MS
物 省 度 篇 10-* M 时 的 抑制 程度 稍 高 些
F-30066 flexi # (Furacin) Ys AS IR ORR UNC CHER EEA
BA ZL FE — fr BS SEE Al A A BAS
onl 名 =CHCONH CH; F-20066
ON 一 人 CH=N—NH CON Hs tk i 2B
EAB EHC EHS PSE ARES ALN AP A LR IS RES A
Ho Taylor 等 的 工作 , ReLeK hy SB we Mil ee a CE (8.7 x 10-* M 抑制 耗 氧 量
53%), 在 无 氧 时 陵 喃 星 被 还 原 。 WH, Brodie 等 从 陵 喃 星 对 一 些 呼吸 酶 (BEET TH
股 氢 酶 、 黄 酶 、 粗 胞 色素 氧化 酶 ) 活性 影 光 的 实验 中 观察 到 呐 喃 星 可 与 氧 或 甲 烯 蓝 欧 年春
. 取 还 原型 黄 酶 上 的 氨 ， 作 者 们 疯 坊 时 喃 星 可 代替 普 胞 色素 接受 黄 酶 上 的 氨 ， 和 从 而 阻 断 了
黄 酶 和 条 胞 色素 C CHAM. 在 我 们 的 实验 条 件 下 ， 了 -80066 Hen, BES
10… Ms 对 肝 匀 兹 的 氧化 磷酸 化 作用 的 影响 不 其 显著 ,但 在 较 高 溃 度 时 旭 表 现 明 题 的 抑制
作用 ,不 论 用 琥珀 酸 ` 丙 酮 酸 或 o- AA KOREA (当然 还 包括 肝 匀 浆 中 的 内 源 性 基质 ) ，
10~° 抑制 氧化 磷酸 化 闪 志 50% 。 在 体内 实验 中 , 该 药 对 斑 珀 酸 的 氧化 磷酸 化 没有 什
PERC , TAA MAR o- AK — PRA AG 20 儿 的 抑制 作用 。 吴 喃 星 对 组 菌 及 动物 组 纳 的 琥
珀 酸 觅 氨 酶 和 丙酮 酸 氧 化 酶 也 均 有 抑制 作用 (Green 等 1948, 1951; Asnis 等 1951,
Paul 等 1952 一 1956)。Green 等 报 半 , BREAMG SEM, Heft 5- 确 基 陵 喃 衍生 物 同样 也 可 抑
制 钥 菌 丙酮 酸 氧 化 。 从 我 们 的 实验 材料 看 来 ，EF-30066 对 焉 珀 酸 腕 氨 酶 和 丙酮 酸 氧 化 酶
的 抑制 作用 不 大 明 题 ，10” M 的 药物 只 使 两 者 的 耗 氢 量 降低 10 儿 左右 。
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Ah ey BE A
2. AC NLT) BPS DRT PR CT LEE
杨康 婉 ， 方 一 澄 ” 张 树 政
(中 国 科学 院 微生物 研究 所 , 北京 )
作者 便 於 北京 市 生理 科学 会 1961 年 会 报导 过 白地 霉 木 糖 代 谢 的 初步 避 化 泛 径 ,推测
木 糖 经 过 初步 释 化 之 后 将 参 予 已 知 磷酸 成 糖 循环 及 卫 mbden-Meyerhof-Parnas (EMP)
酵 解 途 径 ,以 及 三 头 酸 循环 。 但 在 白地 霉 中 过 些 途 径 存在 之 登 明 倚 未 见 有 报 壮 。 因此 我
of 这 DJ MI NA 下 PA a Ae) Tew eM RU awry ES Spee oy nT Oe FL OL, Pee ALL RR Te LUND ee if
; cst t UT W ick) i} I 前 AM tl M ( yn ery mee eae na
‘ ft 和 Va i ONY 4
} MAN) 长
MEAT T YMA UE, SCR SANE CN A BS PI, IST
的 形成 或 森 糖 代谢 的 特殊 需要 是 否 会 影响 其 他 酶 活力 以 及 不 同 途 径 的 相对 比重 ， 所 以 将
木 糖 及 葡萄 糖 培养 菌株 作 了 比较 , 浊 用 C** 标记 的 葡萄 糖 进行 了 呼吸 试 克 。
Se MERE AG AMET SA LARS 16 A BCE SELASSIE
SACHS HE Dd Le ti 2 BESS Fe HS IAA HE ii (6.8 fi) o
FEI eRe T EMP 泛 径 ， BR CHEESE, = FRO RIT ERGO TE :二
活力 (包括 已 糖 激酶 、 磷酸 已 糖 民 构 酶 、 酰 烽 酶 、3- 磷 酸 廿 油 梧 腕 氢 酶 、 磷酸 甘油 酸 颁 位 、
酶 . 烯 醇化 酶 .丙酮 酸 激 酶 . 醇 觅 氨 酶 、6- 磷 酸 交 萄 糖 腕 氢 酶 . 转 酮 酶 、 民 楼 样 酸 腕 氢 酶 顺
岛 头 酸 酶 .琥珀 酸 腕 氢 酶 . 荃 果 酸 觅 氨 酶 . 草 酰 乙 酸 郑 化 酶 、 民 入 样 酸 酶 等 ) JE 16 A
有 验 车 果 知 白地 均 中 过 些 酶 均 存 在 , 木 糖 及 葡萄 糖 培养 的 菌株 酶 活力 无 重大 差 黑 。
”用 葡萄 糖 -1-CH 及 有 圣 标 记 的 葡萄 糖 -1-6-C1 作 了 呼吸 实验 (呼吸 时 间 60 分 ) ,计算
Ci/Ca-6 比值 ， 木 糖 培养 菌株 和 坑 0.97， TREE 107, PY Sav ASE Sy
MILB HIMBA.
| 两 株 菌 的 主要 差别 只 BEWARE a PRS AE ST. CNEL ATL 此
fH Hoffmann-Ostenhof 报 潮 的 用 肌 醇 与 交 萄 糖 培养 的 西方 施 旺 氏 酵母 (Selwan-
niomyces Occidentalis) A eESEABIAl.
‘= 62 —
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64 i
ACRE TCI F-ABUILALSERE
AIC ORL
Fes USE SHARP ete 28
| (hE ABR ATIC CLR, ACHE)
SCRK_E BA Ea ae BH yh FE a AC HE CP /0 比值 ) 较 对 昭 组 需 低 ,对
产生 此 种 现象 的 机 制 , 也 售 进 行 过 研究 ”2。 (AHEM, RA BAERS AF aL
在 痊 适 应 情况 下 线粒体 中 能 量 转换 的 研究 较 少 。 有 人 佛 弛 导 鲍 子 在 短 时 间 寒 痊 情 况 下 ，
“其 胸肌 线粒体 所 化 磷酸 化 有 断 偶 联 现象 , P/0 比值 的 下 降 程度 奥 体 温 释 化 有 相应 并 傈 中。
此 种 断 偶 联 现象 可 能 是 机体 对 痊 适 应 的 一 种 生理 调节 机 制 。 篇 进一步 探索 过 一 机 制 , 了
解 动 物 在 寒 痊 适应 过 程 中 肌肉 线粒体 能 量 的 转换 具有 重要 意义 。
本 实验 比较 了 在 低温 (一 3 土 2*C) 及 室温 (28+ 2°C) “Ff SHEE Wistar KAR
(HH 150—200 克 ) 不 同时 期 肌肉 线粒体 氧化 磷酸 化 效能 。 粘 果 发 现 大 鼠 准 通 应 一 天 肌
肉 线 粒 体 P/O 比值 (用 无 氏 呼 吸 器 测 氧 的 吸收 ， 以 无 机 磷 在 保温 过 程 中 消失 量 计算 磷酸
化 程度 ， 己 栈 激酶 及 葡萄 糖 作 篇 ATP 的 受 体 ) 即 有 较 明 题 的 下 降 ( 狗 篱 对照 组 的 76%),
Be Aa ET AD , P/0 HEAT ASs. Panagos #45", yaw APE RABE,
磷酸 化 无 断 偶 联 现 象 ,二 遇 时 P/O He ge BE 26% 9 BAP FR JPA ok RA FS DL Bs
Fo BCL BEALE A HCE HAN Ci BE IT HH BS Ht 此 种 早期 出 现 的 氧化 磷酸 化 断 偶 联
现象 可 能 是 机 体 产 生 紧 和 急 热 能 调节 的 一 种 生化 机 制 。，
乱 了 进一步 探索 肌肉 线粒体 P/O 比值 下 降 的 机 制 ,， 首先 对 ATP 酶 活性 淮 生 了 研究 .
(以 无 机 磷 释 放量 wm/msg 线粒体 蛋白 质 计 算 )。 和 结果 发 现 GRO WZAR VL ABLE
ATP 酶 活性 较 对 照 组 高 30% , 且 此 酶 已 不 篇 二 硝 基 酚 所 激活 。 Re ATP 酶
i， 的 活化 可 能 是 导致 P/0 比值 下 降 的 因素 之 一 。
其 砍 ,线粒体 的 组 成 千 构 和 与 其 功能 有 密切 关 傈 。 按 Clelard By” 观察 肌肉 线粒体
是 浑 液 在 室温 老化 过 程 中 光 密 度 的 达 化 ,发 现 痊 冻 组 的 改 释 不 如 对 照 组 敏感 。 同时 发 现
该 题 浑 沪 放 甘 室 多 一 小 时 和 后 较 对 照 租 有 明显 的 凝聚 现象 。 线粒体 经 机 械 力 处 理 后 (在 玻
璃 匀 兹 器 中 快速 厅 20 分 猎 ),， 痊 冻 组 只 具有 呼吸 功能 ,而 磷酸 化 作用 已 消失 ; 但 对 照 组 仍
你 有 部 分 磷酸 化 功能 。 以 上 现象 表明 冷 辣 组 肌肉 线粒体 的 组 成 千 构 不 如 对 照 组 的 紧密 。
此 种 伙 化 也 可 能 使 氧化 磷酸 化 发 生 断 偶 联 现象 。
在 痊 冻 过程 中 ,我 们 膛 观 察 到 甲状 腺 与 辟 上 腺 此 有 胜 大 现象 。 iy LARA ROADS,
SARE A RAL 1637. PREFER RK, = EB) RLY 176%,
LFF KR Se nS eT BE Be, Ie ee RS aa
调节 能 量 转换 的 作用 ””, LAR SL eS, 故 痊 适应 过 程
中 肌肉 线粒体 氧化 磷酸 化 的 调节 机 制 可 能 和 与 肝 和 线粒体 有 所 不 同 。
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Sa ne a oe at ie ee ee
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Voit 1 As Toe BE AT AC Ee GP aE
A i 5-8 Ha BE A EE
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hE SRL ACER, 北京 )
BRE B8 脂 蛋 白 的 结构 和 与 功能 的 研究 ,需要 较 大 量 的 纯净 BRE. WRABEAA
HOARE, BES VES ERR A IES, (IER AERA, SRE DK
(105,000 G) , PET> ERT (20 小 时 以 上 ) , RABE A. JEL AZ EP B REA
AME EK SEA Py RES ee. UE4E AK Bernfeld 等 四 发 现 硫酸 多 糖化 合 物 ，
可 在 中 性 DH BB 脂 蛋白 形成 不 可 溶 的 昌 合 分 子 。 Oncley 等 四 合用 大 分 子 硫 酸 右 旋 糖
lif (Dextran Sulfate 简称 D.S.) 沉 焉 血清 B WA (BLP), 可 以 大 量 分 万 ,但 在 分 岂
D.S.—BLP 复合 分 子 时 仍 用 超速 允 心 法 , 故 沿 受到 一 定 限 制 。 本 报告 介 胡 一 个 大 量 分 离
AMR B 脂 蛋白 的 较 篇 简便 的 化 学 方法 。
本 法 傈 参考 Bernfeldtel 的 方法 冰 略 加 修改 , 探 用 自 已 合成 的 确 酸 右 旋 糖 本 ( 右 旋 糖
本 分 子 量 39 3S PURE 0.5) WLR BLP, HEB:
(1) PRINTS SL RE ROHL.
(2) FE ESF WE RON IL, mn AGES D.S., 使 最 大 量 地 形成 D.S.—BLP 不
WHEAT.
(3) 用 0.02 M Na,HPO, KP D.S.—BLP 沉没 ,以 除去 其 他 蛋白 质 。
(4) JARRE D.S—BLP 复合 体 ,形成 D.S—Ba 复合 分 子 而 沉 攻 下 来 ,得 到
BLP 溶液 。
(5) 加 Na,SO, 至 BLP 溶液 中 ,以 除去 中 过 量 的 醋酸 钥 。
(6) Gtr BLP 溶液 ,以 除去 过 量 的 硫酸 钠 。 |
以 上 各 步 屋 均 在 0 °—4°O HE, HRS SEN, RK BLP 溶液 。
Bernfeld™ 便 指出 硫酸 多 糖 (Lay BL BLP 形成 不 溶 的 复合 体 ， 是 与 硫酸 多 糖 的
= 54 —
~
. . a
Mtoe ———
分 子 天 小 ,硫酸 化 程度 ,以 及 有 扰 其 他 基 团 有 关 。 篱 狂 定 自 届 D.S. 能 否 特 民 地 与 血清
BLP 形成 不 溶 的 复合 分 子 ， 将 至 血清 , 去 除 D.S.—BLP 复合 分 子 的 血清 ,及 最 后 所 得
BLP 洲 液 进行 狐 上 电泳 ， 电 泳 后 分 别 进 行 脂 质 和 与 蛋白 质 染 色 。 粘 果 发 现 去 除 D.S. 一
«BLP MABE MT BLP Ate, ME o 脂 蛋白 部 位 有 脂 质 染色 ,而 最 后 BLP 溶液 的
电泳 圈 导 ,恰恰 与 去 除 D.S. 一 BLP 的 血清 相反 , 只 在 BLP 部 位 有 脂 质 染色 ，A REA
部 位 有 蛋白 质 染 色 , 而 在 其 他 部 位 汐 无 颜色 呈现 。 上 述 粘 果 充 分 说 明 D.S. 只 特 轴 地 与
血清 BLP 作用 形成 复合 分 子 , 而 不 与 o 脂 蛋白 或 其 他 蛋白 质 反 应 。
ST A D.S. 一 BLP HADFAD ALS HEDMR D.S. 能 否 完 公 除 兆 ， 将
D.S.—BLP 复合 分 子 溶液 及 醋酸 钥 沉 泪 D.S. 和 后 的 BLP WRAIMEMLBIK, BAK
分 别 进 行 三 种 染色 一 一 蛋白 质 、 脂 质 、 蛋 白质 与 酸性 多 糖 一 同 染 色 。 粘 果 发 现 二 者 都 能
题 示 蛋白 质 与 脂 质 染色 ， 且 只 有 一 个 区 带 。 而 蛋白 质 奥 酸性 多 糖 一 同 染 色 图 谐 则 不 同 ，
D.S.—BLP 复合 分 子 有 酸性 多 糖 桨 色 , 而 BLP 溶液 则 无 。 BAA D.S. 与 BLP HRB
PAF, AOA, HABER BLP 不 含有 D.S.。
KARMA): BLP MRE ELAS ERE BLAS
VERAPAMIL, 其 位 置 均 与 血清 "os REAMME—K. RAW BLP 溶液 篇 一 纯 滔
的 蛋白 质 ; RAMEE. 吸收 光 计 在 260 一 300 my 波长 间 有 一 水 明 题 的 吸收 法 ,在
420—500 my 波长 间 有 一 明显 的 吸收 塞 ,此 和 与 Oncleym 等 所 得 烙 果 一 致 ;说 明 在 仙人 备 过
程 中 无 杰 性 发 生 。 用 Phywe 分 析 超 速 离心 机 分 析 , BED 2.3x10°xG, WRRES
1.063 ,在 不 同时 间 观 察 , 均 仅 呈 现 一 个 守 , 其 上 海 速 度 篇 S, 10 左右 ,与 Oncley™! 等 用 纯
BEEOTRHERA. ULERE—S ROW BLP BAM, 只 含有 S, 10
BLP. |
ARIE TARA AAD Am BBE ERATE A TRY 400 毫升 。
= = xX 页
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AS
-一 55 一
BRETT RPE ARBITER
a 及 其 性 质 的 研 完
Rie We Bikes SU ete
BG BIRR Bh BPR WRIA
(中国 警 尝 科学 院 实 验 医 单 研究 所 生物 化 旁 系 ,北京 )
Bh. 可 溶性 核糖 核酸 (sS-RNA) 在 蛋白 质 生物 合成 中 有 着 重要 的 作用 ,能 将 激活 的 氨基 酸
AT AMABCE TEL, s-RNA 的 分 子 量 较 小 ,是 研究 核酸 结构 的 良好 材料 。 因 此 用
总 比较 简易 的 方法 得 到 较 大 量 的 s-RNA ,在 进一步 研究 它 的 粘 构 和 功能 问题 上 是 很 有 意义
a 的 。 TERK, RO REI, PEAR RATERS. 1
8 是 ,一 般 在 提取 方法 上 渤 是 比较 繁复 ,尤其 是 需 用 超速 砍 心 机 ， 在 产量 上 受到 很 大 限制 。
he | ALVA T ABLE BEA BE A BER ABH s-RNA 的 方法 ， 站 对 网 得
的 样品 进行 了 理化 性 质 和 生物 活性 的 测定 。
将 对 数 生 长 期 的 大 肠 查 菌 收入 洗 潍 后 , 加 入 二 倍 重 的 水 ， 三 倍 重 的 酚 , 在 20°C HEHE
2 小 时 。 HEME (1350 g, 20 4, +4°C) ,取出 上 清流 , 重 覆 用 1/2 体积 90% mE J.
LYS A RSE (0.365 克 / 毫 升 ), 旋 离 (19,000 g，30 4, 士 8"C) , 除去 分 子 量 较 大 ”
0 ， 的 核糖 核酸 。 再 将 上 清 液 透析 除去 硫酸 锌 ,加 入 0.1 体积 的 20 儿 醋酸 钾 (pH 5) 及 2.5 体
次 积 乙 醇 沉 泪 s-RNA。 其 中 所 含 的 多 糖 , 按 照 Kirby 法 用 2- 甲 氧 基 乙 醇 除去 。 汪 楼 得
到 的 婴 品 具有 较 高 的 接受 氨基 酸 的 能 力 。 在 没有 ATP 或 s-RNA 或 酶 的 存在 下 ,区 恩
氨基 酸 参 入 作用 , 此 生 文 献 材料 相符 。 s-RNA 的 加 入 量 和 与 S2- 甲 硫 氨 酸 -sS-RNA 的 形
成 有 着 直线 关 傈 ,说 明 STP HRM HERE s-RNA TORS. HRA,
微克 分 子 的 RNA BER ( 即 0.01 N KOH 溶液 中 260 my 3638 BES 10) 可 以 括 带 狗
0.3 毫 微克 分 子 的 Sa5- 甲 硫 氨 酸 。 化 学 分 析 车 果 题 示 由 品 中 合 蛋 白质 狗 1 多, 含 多 糖 4 一
5 多， 觅 氧 核糖 核酸 合 量 不 超过 1 多 。 SHEARER Ee, WER
十 157。 克 分 子 磷 消光 傈 数 在 7000 一 7500 之 间 。258 mp Ba 230 mm HERE ZH 1.9—
2.1 之 间 ，258 mA 与 280 mp 光 密 度 之 比 在 2.1 一 2.3 之 间 。 用 核糖 核酸 酶 或 KOH Mele
和 后 测 定 未 端 ,经 颖 层 分 雇 , 只 得 到 腺 顺 喻 核 苷 ,无 其 他 核 苷 发 现 。 从 测 得 的 未 端 腺 味 喻 核
苷 量 与 龄 基 组 成 计算 分 子 量 在 26,000 左右 。 我 们 也 进行 了 沉降 傈 数 和 撤 散 傈 数 的 测定 ，
二 者 计算 的 分 子 量 和 上 光 数 值 航 篇 一 致 。
主要 参考 文 页
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vate HG =
血清 绰 白 泪 粉 腰 电 泳 力 法 研 完
ee oe
Ht | (第 四 军医 大 学 生化 数 研 室 , 西 安 )
自 1955 年 Smithies 发 表 泪 粉 胁 电 泳 方法 以 后 , 广泛 应 用 於 蛋白 质 等 研究 方面 , 其
SABRC MAN, RABAT, 泪 粉 胁 板 观 做 不 易 掌握 ,电泳 后 蛋白 质
电泳 条件 进行 了 探讨 ,其 粘 果 如 下 :
B 验方 法
as nie 7-3 RE 0.025，pH 8.6。
电源 定 电 压 250 伏 , 电 流 4 一 6 mA/ 厘 米 。
4 BOB WO RUALTT YA PEP 3 克 , HPRUBE 0.3 Fe A_EaR HK 100 ous
”加热 至 开始 沸腾 篇 止 OU BEF FT BLE) , 在 加 热 过 程 中 避 旨 水 分 损失 及 胶 液 区 黑 。 MAB
REBECA BR Biko
RUA EET BE) O
| = x 操 TF
1. BU GERRAR NOUR ACHE PRL (7x 2.5 厘米 ) 寅 度 相等 长 度 篇 6 JDK AD EIY,
PATTI PRA HE, A EB Yih 0.5 JK, RAH EME
WT Z2E, BY 1LSKEA CERBHEE
RE 以 2.4X0.1 KANAMORI EA. RABUN AOR ED BREA
EA, BRR PRA EE 0.008229. MEA
| TRANS Dee Te], WOR LT ELA 0.01 EFT AB HL
4 3. 接 通 电源 UCHR 25 CKTR EMSA, Bia
RBG 0.5 EDK, BI. BERRA MLE i AS 8 一
的 绥 街 液 。 将 载 玻 片 以 水 平 位 置 放 好 , 吸取 90°C Fe AT MEASLY 2.5 FETT, LARA AS
. 10 分 甸 , 血 清 脂 蛋白 乱 3 一 4 分 镍 ,然后 将 血清 蛋白 胶 板 样品 於 100—105°C 水 平 位 置 烘
* 815 AS, IIIS EA Bed AEN RR 40—50°C APE
4. 测定
血清 蛋白 HORB MEO REAR EM Pe 15 Oe, RAKAH
5% BEPRVEMR Pp VERE, LEVEE IEEE +P eH BD 45 SUK HUBER, JES ESET DAE, BH
75} BIBT PYAR 0.01 N NaOH 溶液 中 , 30 5-88 BHETT Hh AE WE 580 mp.
血清 脂 蛋 白 HRB EARS AR BACK, IBERIA
| BUDS 9c, AS EA TRH 6 ka eB PS
M]
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Mee WEA TT HARES SEALER — A POE
= 55
ee 2 a3 ete a
eg a en oS
说 AD
区
血清 脂 蛋 白 预 染色 ”血清 脂 蛋白 按 Larkey 与 Belko 二 氏 法 预先 染色 (血清 蛋白
— ~
RS xm 全 how 一 ae
Oe * :
dt Oe eee a eee
20 乡 栈 酸 乙醇 溶液 中 进行 比 色 测定 ,波长 525 myo
本 法 特 点
1. 电泳 图 谐 清晰 ， 重 复 性 良好 。 PMRMBEA BARR HH 5 Msp: I (63.7%
+2). II (46%+0.8)_ Ill (15.5%+1:6), IV (13.9% +40.6), V (2.1%+0.5), (Are
BURA REE, REVERE AIEEE AAP) 人 血清 w IGE A 8 85.9% +1.7, B-
脂 蛋 白 篇 64.1% 41.5, 24 例 健康 人 (20 一 40 K) 血清 o 与 6 RAR ARRRB AM
文献 报告 相符 。，
2. 电泳 时 间 短 。 FRAME AURA HIBS EE 在 烘 乾 过 程 中 腰 液 即 入 颖 维 灯 所
吸收 , 泳 动 征 各 部 分 蛋白 质 亦 被 固定 於 颖 片上 , 因而 容易 进行 划分 洗 腕 法 比 色 测 定 。 实 奏
千 果 表明 泳 动 是 在 胶 液 部 分 中 进行 ， RET AES OE He 7 ES A 但
探 用 滤纸 片 做 篇 载 体 和 与 纸 电 泳 比较 可 使 电泳 时 间 题 著 熔 短 。
3. 本 法 由 於 电泳 所 需 时 间 较 短 可 探 取 开 放 式 电 访 , 探 作 简单 ， 而 且 使 用 和 街 液 量 较 少
(#58 0 毫升 ) ,每 次 电 访 完 畦 后 将 正 负 电极 互 移 , 绥 秆 液 可 连 炉 使 用 2 星期 。. AEM
动物 肝 租 织 可 溶性 蛋白 电泳 Brits 8 4 B50
主要 参考 文 太
[1] B. J. Larkey and J. S. Belko: Amodification of method for Prestaining a and 8 lipo-
protein separated by paper electrophoresis, Clin. Chem., 5 (6), 566, 1959.
[2] P. Moinat, W. Appel and E. F. Tuller: Eetn. of iphpntare by paper electrophoresis,
Clin. Chem., 4(4), 304, 1958.
[8] Bier, Electrophoresis, p. 225, 1959.
MLERACEL UES BAR
这 廊下 全
(Hea cE CATAL)
关 基 动物 完全 饥 俄 时 的 能 代谢 , 糖 及 脂肪 代谢 的 研究 较 多 (Mena 等 1955, Schole
1961, Lyon 等 1955, Wieland 等 1960, Numa 等 1961, Knoche 等 1961), 但 对
此 时 的 氨基 酸 代谢 研究 较 少 。
近来 通过 胰腺 切除 ， Se Tere. 名、
关 酶 类 尤其 以 谷 氨 酸 篇 中 心 的 转氨酶 及 谷 氨 酸 腕 氨 酶 的 研究 有 所 增加 (Gavosto 等 1957，
Rosen 等 1958, Beaton 等 1957，Pa3sHH3a 1960),
Rosen #¢ (1958, 1959) 及 Hohorst = (1961) Ky /EFCAA BL ER BOBS I aT
ARAB, Fim BAA OLS BLAST SAE AS DUH AS Bie Hy A A AI
(Bpaysuitenh 1949, 1958) 活性 的 研究 是 很 重要 的 。
我 们 除 就 饥 俄 动物 肝 Be NS A te (GD), Pee (GT) 进行 了 分 析 外
-58 一
is
下
4
Ray
还 测定 了 Krebs % (1960) 及 Borst F (1960) He ADO FARMS BA
途径 即 转 氨 氧 化 成 天 冬 氨 酸 的 酶 促 活 性 (GOA)。
实验 方法 及 实验 千 果
动物 : 220 土 40g 的 雄性 大 白鼠 ,分 组 按 日 期 不 同 先后 开始 完全 铭 食 ,只 保 症 水 的 播
取 , 以 后 在 同一 天 进行 酶 活性 的 测定 。 肝 脑 组 织 久 奖 的 网 介 及 酶 活性 的 测定 方法 如 前 次
研究 (作者 1962) 。 酶 活性 以 单位 乾 组 织 60 分 反应 后 生成 的 氨基 酸 微克 分 子 数 (ys moles
_/ 乾 组 织 1g 60 ) 表示 。
RE WR AAR, AF GD TSE ER OLA TT BUS 8 天 表现 明 题 的 增高 ，
“Wis GD 活性 末 乎 一 直 不 到 。
附 表 “完全 饥饿 对 大 白 瞩 肝 及 脑 组 积 谷 氨 酸 代谢 酶 系 活 性 的 影响
Hoe | 动物 数 | 一
肝 i
EE, Ee ee a es
6 191.8 31.0 *;
8 164.6 一
8
8
2 si: *1*o*s 分 别 霹 12 区 ,7 区 ,及 么 区 的 平均 数字 。
FESR: (主要 基质 的 最 后 渡 度 )。
GD “33” (4 ARISE) a PK — RE 0.04M, NH,Cl 0.04M, Heeees 0.001 M,
GOA (F4RRBAZAKRMELGARHBA) SAM 004M,
AGT ( 谷 氨 酸 天 冬 气 酸 转 氨 酶 ) o RK —M 0.08M, KEAM 004M,
TGT (AM x BK MARE) < KM 0.08 M， 酷 级 四 0.004 M,
‘43% 0.4ml, i 1ml, 37°, 60' (只 GOA 在 臣 乓 呼吸 器 上 耗 氧 振 漫 培 头 )
酶 活 收 单位 均 起 u moles /M FW, Le, 60’,
HLM BME: GOA 酶 系 , 肝 到 焰 食 第 8 天 降 到 只 有 对 照 的 16.5% , 脑 内 GOA 的
”活性 在 稳 食 2 日 后 闪 乎 无 杰 化 , 5 天 后 下 降 到 一 定 程度 ,以 后 症 明 即 或 艳 食 到 11 天 关乎 仍
蕉 持 着 狗 篇 正常 值 的 60 儿 的 活性 。 但 和 与 此 同时 肝 及 脑 的 谷 氨 酸 天 冬 氨 酸 转 氨 酶 (AGT)
活性 准 乎 很 少 释 动 即 一 直 保 持 着 原来 的 高 活性 状态 GE—BiA Lik GOA BABAK
下 降 , 其 原因 不 在 反应 的 过 一 环 饰 上 )。 篇 此 同时 另 一 种 转氨酶 TGT ,在 肝 及 脑 均 显 出 医
性 的 增加 。
a ai
}
aS ae
: TERA a
利生 大 白鼠 及 成 鼠 肝 胶 中 谷 氨 酸
氧化 酶 系 的 对 比 研 完
和
(ae Shee Wither)
BAAS Bb in RO PS hy GREW AAR — 1 AEM TE AE EB
过 程 作坊 主要 的 代谢 机 构 (EDpayIITerH 1949, Meister 1955) ， 但 许多 研究 表明 动物 组
织 中 谷 氨 酸 觅 氢 酶 活性 是 很 低 的 〈Strecker 1957; Jones 等 1961), Krebs 等 (1960)
”及 Borst 等 (1960) 收 明 动 物 硼 织 中 谷 氨 酸 的 氧化 主要 是 通过 下 二 机 构 实现 的 :
HOOC (CH?)， COOH + HOOC CH, CO COOH == HOOC (CHa), CO COOH
NHs
+ HOOC ies CH.COOH ge ees ; (1)
3 NH, pia :
HOOC (CHa)s CO COOH + 3/2 02 —> HOOC CH, CO'COOH +4- H20 4+ CO, (2)
| (1) + (2) SMR 十 312 0。 一 > K* AB + COs + HaO | (3)
同时 指出 了 过 一 机 构 的 合成 意义 ,如 天 冬 氨 酸 的 参加 顺 哈 及 吵 啶 核 苷 酸 的 合成 (Reichard ，
as 等 19538, Lukens 等 1956, Miller 等 1962),
HS LARA OOH RS AKO SSE ES 因而 对 此
系 炉 的 得 节 的 研究 亦 属 重要 。 如 有 人 报告 谷 氨 酸 天 冬 氨 酸 转 氨 梧 同 机 体 的 生长 蛋白 合成
有 关 (Bepenes 1961a,b) 根据 个 体 发 育 中 一 系 烈 的 酶 活性 常 是 在 生 和 后 不 断 增 强 (Boell
等 1950，Shen 1955, Moog 1947, 1950，Walker 等 1962) 过 二 特 是 ,同时 考虑 到 蛋白
蛙 核 酸 是 一 切 生 长 的 基本 人 条件 过 些 事实 , 那 订 是 否 谷 氨 酸 的 过 一 氧化 机构 在 初生 动物 (以
致 胚胎 发 育 中 ) 即将 具有 较 高 的 活性 。 BT 对 比 的 结 察 初生 动物 与 成 忌 体 内 的 谷 氨 酸 代
谢 情 况 除 就 谷 氨 酸 转 氨 氧 化 成 天 冬 氨 酸 的 酶 系 (GOA) 及 谷 氨 酸 天 冬 氨 酸 转 氨 酶 (GAT)
进行 分 析 外 ,还 测定 了 谷 氨 酸 觅 氢 酶 (GD) 和 酷 氨 酸 ac 酮 皮 二 酸 转 氨 酶 ,(TGT)。
GD; 考虑 到 Krebs-Borst 的 机 构 , 所 以 未 用 测定 DPN 32 RE (Strecker 1953,
1955) ， 而 是 探 取道 反应 的 o Ba — 酸 膛 原 馆 基 化 生成 谷 氨 酸 的 办 法 (Kpetospuy 1950,
KarHIaHCKH 站 等 1956), tb GD “iz” KA.
_ GOA # Krebs (1960) 转氨酶 按 一 般 术 式 人 等 1962, Hird 等 1950),
. 培养 后 对 反应 生成 的 氨基 酸 通 过 泪 约 色 层 分 析 法 定量 ( 层 析 及 溶剂 参考 Cucakan 1962,
R ， 星 色 按 Mayer 1957) 渡 颖 篇 Whatman No. 1,
co
肝 酶 活性 (u moles / 乾 钥 粹 1g，60') 脑 酷 活 性 (4 moles/ 乾 址 炽 1 g, 60’)
GD. “33” GOA GAT GD “Re” GOA GAT
4 eee) a ee a, ey (en ee ee fee Seren S, OD ee eee ee en
mee 20 27.0 98.7 571.4 17.65"), VIR 232.1
mr Ss 13 172.9 92.8 713.7 14.8 | 194.2 882.9
as BF = +540% —6%, 27.5 —15.4% |. +67.5% +282%
显著 性 (P) —', <0.005 >0.5 <0.05 >0.5 >0.05 <0.05.
ze: 圭 要 的 培养 条 件 如 下 :
GD “8”: 0.4M ame —0.1, 0.2M NH,CI 0.2, 0.2M 个 楼 酸 及 0.1 2 再 二 酸 各
RRR BK.’ +H 1.0ml 37” 60'。， 9
GOA: 0.4M 4450.1, 0.02M MgCls 0.1, 241.0, 76 37° 五 氏 呼 吸 器 上 所 温 培养 。
GAT: 0,4M aM — 0.2, 0.2M 天 冬 氨 酸 0,2， 全 量 1.0, 37° 60'。
bi i ED MD 完
LV. 抗 且 瘤 药 对 瘤 和 胞 呼吸 及 酵 解 的 影响
fe St | MEG
(HR EAL RAMBLER, IH)
AR AD AS AS MEIER OEE AE $Y DS I A HL I EE EMRE, ETT
BARBREABRA RIE. PPRub, HST Re aH ES ee a
HOE APA RRA. AICHE NS A RS
JAMES TH HARI BE CAS AKI AER , A EE AO BE
TROVE ARMORED, 三 瘤 的 接种 方法 与 作者 以 前 报告 相同 。
竹 胞 呼吸 的 测定 探 用 Warburg 标准 检讨 法 。 体 外 痊 药 时 ,将 毕 液 放 入 呼吸 狐 的 侧室 、 平
衡 温度 后 HEME) A EE EP EK, TH ASE AEE, HPS
Hs, AAR RETO RAR. CRIM RERM OBIE, WE
水 旭 做 皮下 注射 ,否则 用 2.5% BA ORR RE SE, AER A STR
| ME, MP RWEREA I, 小 计算 每 毫升 瘤 钥 胞 (REE) DEE (Qu)。 有
ARAMA WWE: ASEAN TE Warburg 装置 中 温 旷 一 小 时 , 取出 呼吸 狐 后 按
Barker 及 Summerson 法 测定 有 氧 及 无 氧 人 条件 下 的 乳酸 产量 。 计 算 时 将 筷 酸 量 换算 成
在 重 碳酸 故 组 征 液 中 放出 之 二 氧化 矶 量 ; QS 表示 有 和 氧 酵 解 率 ,以 QM 表示 无 氧 酵 解
AB
RRR, POA REESE (Nitromin) 每 毫升 100 Hos BEE CATE
We SEW Ay BS, TAS SL kc JRA ED ES Se Se FPS BS
#8, YWIHH (Sarcolysine) 每 毫升 100 (se Ws HK PI 3K PEAS Ke A Ee
ae ee
0.05, 0.155 M KCl #eR29% (i Potter seek bw AGT) 0.4 PHT
了 RH SRA,
a fOPUMOR, OT 7 SHR ASS BIKA es LR ee
#8, N- 甲 酰 溶 肉瘤 素 (N-formylsarcolysine, fii#§ N- 甲 ) 与 溶 肉瘤 素 不 同 , 在 每 公斤
_100 毫克 的 剂量 下 径 口 一 次 给 药 题 著 促 进 瘤 狂 胞 之 呼吸 ， 而 对 有 氧 及 无 氧 酵 解 无 明显 影
#8, N- 甲 酰 溶 肉瘤 素 酰 葵 丙 氨 酸 乙 酯 (W-formylsarcolysine phenylalanine， 简 称
FSPA) 每 公斤 800 毫克 题 著 抑制 吉田 腹水 肉瘤 锈 胞 的 无 氧 酵 解 ,对 呼吸 及 有 氧 酵 解 却 无
PME, 6- 青 基 呆 哈 (6-mercaptopurine， 简 称 6-MP) 在 每 公斤 200 Se ye HM ie
题 著 抑 制 吉 田 腹水 肉瘤 租 胞 的 无 氧 酵 解 ,对 呼吸 及 有 和 氧 酵 解 却 扰 明 题 抑制 作用 。
WAR ERSE A, AML AIt VAP, W- 甲 , FSPA 此 可 使 吉田 腹水 肉瘤 大 鼠 的 生命
比 对 有 照 组 题 著 延 长 , 冰 使 部 分 动物 不 生性 瘤 。6-MP 的 治疗 效果 不 及 氮 芥 街 生物 ,每 公斤
200 毫克 时 使 腹 瘤 动物 的 生命 比 对 照 组 动物 只 延长 4 天 , HAM ERIE.
关 故 抗 厅 瘤 药 对 瘤 组 织 呼 吸 及 酵 解 的 影响 女 献 上 已 有 一 些 报 告 ， 但 是 由 艾 不 同 作者
所 用 剂量 及 材料 各 不 相同 所 得 车 果 很 驳 互 相 比 较 。 早 川 及 松森 报告 氧化 氮 芥 显著 抑 制 动
物 肝 , 脾 及 脱 的 耗 氧 量 。 但 是 广 田 却 报告 氧化 氮 芥 对 人 胃癌 组 织 呼 吸 无 影响 ,而 轻 度 抑制
BEM. RM ABH Toshiaki 及 Kurosu 的 粘 果 基 本 一 致 , 即 每 毫升 100 微克 的
氧化 氨 芥 对 吉田 腹 水 肉瘤 硼 胞 的 呼吸 .有 氧 及 无 氧 酵 解 无 显著 影 玫 ,而 对 艾 氏 腹水 癌 翘 胞
的 呼吸 有 明显 抑制 作用 ;不 同 的 是 我 们 未 能 司 明 氧化 氨 芥 对 酵 解 的 抑制 作用 。 演 种 差 枢
的 产生 有 三 种 可 能 : 首先 是 更 品 来 源 不 同 ;其 砍 测定 酵 解 的 方法 不 同 ;再 砍 刊 断 效果 的 依
据 也 不 一 致 。 上 述 作者 以 抑制 率 的 表面 值 作坊 依据 ,所 得 数据 未 做 翘 计 上 处理。 此 外 有 报
告 指出 ， 酵 解 之 检 压 间接 测定 不 能 排除 因 其 他 机 制 或 其 他 有 机 酸 引 起 二 氧化 矶 释放 的 可
a
BUM RZ, HLS IRENE 24 NTS kK A
ABRAM SES, 最 近 Topoxanckaa 也 报告 , ERMA 45 的 大 鼠 以
治疗 量 的 溶 肉瘤 素 后 24 小 时 呼吸 奥 酵 解 仍 未 受 影 攻 。
Mihich 等 售 报 告 ,每 日 给 肉瘤 180 小 鼠 6-H 50 毫克 /公斤 连 米 7 天 , 题 著 抑 ，
制 瘤 组 织 呼 吸 及 无 氧 酵 解 TE ALT) SE, I Ee
中 有 不 同 ,也 冲 明 6- 殖 基 顺 哈 题 著 抑 制 吉田 腹水 肉瘤 竹 胞 的 无 氧 酵 解 。
从 上 壕 试 验 辕 果 看 来 ， 不 同 抗 荐 瘤 药 对 瘤 粗 胞 呼吸 、 有 和 氧 及 无 氧 酵 解 的 影 池 互 有 不
” ， 同 , 即 或 同一 类 型 溶 肉瘤 素 衍生 物 的 作用 也 不 完全 一 致 。 看 来 , 毕 物 妾 动物 采 瘤 的 疗效 与
” ”当代 儿 的 影响 间 的 相关 问题 兹 无 一 定 规律 。 值 得 注意 的 是 : 我 们 所 试 的 五 种 药物 中 不 葵
ss AAR DURE, AAPM Warburg 及 Burk BSAA
AE ARNE BY EU AE
Tw i
= 了 te
SS 这
人 ET
Yo 人
Ja
和 了
这 —62—
正常 人 血清 脂 蛋 自 及 其 分子 中 胆固醇
和 磷脂 的 含量 熏 比 值
PAs EP SRE see DASE
| (西安 第 二 医 香 院 生化 数 研 租 )
PES AREL BUTE T IRAE. 在 测定 ok B 脂 蛋白 相 轩 含量 的
同时 ,也 测定 了 w 及 B 脂 蛋白 分 子 中 胆固醇 和 磷脂 的 含量 。 厌 以 了 解 我 国正 常人 上 述 各
项 的 生理 数值 , 间 和 进一步 探讨 与 年 龄 .性 别 的 关 傈 ,和 w 及 B 脂 蛋 白 相 光合 量 不 同时 , 分
“ 子 中 胆固醇 与 磷脂 的 组 成 情况 ,以 供 研 究 某 些 病理 状态 时 的 参考 。
脂 蛋 自 的 罗 上 电泳 分 风 及 其 分 子 中 胆固醇 和 磷脂 的 提取 届 测 定 ， 均 探 用 李 健 帘 氏 使
用 的 方法 。 作者 在 工作 的 过 程 中 发 现 用 直径 2.5 厘米 的 大 试管 提取 胆固醇 时 , 可 基本 上
避免 呈 色 时 气泡 的 产生 ,使 比 色 工作 得 以 顺利 进行 。 在 磷脂 测定 中 将 呈 色 反应 时 的 温度
由 室温 改 在 90—100°C 的 水 浴 中 五 分 甸 , 即 在 流水 下 欠 却 ,然后 移 至 室温 静 置 10 一 20 分
猎 , 再 行 比 色 ,可 大 篇 提高 颜色 的 深度 。 因此 ,血清 的 用 量 由 0.12 毫升 降低 到 0.04 毫升 ，
AAR Hem SI— te. WE TERE ENTE TET
WEAR AA TH HD ARRAS , SER A 21—47 eR CH 21 一 47, 女 20—42), 共 |
115 A (3 78, & 42).
"MUERTE ob A ARI EE ERE:
(—) ARBITER Ami o IGE RUE BH 29.74%, B 脂 蛋白 估 70.264 0.69%,
(=) @ 脂 蛋白 中 胆固醇 含量 平均 篇 65.1 土 3.33 E98 % . BENET 81.014 2.19 SHG |
比值 篇 0.89，B8; 脂 蛋白 中 胆固醇 篇 168.8 士 4.91 Se % _PRIG 76.6941.81 SHS. test
篇 2.39 士 0.107。
(=) wa 及 BREA PRES AR BEIT.
按 不 同年 齿 、 性 别 进 一 步 比较 上 述 各 项 数值 时 , 除 男性 21 一 30 BE HA 31 一 40 HRA B 脂
EA PRR (t=2.62, 5%>P>1%) 及 胆 、 磷 比值 下 降 (t=2.2, 5%>P>1%) 和
31 一 40 pR BL 41—47 PEM B 脂 蛋白 中 胆 、 磷 比值 下 降 (t=5.8, P<1%) 具有 题 著 性 外 ,其
父 均 不 明显 。 同 样 ,女性 除 21 一 30 FRAN 31 一 40 FEM B 脂 蛋白 中 磷脂 增高 (t 一 2.2,5 狼 >
P>1%) 及 胆 、 磷 比值 下 降 (t=2.3, 5% >P>1%) BSH, HWA.
按 不 同年 龄 .性 别 进 一 步 比较 w 6 脂 蛋白 中 胆固醇 和 磷脂 的 煽 量 时 ,看 出 :
| (—) w #6 JB +p Ae Oe aS A A ES Eb AY BE OH DF BERS, MEME
aR LMR. TEAC PES RUSE SEL.
(=) cfs REA PREMMEMER SHAME MAM RAORR. 但 以
男性 21—30 RAN 31 一 40 旋 间 磷脂 煽 量 的 增高 (t 一 2.24， 5%>P>1%) AAR, BELGE AS
TB (t=2.3, 5% >P>1%) 较 题 著 外 ,其 父 不 明 题 。
此 外 ,， Ha RB 脂 蛋白 的 不 同 相 对 含量 进一步 比较 分 子 中 胆固醇 和 磷脂 的 合 量 时 ，
一 63 一
es
ee tr aa sa
oe : a. he “ft
ee
7
*
‘ i = 4 s
Oi, ee ee T
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ee a ele
Ae. 四
wo bal
看 出 : ，
(一 ) c 脂 蛋 白 合 量 不 同时 ,磷脂 的 含量 随 wx 脂 蛋白 含量 的 减低 而 沽 低 ，B 脂 蛋白 合
量 不 同时 ,胆固醇 的 含量 随 B 脂 蛋白 的 增高 而 卉 高 。
(=) 但 在 w 脂 蛋 白 中 胆固醇 和 B 脂 蛋白 中 的 磷脂 则 无 此 规律 性 的 合 化 。
综合 以 上 粘 果 , 可 以 看 出 ,在 测定 的 对 象 中 :
(一 ) 血清 脂 蛋白 的 含量 ,在 21 一 47 iS NAR A SB te BE FR
(=) a BRA PAL BER BRIS, B 脂 蛋 白 中 胆固醇 高 礁 磷 脂 。
(=) aK SREB PAIRS RR BE.
(OA) Rae BA Ae He EY 21 到 80 HBeAN 31 到 40 Hee MTA BN Ab ARE
| LE 而 B GBS +P AL BAA AP MSL, SERIA BE |
(BE) Bak B 脂 蛋白 相对 含量 不 同时 ,磷脂 在 w 脂 蛋白 中 月 着 含量 的 减少 而 沽 ，
胆固醇 在 B 脂 蛋 白 中 随 着 合 量 的 增高 而 增高 ,其 他 无 规律 性 公 化 。
分 析 的 车 果 ， 脂 蛋白 分 子 中 磷脂 的 含量 与 李 氏 的 相同 ， I ST
高 ， 因此 其 比值 也 高 克 李 氏 的 车 果 。
我 国正 常人 血清 胆 碱 酷 酶 活力 的 测定
= ,增多
(西安 第 二 医学 院 生化 煞 研 租 )
。。、 根 据 近年 的 研究 ,血清 胆 碱 酯 酶 活力 在 许多 疾病 时 都 发 生 明显 的 改 生 。 测定 此 酶 活
力 不 仅 半 活 病 的 珍 断 ,疗效 及 预后 的 砚 察 极 有 参考 价值 ， Ti ES BSE A AE |
HR GE BNE FS — AY FF Eo
作者 对 Metcalf IER PZ MERIC We ALBA IE Hy WATE T ELSPETH
定 了 203 BEM AMSA BRE Do KRG IEAS AA Al FZ, WE SUSIE WC
SLO GH LEME YA Heh HS BL LORETO AS 6, 5 , HE OU A HT
胆 碱 成 正比 。 酶 活力 单位 以 1 毫升 血清 在 37"C 时 1 ASFA ZEAE DEB
表示 。
实验 表明 下 烈 因素 对 酶 活力 的 测定 有 影响 :
‘ 1) ERM HER ECE 1.5 一 1.8 M ile Pye LS RD LE 2.0 M 附近 路
REBAR SE PMR A, RARER K, WR EEE EAE MS
2) Ata ERB BANS ZIAEL CE 6h 10—20 5-8 ABELIEK
8) 利用 不 同人 的 血清 在 同一 条件 下 所 作 的 对 照管 数值 相同 , 故 用 此 法 进行 分 析 工 作
A PARI EAT Se HAS BE EA EIR
: .4) MIEWARR 4°C 冰箱 中 24 一 48 小 时 能 使 酶 活力 降低 ， 帮 在 探 取 标 本 分 对 血清 全
应 立即 进行 测定 。
4
_—— =—— _ i a tel in ?
ws a {es 2 a ee
bat er: Sua, - Sy CEO MPa,
eo,
ce qepagalagmenitel
i 用 此 法 放 注 关 ‘che eae. ‘teams 208 名 下 各 5 人 (其 中 男性 142 A, eee
;女性 61 人 ,年 龄 自 20 BRE 39 GR) 酶 活力 进行 了 测定 。 KASIM ME oe |
血 员 ， th — AL 4 PRETIETLE he Nap 血色 素 在 75% VAEo fk 20—
ae
bd RS EBX
MLN ORES DLS
BIS BHR MT ESR
me”: x eae (Pa — SBE (LATA)
TMA ROE, ALIN. EMM, RRC
HAART I CERI RD BG Te AT BI — A RO EE cna
RARE, MERA L PRETO RLY BIE T HE RE. ESE
— ARTA THE. 从 现 有 的 女 献 材料 中 已 有 不 少 有 天 和 方面 的 研究 报导 ,但
| 有 关东 化 方面 的 研究 从 不 多 见 。 篇 了 从 各 方面 探讨 原因 ,作者 从 生化 方面 也 作 了 分 析 , 主
“要 是 分 析 了 高 血压 病人 血清 用 蛋白 和 此 蛋白 分 子 中 胆固醇 奥 磅 脂 的 含量 ， 血 请 胆 碱 醋 醇
的 活性 ,以 及 高 血压 患者 经 过 和 综合 治疗 前 后 上 述 各 项 的 达 化 情况 。
血清 脂 蛋白 及 其 分 子 中 胆固醇 , 磅 脂 和 血清 肥 碱 栈 酶 活性 的 测定 方法 ,已 在 作者 生 李
。 十 烈 等 所 作 的 正常 人 血清 脂 蛋白 及 其 分 子 中 胆固醇 和 磷脂 的 含量 及 比值 和 我 国正 常人 血
|， 清 胆 碱 酯 酶 活力 的 测定 HARE) PER. fb) =
研究 的 对 象 共 有 68 人 :( 男 58, & 10) ,患者 均 需 原 发 性 高 血压 ,站 在 本 市 FP Be Be TE
院 治 疗 的 病人 。 其 平均 血压 是 : ABER HAIR 150—220 SKIKE, SF RE 95—160/9K
— 66
ls Recon cite
en
er 和
Ages thn tap
58 May ae
FAKES HH Bene che ME 100—160 SK TAKE, APGRME 60 一 110 RAE. 血液 标本 均 在 早饭
TSAI. 气功 药物 综合 治疗 前 合 的 分 析 是 到 其 中 的 23 一 27 例 ,经 过 一 个 阁 程 (21
天》 的 病人 。
wy FAS UL ABA EAN JIG A BETES 人 分析 比 较 的 粘 果 是 : 5
(一 ) 患者 血清 胆 碱 酯 酶 活力 单位 较 正 常人 显著 增高 患者 152.504+5.86, EMA
112.1+ 2.97). 省
(=) 患者 B 脂 蛋白 百 分 含 量 和 w、A 脂 蛋白 中 的 磷脂 , 及 w 十 B 脂 蛋 自 中 磷脂 的 站
_ 量 ， 均 较 正 常人 有 明 题 的 增高 (患者 依次 篇 74.09 士 0.76，102.4 士 7.48，128.49 二 8.43，，
| eee 218.128. 46; IER AKA 70.26 + 0.69, 81. 0+2.19, 76.69+ 1.81, 157.2+3.71).
) Bee: (=) BH o,f Rath BEAT MAG MARIE ARM (RAS
ae 40.5+ 2.70, 112.10+ 7.51, 150.5+ 9.52; 正常 人 65.1+ 3.33, 168.8+4.91, 230.54 6.55).
(四 ) Bea, B RatB IFES PAR, BESET AER (RII 054+
0.052, 0.98+ 0.07, 0.73+ 0.054; 正常 人 0.94+ 0.06, 2.39+ 0.107, 1.60+ 0.066),
按 高 血压 病 患者 不 同 含量 的 w 及 BREA, HD HF Pn OIE,
患者 血清 6 脂 蛋白 中 的 胆固醇 也 随 B too
化 。 j . ei fi a Gee
HAS Se ha ETT HII
(一 ) ABA TA AES PORES LAL RCRD A A HS IR AT BT Be 8
正常 值 接近 (治疗 前 142.04, YaHeH 116.06),
(=) a 8 及 w+B 脂 蛋白 中 的 磷脂 均 有 下 降 , 但 不 具 糙 计 意 义 ( 治 疗 前 w 101.37;
146. 10; a+ 251.85, YE#B a 93.18; 8109.21; w 十 B 199. 80). .
(3) 8 及 十 B 脂 蛋 白 中 的 磷脂 下 降 则 不 题 著 , (PLB Ae 8 ste
正常 人 明 题 降低 的 状况 下 ， 1 TRS ST B 0.843 a+ 0.64, AHR B114;
a 十 B 0.85) ,但 仍 低 於 正常 人 。
按 患 者 经 气功 药物 综合 落 疗 前 后 不 同 含量 的 :wx 及 BRED, 进一步 比较 其 分 子 中 有
固 醇 和 磷脂 时 , 除 B 脂 蛋白 分 子 中 的 磷脂 均 有 不 同 程度 的 下 降 外 ,其 从 均 不 规律 。
综合 上 述 和 结果 ,可 以 看 出 ;高 血压 病人 血清 胆 碱 酯 酶 , 脂 蛋白 ,及 其 分 子 中 胆固醇 和 和 磷
脂 以 及 胆 , 磷 的 比值 均 和 与 正常 人 不 同 。 其 中 胆固醇 在 a B 中 的 分 做 及 w 十 B IRAP
煽 量 均 低 於 正常 人 和 文献 报告 的 数值 ,血清 胆 碱 酯 酶 , BEA, a, 8 hate 脂 蛋 自 中
的 磷脂 均 显 著 增 高 ,三 者 中 胆 , 磷 比 值 苦 题 著 下 降 。 RRM ERE, 在 血压 下 降 ，
的 情况 下 , 血清 胆 碱 酯 酶 的 届 常 情况 有 了 显著 的 恢复 , B 脂 蛋白 分 子 中 及 & 十 B GRAD
子 中 胆 , 磷 比 值 亦 有 显著 的 改进 。 通 过 上 述 现象 ,初步 现 坊 以 气功 需 主 的 降 压 方法 不 仅 作
用 於 血压 方面 的 释 化 , 同时 当 机 体 的 某 些 生化 改 释 也 起 了 一 定 的 影 沟 。 气功 疗法 的 亩 多
方面 的 作用 ， 计 高 血压 病 的 神经 源 学 说 有 着 您 来 您 多 的 支持 意义 ， 但 高 血压 病 是 很 复杂
的 , 仅 依 据 现 在 的 一 些 研究 粘 果 , 倚 不 能 关 明 其 原因 ,有 待 於 多 方面 的 崔 炉 研究 ， 才能 村 出
实质 上 的 原因 。 wie a
3
上 . » a te ¥-
Pe ee Oe Re
2 a I pt Tiler eRe
Pe IL eam err OD He pe RO
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一 66 一
Ee ee —— —
EG HAE EE AE
| SR PE BI BS
SL sf WER ERNCL BEF
(RE SAGE”)
BL AMEOOKES OAD AUN ALPERES Bin, UMACSE OPE LEE
Ae HE EE HC STR EL MRE e, JE 16000 父 人 条 准 行 蛇毒 研究 ;本 文 所 将 其 中 三 种 蛇
是 毒 : PIEARGE MERE (Venom of Naja naja atra, Chinese Cobra) , 眼 偿 王 蛇 毒 (Venom g "
of Naja hannah, King Cobra) R @#ehe3$ (Venom of Bungarus fasiciatus, Banded
Krait) 的 乙酰 胆 龄 酯 酶 (AChE) 、 卵 磷脂 酶 (LIFTER I SURE YA EA) 及 对 酵母
RNA 水 解 的 酶 活性 进行 观察 及 比较 ,初步 得 出 下 列车 果 :
一 、 广 西 三 种 蛇毒 的 ACh 活性 : 用 Warburg 氏 呼 吸 计 和 气压 法 测定 ， 烙 果 三 种
蛇毒 均 具 有 乙酰 胆 具 酯 酶 活性 , 酶 活性 大 小 顺序 篇 : 金 环 蛇 毒 (Qacun Doo 5819 微 升 CO/
Bye HRT), PRENRGERERE (Qacan bs 884 微 升 CO/ 毫克 赣 蛇毒 ) ， 眼 偿 王 蛇毒 (QAcnm
bso437 微 升 CO/ 毫 克 乾 蛇 毒 ) ;其 粘 果 与 各 学 者 报 半 一 致 。 原 凡 毒 的 AChE 活性 与 小 白 ea.
‘SHE: (后 致死 量 ) 不 成 兹 列 关 傈 。( 毒 性 大 小 顺序 篇 : RGESE SESE, +P EMRE AETE,
SRB.) 此 或 由 帮 考 性 是 各 种 有 毒物 质 对 机 体 作用 的 综合 粘 果 ,而 非 单 一 酶 的 作用 。-
二 、 广 西 三 种 蛇毒 的 卵 砚 脂 酶 活性 : ARS PNK (RR. DAR. RR)
红血球 混 县 液 的 直接 溶血 和 间接 溶血 作用 方面 , 用 溶血 百分率 和 溶血 百 分 这 之 差 值 作 篇
指标 ,探讨 其 溶血 现象 。 三 种 蛇毒 直接 溶血 和 间接 溶血 的 烙 果 是 不 一 致 的 :
(1) 三 种 蛇毒 不 同 汉 度 对 小 白鼠 血球 的 直接 溶血 ， 随 着 蛇毒 汉 度 的 增加 而 溶血 百 分 -
棕 亦 随 之 增加 ,但 三 种 蛇毒 各 呈 不 同 的 “S?” 状 曲线 。 HEME HE — HEE EL, SEES
MBE (VALET ZS 50 多 [下 同 ] 的 蛇毒 省 度 坑 3.93 毫克 /毫升 ); IRGEE REE AZ (7.88
毫克 /毫升 ) ,中 华 眼 镭 蛇 毒 较 弱 (9.75 毫克 /毫升 )。
(2) 中 华 眼 镭 蛇 毒 对 不 同 动物 如 肽 鼠 、 2 OR A UL HY,
PRAIA GE, RRB) RB.
(3) "PREM RE RE WK ele JE RE NaCl wien neimieri. 发 更 溶血 -
百 分 这 有 不 同 程度 的 影 沁 , 其 中 以 0.48% NaCl RAMS, RIMM ORS
#5 53% , 加 了 蛇毒 增 过 71.2% ;因此 不 能 排除 蛇毒 对 深 透 性 溶血 的 影响 。
(4) 三 种 蛇毒 不 同 省 度 与 一 定量 (0.02 毫克 /毫升 ) 纯粹 卵 磷 脂 作用 后 ,对 小 白鼠 征 血
球 的 间接 溶血 比 直 接 溶血 要 强 , 奥 过 去 学 者 认 篱 是 卵 碍 脂 酶 活性 的 实验 符合 ;但 三 种 蛇毒
间接 溶血 百 分 牵 曲 线 各 有 不 同 :. SRM EMIS ABEL: PE
“AREER CESK — Ue Be HE PQ (0.375 毫克 /毫升 一 1.5 毫克 /毫升 WP BARAT, HR
SC SE , FUN Yes tn A-SI rind TP Ba + REE RE EA BSE HT, SCY aL 23 2 BE GE A
* SORE REACT OT EM AN A OLR HLTA ALAR
— 67 —
4 te iB eI 3.0 SE ES Bt SA 324M 0
三 、 三 种 蛇毒 对 酵母 RNA 的 酶 促 反应 :仿效 Radomoski 测定 法 测定 同 _. 浪 度 =
(3. 古 毫克 /毫升 ) 的 三 种 蛇毒 溶液 各 对 三 种 不 同 滤 度 的 酵母 RNA ( 英 B.DH WR) ey
Re (60 毫克 /毫升 ) 40 毫克 /毫升 及 20 毫克 /毫升 ) 作用 ,在 保温 37*C 下 ,用 Beckman 、
Model G 型 酸度 计 每 10 AMER PH —X, 以 ApH (Hike ARE RNA 水 、
解 产 生 酸性 物质 情形 , 千 果 :
(1) 三 种 蛇毒 均 能 水 解 酵母 RNA。 mea |
(2) ApH ekatA-b, = MIRE Ep, (6 NRE PYM ALO SE EC, emt ;
RRR HBR. a
(3) KRG Fob ASI ACHE DH 6 和 8 ZeAnF, ADH esa pH 8 Je#ibe
大 ,因而 蛇毒 分 解 RNA 的 酶 活力 的 最 适宜 DH RASA ATE 7.5 是 接近 的 。
f 此 外 ,三 种 蛇毒 公用 纸 上 电 泳 及 Antiweiler AHL, GSMS BH
蛋白 质 , 有 少量 酸性 蛋白 质 , 其 中 中 华 眼 镭 蛇 毒 合 七 种 主要 蛋白 质 , 金 双 蛇毒 含 三 种 主要
蛋白 质 ， 眼 偿 王 蛇毒 含 七 种 主要 蛋白 质 ， 纸 上 电泳 与 Antiweiler 自由 电泳 粘 果 大 同 小 }
Ho is
Pe i teen ee
作用 的 研 完
aq AMADA BRULEE
《 RBA GMCS)
“已 知 皮质 本 能 促进 肝 中 糖 元 的 储存 和 谷 - 丙 转 氨基 酶 的 活性 以 及 尿 中 氨 排 出 量 的 增
多 。 可 是 , 这 些 效应 间 如 何 相互 联系 倚 须 进一步 研究 。 篇 此 , 我 们 企图 探讨 在 一 定 人 条件
FE KARE RAO, Fhe PREIS ER, ABCA
萄 糖 对 以 上 效应 的 影响 。
我 们 选用 同 种 雄性 大 白鼠 60 只 ,分 雨 批 进行 实验 。 第 一 批 ,用 体重 80 一 120 克 的 动
20 A, BHM: B—-—M, AER— AK TEM ME 1 EFF (0.5 ak 5 mg), i
UGK: 第 三 组 ,不 注射 皮质 醇 , 禁 食 48 小 时 ; SOO AL, PET A OK CE BOE, HES
照 。 用 Tonhazy 等 氏 法 测定 肝 中 谷 -两 转 氨 基 酶 活性 , 开 氏 法 测定 肚 蛋 白 氮 ，Kemp 等
氏 法 测定 肝 糖 元 。 称 量 体 重 、 肝 重 、 肝 中 水 分 。 上 比较 它 们 的 差 屋 。 第 二 批 , 用 体重 140 一
180 克 的 动物 40 只 ,平分 四 组 。 各 租 均 在 空腹 4 小 时 德 ,进行 以 下 实验 : 第 一 租 ,一 坎 由
皮下 注射 皮质 醇 1 毫升 (5mg), MBA 24 小 时 ;第 二 组 ,注射 生理 鼎 水 1 音 升 , 品 服 衔
萄 糖 狗 10 克 ; 第 三 组 ,注射 皮质 醇 毫升 (5 me), 再 口服 衔 萄 糖 狗 10 克 ; 第 四 硼 , 注 射 生
PRB 1 FET EZ 24 小 时 ,作坊 对 照 。 测 定 上 列 指标 及 尿 中 氮 排 出 量 。
第 一 批 实验 结果;
一 68 一
|
表 ERRAPRAG ROE IR IPAS BA oR
TRAE fe new
新 鲜 肝 重 “| gm | 水 om | RaW
(%) (%) =| (%).
Ee Se ee S| | (See 一 一 一 一 一 一 一 一
72.3 19.0 0.52
70.8 48.8
#2 ENR ARM RRAG RITE
谷 -两 转 氨 基 酶 活性 与 对 照 动物 比较
人 moles 丙酮 酸 / 小 时 /mg BA SHE m moles 丙酮 酸 / 小 时
732 + 133 111.0 + 16.0
(5mgxg) 978 士 300， 48.0 士 36.7
人 713 士 378 94.5 +35.9
s a 476 + 163 52.8 + 15.6
“WHHL, 表 2 可 见 : (一 ) KAREK AANA, SX, 体重 减轻 。
肝 重 、 HEREC tet BF 中 谷 - 丙 转 氨基 酶 活性 均 有 题 著 坪 加。 EKO KEM RAS 0.5 这
ROX, 谷 -两 转 氨 基 酶 活性 也 有 一 定 程 度 的 增加 。 (二 ) BK 48 小 时 ， No
RACER, (AEB RR KS . oa
SACI: | y
HS 注射 皮质 醇 口 服 癣 萄 糖 及 二 者 站 用 和 后 大 白鼠 ya
FF FRAT i Bae
ig De | Rates |e a mm | 地精 册 激素 “| me a8 小 办 2
mr mL 6.44 + 0.86 6.01 + 0.96 7.64+0.80 | 4.84062 . ft
(gm) ， (10) (9) - (10) (11y" amy
RAR 32.10 + 5.00 27.70 + 3.51 26.09 -+ 3.75 34.04 + 2.67 a
(mg/gm 鲜 肝 ) (7) (9) (8) (11) a
DEAR 167.0. + 29.2 180.0 + 28.0 169.9 + 29.2 198.1 + 33.4 (a
(mg) (102) (7) (9) (8) ie
肝 焊 元 0.51 + 0.43 0.70 + 0.36 1.40 + 0.58 0.07 + 0.05 ;
(%) (9) (9) (6) (11) }
一 69 一 党
°c 4 注射 皮质 耳 、 口 服 痪 区 贸 及 二 者 蓝 用 生 对 大 白鼠 肝 中
9 ，” 谷 - 丙 炉 氨基 酶 活性 及 尿 中 氨 排 出 量 的 影响
| 些 腹 注射 激素 | 吃 ay Wom | 吃 糖 注射 激素 | mos hap
一 | 一 一 一 一 | OE
* sf /moles RRR /7} BE 870 + 207 509 + 171 892 + 266 626 + 93.7
ce /mg ZAK (8) (9) (8) (11)
fasy — | so fl -
1% 全 HE 144.6 + 15.3 83.4 + 32.6 170.2 + 51.9 104.5 + 23.9
性 | mmoles PmaBR |b RE (10) (9) (8) CC
尿 氮 排出 量 152 + 35.5 75.4 + 20.1 143 + 22.2 107 +17.2
(mg N /24 Be) (多 (9) (7) (4) ©
at: 1. MRA 2. 括 弧 内 指 动物 数
。 、 由 表 3、 表 4 可 见 : (一 ) 一 欢 注射 皮质 醇 5 毫克 后， 肝 重 、 BPE BE eb ST
RAS EIA BE Hs ep RE EE. PR RS A ae
(AB HUR GAA, 肝 重 及 肝 糖 元 合 量 显著 增加 。 尿 中 氮 排 量 明 是 减少。 肝 中 谷 -
丙 转 氨基 酶 活性 也 有 不 同 程度 的 下 降 。 (三 ) 大 白鼠 注射 皮质 醇 沙 饲 以 葡萄 糖 合 , 肝 重 及 ，
肝 糖 元 含量 . 肝 中 谷 - 丙 转 氨基 酶 活性 及 尿 中 氨 排 量 均 有 显著 增加 。 但 熏 仅 仅 注 射 皮质 醇
组 比 较 ， PSPUAE Bk SH tS A De 而 肝 重 及 肝 糖 元 草
增加 得 更 题 著 。，
粮 的 和 结果 指出 : 皮质 本 能 引起 大 白鼠 硒 重 减 轻 fig: wae JPRS
RRA EI. MARRERO, RAPE RZD, Pee
GREEN AA EE PM. BART COIS EMER ADR RAE
BAL ALGAE SY J a OS OO RA A Bi Ae De PR RE IP A ，
AR BE TN TAMIR. FORA. Ut, SIAR REVERS ROE IF
PTC GIA, HEN AO RSS ERS ALF
RSE BEAL FY STA BURNIE AE HEATER TRE AES PR
'
: £RSEXE
[1] Engel, F. L.: Endocrinology, 49, 171, 1949,
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eh
ROPE AF se LW EA
ei a ema Lea
47ers WE Tie
(ASEM RS STI MCR, ACH)
-%
=
’
大 忌 肝 内 色 氨 酸 吡咯 酶 (TP) 可 因 注 射 底 物 ( 色 氨 酿 ) TREE. 但 在 肝癌 组织 (如
Novikoft 肝癌 ) PRISM ARE. Fiala 和 Fiala” 首先 观察 到 在 3- 甲 基 -2,4-
一 甲 基 氨基 偶 氮 茶 (3' MeDAB) 诱发 肝癌 早期 ，TP 的 诱导 即 受到 抑制 。 FEATURE
Fah AMS Fiala 等 相似 的 报导 。 但 是 对 於 和 过 些 影 都 的 机 制 则 很 少 研究 。
ARS ABUSE 3’ MeDAB HR TALS, TP lee? (YEA DL-
AM, 1EH/KHRH, GH 5 小 时 ) BUEN TAREE, 在 个 别 动物 的 肝癌 中 关乎 完全 消
Kia Chan SO Scr RRR. FE 3 MeDAB 引 瘤 过 程 中 ,如 咀 3 MeDAB ©
ISK, 38K, WK TP HESS TASK. we Fiala 和 Fiala”,
Kizer™ eR, SEEEST 3’ MeDAB 24 小 时 也 引起 TP RDS Me
ORE LB, TPS BI FERGIE 0 SPH De ASE, 3’ MeDAB RAM EDS
ETP 的 作用 。，
{HESS TENS: ER ot SME BRR A WE OE, FH hy, 2MeDAB, 都 具有 与
3°MeDAB 相似 的 作用 。 看 来 3’ MeDAB BRE Ky FB TP HARARE
的。 但 是 考虑 到 2 MeDAB ARES AIS HBR GREE) OVS Te
JEN 2MeDAB 而 恢复 ,而 3’ MeDAB 的 影 兆 则 不 能 恢复 ,因此 ,2MeDAB 和 与 3"MeDAB
HERR AS TP 的 底 物 诱 半 有 相似 的 影响 ,但 二 者 的 机 制 可 能 不 同 。
TP EEE PMOL, GORE TP 活性 。 当 喂 过 3' MeDAB HAR
有 条 胞 上 清 液 与 对 照 组 大 鼠 肝 炎 胞 上 清 液 以 不 同比 例 混 合 和 后， 所 测 得 的 TP 活性 与 二 者
”单独 的 活性 之 和 相同 ,说 明 3' MeDAB 没有 因 底 物 诱导 而 产生 任何 抑制 物 或 激活 物 。 同
#8 2MeDAB 粗 的 结果 也 是 如 此 。
TP 活性 需要 辅助 因子 (hemin 类 物质 ) HAH. Fiegelson 等 由 AGAR A
“Boe bis TP 活性 的 作用 。 因 此 我 们 进行 了 微粒 体 和 与 上 清 液 的 加 合 实验 , 烙 果 发 现 :
(1) 3’ MeDAB 和 组 大 鼠 肝 微粒 体 激活 上 清 液 TP PEAR RMS, MAR
”微粒 体 的 激 医 因子 的 结构 (吸收 光 谐 ) 无 影 汐 。 在 相同 人 条件 下 ，2 MeDAB 粗 的 微粒 体 则
与 对 照 组 的 相似 。
(2) GALE Awe 3 MeDAB 组 上 清 被 (未 诱 遵 的 ) TP 活性 的 作用 与 对 苹 激 活
对 照 租 上 清 液 TP 活性 的 作用 相似 , 说 明 3' MeDAB SR TP AF OLN EM TE
2MeDAB JF Ett. .
(3) 3’ MeDAB HiilKMBS TP 的 作用 , 可 能 是 主要 由 於 3’ MeDAB 抑制 TP
。 *# 现在 通 训 处 : 西安 侣 学院 生化 敌 研 组 。
一 7] 一
. 4 : a J x 4 a
" Pam te f ee as ed nee a's Ss ower?
en a ee ee ee, Se ©, Pee a ne ee ee
7 Ase
ee er tee
EAM OA RIK TP RAW Mik, ASM ABA, LK TP 活性 只 是 略 有
增加 。2 MeDAB HERWAE TP wy ML PRIS, 1 AO, ET TPE
HIE. BI] 2MeDAB 的 作用 ， PO EAS Eh ALT TP 的 激活 , RE
抑制 TP 蛋白 的 诱 半生 成 。
此 外 ，Greengard 等 加 a er ee ee TP Oe
活 , 而 不 是 由 於 TP 蛋白 的 证 半生 成 。 本 试验 进一步 菩 明 3’ MeDAB BRE RARE Ni 上
的 议 半 无 明显 抑制 作用 ,但 2MeDAB 仍然 有 明显 的 抑制 作用 。
以 上 和 结果 说 明 3 MeDAB 与 2 MeDAB WARM EAR TP a +
的 机 制 ， 而 3’MeDAB # 可 能 对 做 抑制 Ko ES eh PERLE COS SARE TA UE oe
用 有 关 。
| £ESExe ee “4 \ :
[1] Fiala, S. and Fiala, A. E.:. Brit. J. Bancer 13, 286, (1959). Pe
[2] Chan, §, K., McCay, T. A. Ne Kizer, D. E.: Cancer. Res. 20, 1303, (1960).
[3] Kizer, D. E.:. J, Natl. Cancer. Inst. 27, 1508, (1961).
[4] Feigelson, P. and Greengard, O.: J. Biol. Chem. 236, 153, (1961).
[5] Ibid. 236, 158, (1961). Pt
EEN
田 aS
《中 国 科 学 院 微生物 研究 所 , PRBS Bete Dora iM ©, At)
MABE T HE (Nicotiana tabacum L.) BY IER PERI (TMV)
ALG SSE X (PVX) SRM. RRR yee
PSG HELGE PF, SHAE BE AeA By EAD HG HR — 6 0 OE OI TO
MB, RMSE Mi DNA, RNA Sie. oye
(一 ) 寄主 呼吸 代谢 过 程 与 TMV 增殖 的 关 傈 :将 接种 TMV REE
共 某 些 呼吸 抑制 剂 和 中 间 产 物 的 溶液 中 ， 另 个 革 洋 於 相应 的 溶剂 中 作乱 对照; Ne. 调
glutinosa 上 形 成 的 斑点 数 测定 病毒 省 度 ， 得 到 下 列 结 果 :
磺 代 乙 酸 (LAA) 和 NaF 在 有 氧 休 件 下 抑制 病毒 的 合成 到 对 照 的 51.1% A 59. 0%.
在 氮 氛 (Fr 2% by On) HHI 22.2% Fn 56.6%. NaF 在 pH7 时 表现 出 最 高 的 抑制 能 “
力 , IAA 在 pH 5 时 的 抑制 作用 最 大 。 经 抑制 剂 处 理 过 的 革 片 如 用 水 冲洗 后 放 在 燕 刹 水
内 , 则 病毒 省 度 双 恢复 到 对 照 水 平 。 可 见 过 是 一 可 逆 的 抑制 作用 。 此 抑制 作用 还 可 完 人 至
破 丙 酮 酸 所 恢复 ,单独 用 丙酮 酸 处 理 的 病毒 江 度 需 对 照 的 133.1% ,与 IAA 和 NaF 同时
BL oe ee ee |
a 1D me
% REN A-195- 144.3% 172.8%.
FEAF PHEAN Krebs pg aR ILA A oF — ASAI HA Ay & ELM
148.7% 和 129.6% . HEAL, MERA HEI RAO EA ANE HS A H
， B159.8% . SA — MAF BRAGA. SL FP A R99 9%,
4 A LR 84.6% 9 eo
_ 在 未 端 氧化 抑制 齐 中 KCN 的 抑制 作用 最 题 著 ， 降低 病毒 澳 度 到 对 有 昭 的 42. 1% ,NaNs
DL LALA, TMV ty 2 SUE BE CHR eh SA ARE JL TAB Be
RESEND AL.0 + PE BER IE A CON ISR, TA
。 端 氧化 所 产生 的 高 能 磷酸 键 则 是 病毒 合成 的 能 源 。 在 我 们 的 试验 条 件 下 磷酸 丙 糖 、 丙 醋
AR SE SRR AN x- 酮 友 二 酸 以 及 未 端 氧化 的 氧化 磷酸 化 对 病毒 合成 是 特别 重要 的 步 辜 。 a
-—s (=) TMV 侵 染 对 寄主 葡萄 糖 栈 解 与 成 糖 确 酸 途 径 的 影响 :， 将 接种 TMV eR )
a HH (直径 10 mm) 培养 在 Hoagland 氏 培 养 液 中 , 礁 接 种 后 不 同时 间 放 大 Warburg | ee
RETR (AEH 20 片 ) 加 入 3 毫升 含 9 IE ATATBE-1-C™* we AUATHE-1-6-C™ Wy OM
x Dials 在 28°C BRB THRE 2 MF, CO. 用 KOH snk 然后 计数 cnaos 服 秆 / t
5 分 。
SE 在 接种 后 第 6, : “105% SRO Heh 1.7
4 180.8 100.0 Ye Set’ i /
q (ness age 0.88, 0.69, 0.41 ,0.17 (FO oars) 0.41, a TMV SBN, 分 别
7 235.7 150.0 二 oe
222 at a =): 1.27,1.04,0.53,0.44 Coa >): 0.38, 二 种 差别 从 接种 后 第 - 天 就 表现 出 $s
AR, TMV SHAG 187% ,第 八 天 差别 最 大 过 对 照 的 258 狼 ,第 十 天 反 较 对 昭和 梢 低 。 病 毒
te (N. glutinosa 2EIE LZR BE EAB) 接种 和 后 各 天 分 别 篇 11.0. 44.0 69.8. 106.2. 83.8_. —
69.4, SERRE LAL AS ESS 4, 6, 8 BERRA, HP DE Ra KBE,
TMV 感染 和 后 友 精 磷酸 途径 增加 的 最 高 举 在 病毒 最 大 量 之 后 ， 因此 其 增加 与 TMV-RNA
”合成 的 关 傈 人 向 待 进 一 步 研究 。
. (=) 病毒 侵 染 对 寄主 核酸 含量 的 影响 : 。 试验 测定 了 威 染 TMV 和 PVX EA
_ DNA, RNA @ ik 84. DNA 及 RNA # Ogur “ (1952) 和 Holden (1952) 的
PERE. HME HSA RNA 和 DNA 的 分 析 说 明 获 草 接 TMV ,和 PVA BB ”
RAAT, HE AR HE DNA 含量 的 增加 ,接种 后 第 一 天 就 开 oe
EF, EHIME. TMV WEB HRA 130%; PVX HAs 120% , KAP 1
SRS KA, HE RNA SRF, 至 第 七 天 过 最 高 衬 ,TMV She
250%; PVX 3% 160%, 过 箱 先 后 增加 的 关 傈 似乎 说 明 病毒 RNA 的 合成 依 顿 於 寄主 外
“ 胞 中 DNA 的 某 种 公 化 作 篱 先 半 。 病 毒 的 血清 满 度 及 侵 染 力 的 增加 不 完全 与 RNA 的 增
长 相符 合 。 eS
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”来 国内 更 普 欢 应 用 族 菌 食品 生产 。
AUREUS 0.5 ml 6 mM, 其 他 矶 源 旭 按 王 萄 糖 等 矶 量 计算 ,对 共 目 前 舍 不 能 确 知 其 分 子
量 者 如 肝 糖 等 ,其 用 量 旭 与 葡萄 糖 同 。
82, KK 1000cc., pH 5 一 5.3 苗 种 以 拘 床 振 温 培养 28°C, 17—19 小 时 收获 ,用 生理
白地 微 (Geotrichum Candidum)
对 各 种 碳 源 的 氧化 作用
， 简 浩 然 “ 丁 过 明 ” 便 和 要 添 卓 中 其
《中 国 科学 院 武江 微生物 WA) Mo
£3 (8 ASE 5- t AAA Im, 近年
本 工作 的 目的 在 艾 提 供 生产 实践 以 一 定 的 生物 学 依据 ， 站 对 访 苗 矶 源 代谢 的 特点 作 名
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初步 的 探讨 。 ie” : 1 4 Aig mer
— 5 & a
ALARA REE RL EE | BRAS APES. A
“” 使 用 菌 种 篇 白地 徽 410 株 (Getrichum Candidum 410) 菌 种 培养 基 含 下列 成 分 :
(NH,)2SO, 1.56g，MgSO 0.5g, KH,PO, 1g, KCl 0.52, FeSO, 0.01g, 葡萄 精
BPC ET Yes CBRE DEH XK Bie i » REBELS Be BRE A. AN RRRK, 冰箱 4°C 保存 a
ffi Fi : oi : *
sea sea i SOREBS BES 2 Eo
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实验 车 果
测定 了 白地 微 氧化 四 十 五 种 碳 源 时 的 氧 摄取 量 ,得 出 加 碳 源 后 两 小 时 的 平均 Qo, 六 a
WH Qo, 2 5 BR LH 5% 8 AE I RES AS A SH Se A SE :
利用 其 中 的 27 种 , 另 18 MABE, EMRE:
Die
DHA
| Deane
也 - 阿 伯 糖
。 工 -阿拉 伯 糖 |
| 工 (十 )- 电 李 糖 | 5.
eile Bi
Cette | 4.
1) 11.22
17.64
14.61
15.29
| 18.10
15.69
1 十 十 二 十 十 -十 1
12.69
16.38
.68 | 19.17
| 8.78
10.94
12.85
11.63
7.40
7.87
十 十 二 ts
ee Ee ee BE ae
实验 结果 指出 ， 就 实验 所 用 材料 范 罗
“. 糖 外 , 均 不 能 利用 ， 而 单 已 糖 均 能 利用 。 戊 糖 情况 比较 特殊 , 四 种 微小 差 导 的 黑 构 物 中 ，
— «LR D- 阿拉 伯 糖 均 不 能 利用 ， 唯 木 糖 作用 题 著 。 D- 和 工 - 型 的 各 种 氨基 酸 也 有 一 定
Ro
eco 能 用 否 ”
一 -一 -一 | 一 一 一 | 一 一 | | | 一 -一 -一 | 一 | 一 一 一 一 一 | -一 | 一 一 一
10.93
24.65 |
11.48 i
100.5
99.7
102.0
167.2
100.5
(174.5 ©
102.9
107.7
187.76
162.83
113.42
110.51
214.65 ，
212.9
254.1
114.25
148.51
142.12
112.53
101.27
96.2 ， 一
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内 , EAE — ASEAN A — AL MEE
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. (RABE) ， | ; 和
La ‘
DESO mereoermaien yng
DOD ARE GND ELE AM he Eo, Pa
等 。 但 对 植物 种 子 蛋白 酶 的 研究 在 文献 上 却 报 潮 不 多 ,我 们 从 构 豆 箱子 中 提取 了 蛋白 酶 ，
SESE IE T BOAR, AA HERERO RL EE ae Meer 4
SAF REE KAO LRT EER SEER a
HP DECAY, FUDD RD, 用 含有 2 多 NaCl 的 01M ‘pT maneens 4
液 抽 提 , PRR FAD, VSAM BEL ee ULE BR 85 A,
MARS BO, Bite pH 284.5, TA MRM PH TE5.25)65 2 ，
BH, Ku 值 篇 0.03 M。 酶 活力 对 热 较 称 定 ,在 作用 时 间 20 5}-E PS HT ES GBSCo
磺 代 乙酰 胺 (10-? MT) ,后 胱 氨 酸 (10-* M) ,和 卫 DTA (10-* M) SEH MCW p
iB ES 10~* M 的 DFP 能 抑制 酶 活力 40%, BR RRS 107M, IMMA Z—
RAED. LAS RET SHELA
2G, REINA RO DFP 敏感 的 一 些 蛋白 酶 。 a
) FARR B Bb, Merk ee Ee DNP 化 后 先后 用 乙 醋 和 乙酸 乙 酯 抽 提 ， mo
RA RUBE, BRYA LEAL ARYA EEA DNP Bik, 将 此 三 部 分 的 肽 用 5.7 N BREE 105°C 下
水 解 24 小 时 ,然后 分 别 用 Sanger 的 DNP 未 端 技 术 检查 V Ae wa REIE, EBA RE 豆 蛋白 酶
SALW RAM, DOLE ASE RAH, ERE AIR — IES ACE AS A $
MARR ARU RAR AMZ HBR. zr
Fie ELE RE ER EEE BO. Ob PH a Kao}
fy CAME RS EE RE Hp > TREE LO DK 值 篇 4.2, 因而 推测 酶 蛋白 ‘AE THAI
RI Ros EM |
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工 BR ARIE DEI HK A SECO TUK AR
Zs ak 徐 杰 诚 BES BE Wl Be
。 《中国 科 学 院 有 机 化 学 研究 所 , 上 海 )
eet - 谷 氨 酰 - 谷 氨 酰胺 (IT) NE IE EE
a “OEE RTAE Hy SA TX SR Lew AT. 五 肽 II 是 由 VI 与 y- 甲 酯 - 谷 氨 酰 -
， 谷 氨 酰 胺 酰 肘 基 甲酸 叔 丁 酯 (XI) 经 混合 酸 本 法 合成 的 。 五 肽 III 则 傈 用 活化 酷 法 由 谷
“ 氨 酰 胺 甲 酯 的 氮 端 Ms SUMS N- 保 护 氨 基 酸 对 确 基 葵 酯 熔 合 、 延 伸 而 得 。
” ， 在 用 混合 酸 酥 法 合成 五 肽 工 中 ,从 反应 混合 物 分 见得 N- 革 氧 狭 基 廿 氨 酰 - 翼 亮 氨 酰 -
«D-RAM (XXII)。 由 和 XII MIX 合成 了 五 肽 工 的 立体 边 构 体 ，N- 革 氧 狭 基 甘 氨 酰 -
。 轴 亮 氨 酰 -也 - 季 氨 酰 -y- 甲 酯 - 谷 氨 酰 - 谷 氨 酰 腕 (XXII)
Ba N- 共 氧 狂 基 -7Y- 甲 酯 - - 谷 氮 酰 - 谷 氨 酰胺 酰 肘 基 甲酸 叔 械 酯 CX) SHR IE BE Ly
RMT, FRE BL S-*EIE-+F ER BE-S- EF MA A N-“ RABE y-
; 。 酯 - 谷 氨 酰 - 谷 氨 酰胺 酰 -S- 共 基 - 牛 胱 胺 酰 -S- 芋 基 - 牛 胱 氨 酸 (四 肽 XXV)。
HAR LIL I, 四 肽 XXV 及 其 主要 的 合成 中 间 肽 的 光学 纯度 均 经 亮 氨 酸 肽 酶 、 胰
。 装 肽 酶 法 或 旋光 法 检定 。 在 五 肽 的 酶 水 解 的 DH SE TA IR A ie
人 - 净 酸 -(2) ,致使 过 些 氨基 酸 的 测定 值 偏 低 。
* 中 国 科学 院 生 物化 学 研究 所 研究 实 轰 员 。
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IHS T = REE A LET REA Meroe a
RP -S -S EEP OLT OR (II) 和 N-ARIE MESLTE
ERLE PRG CIID) 五 肽 工 是 由 初次 合成 的 NESE ARB Bate
| FERGAL (VI) 奥 yA ENR (TX 5G TR ER VE
oe -—— _ ~~ ea ae oo eH et OR NS | eye fee ay ge eee Be 2 a
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| (中 国 科学 院 有 机 化 学 研究 所 , 上 海 ) em ge oh
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胶 酰 - 亮 氨 酰 -y- 甲 酯 - 谷 氨 酰 -天 冬 酰 - 酷 馆 酰 -S- 革 基 牛 胱 氨 酰 -天 冬 栈 胺 甲 酯 ) 的 合成 。
I fag N- 革 氧 狭 基 亮 氨 酰 - 酷 氨 酰 - 谷 氨 酰胺 酰 - 亮 氨 酸 (四 肽 II) 和 由 N- 革 所 多 基 -Y-
E- 谷 氨 酰 -天 冬 酰 胺 酰 - 酷 氨 酰 -S- 革 基 守 胱 氨 酰 -天 冬 酰 胺 甲 酯 (五 肽 IIT) 胶 N- 保 护
cae 自由 的 五 肽 (IIIa ) RAR AARNE A TG eo 四 肽 II AH. ok TII 都 分 别 由 二
“种 不 同方 法 合成 的 。 多 肽 工 II 和 III BR ARIA ARI rdesdicaiishd cana |
SOR DAME) 7KARAT RED ER AUPE, 均一 的 工 - 型 。
”在 含 50% by =P SERRE = IER IE) HA REN
AAG PUB TL SUL 5K AS FEN IER ‘Sioa
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** SPALL: 中 国 科 学 院 生物 化 学 研究 所 。
二
“ 基 哲 胱 氨 酰 -S- 苹 基 牛 胱 氨 酰 一 一
- ~Z BERR BRK (1) [Cbz.Cys(SBz) Gys(SBs) . Ala-Ser-Val-Cys(SBz)-Ser(OAC)
OMe] 和 N-ALI-S—EIL-F EA ME-S-EIEF MA-ES
«EPR RH (II) [Cbz- Cys (SBz)-Cys (SBz)-Ala-Ser- Val-Cys (SBz)-Ser.
| NHNE,] 的 合成
_ 冰 醋酸 溶液 中 进行 催化 氢化 形成 二 肽 VI (H+ Ala-Ser-OMe) ayAii@@i, III s2 VI Fae
| SHEA SOTA Vo IV 淘 省 化 所 醋酸 溶液 处 理 觅 去 -保护 基 的 同时 发 生 了 0- 乙
“ 酰 化 而 得 三 肽 VI 的 O- 乙 酰 衍生 物 VII [H-Ala-Ser(OAC)-OMe], III #2 VII 通过 碳
Kk 的 研 Fu
“TIL 后 胰 岛 素 A ‘Bish BOR MEAL I Lk
(N-AEMBRAE—SAIE-L ZPD IBE-S— ，
PSA LTA A -LR
We R SA IE—SYIE— LPL
RABID) 的 合成
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ae) RARE ASC ARH” fp AE
(中 国 科学 院 有 机 化 学 研究 所, 上海 )
N-" BA GRAE-S—“
S-"2E-F DR BE-O
ACRE T PRES A Sieh Lm L- 3-H (Ag-1a) *
0 FAB 4085 — fk III [Cbz-Cys(SBz)-Cys(SBz)- ‘OH] fa Bp — HIV (Chz- Ala-
Ser-OMe) 作 合 成 四 肽 [Cbz-Cys(SBz)-Cys(SBz)- Ala- Ser-OMe] 的 原料 。 IV 在
— Fae AS IV 的 O- 乙 酰 衍生 物 VIII [Cbz.Cys(SBz).Cys(SBz).Ala.Ser(OAC)
OMe], V ak VITI se Bt mre ANS 25 el — EAS PS BABE (IX)[Cbz.Cys(SBz).Cys(SBz)，
_ Ala-Ser-NHNH,]. |
Bur 2 4 TAFE ZB YA SCRA IV 的 NBIC LAGE VI 而 得 二 肽 内 酰胺
~ (X) (3-H FE-6-FEHP H-2, 5-— SIC).
从 N- 革 氧 狂 基 - 工 - 燃 氨 酸 和 S-EIL-L-FA MARE BR OBE ARIE AE
fk XI [Cbz-Val-Cys(SBz)OH], XI 与 秋 氨 酸 甲 酯 径 矶 二 亚 胺 作用 籍 合成 三 肽 XII
_ [Cbz- Val-Cys(SBz)-Ser-OMe],
XII 经 省 化 氢 醋 酸 处 理 得 产物 XIII [H- -Val-Cys(SBz)-Ser(OAC)-OMe], XIII
AR ARR A TL a HAE BE TX tna acd doehidbna mussina I。 七 肽 酯 SLR ES
”七 肽 酰 肝 IT.
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7 人 a ue; 4 Tr. ik r ? ’ rae ee, ee ‘
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| i XI, =f XII, MA V, VII 和 IX REMI ANI eel
“fai 1, V, VIII, XI 和 XII FeMEB Es N- 保 访 基 进行 狐 层 析 ， edie
一 的 肽 。 三 肽 XII Anya ik VIII 用 省 化 氨 - 二 氧 大 图 腕 去 N- 保 访 基 轻 氨 肽 酶 酶 水 解 及 租 “
琶 成 氨基 酸 分 析 冲 明 傈 光学 纯 工 - 型 。 Pak V AEM N-F BRIAR, Fie
ARIK ARRAN AT RENIN RICE AL LB, RADU RA ARABAE CS 50%
1 ， 四 基 亚 硕 的 绥 衙 臣 中 进行 。 Lik RAK, 测定 其 组 成 氨基 酸 的 分 子 比 需 Cyzsy 六
A/ai。 Vals Serse。 由 於 工 傈 由 四 肽 酰 肋 IX 经 盟 氮 化物 法 与 XIII Heth we, Aa
霄 产生 消 旋 ,因此 七 肽 I 及 II BARE BAH L- 型 。
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itm sities a E
胰岛 素 B BE Nk BE A
V. BS BR C- 端 十 肽 衍生 物 的 合成
及 其 降解 的 研究
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(中 国 科学 院 生物 化 学 研究 所 ,上海 ) 一
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RES
_ 本岛 素 卫 鲁 中 C-$iit- ike 74 , BD Chz- (y-OCHs)glu-(N°-NO,)arg-gly- phe-
phe: tyr-thr-pro-(€-TOS)lys-ala- OCH,(Bz1-s0) [熔点 187—189°, [a]??=—30.5°+
—-1.0°(C,, DMF), [a]y’=—81. 0+ 1.0°(C,, kw) I] — U Chz- (y-OCHs)glu- -(N®-NO,).
-arg-OH(Bzj-29,) ABA 120—122°, [a]?=—6.5°+1.0° (C,,CH,OH)] 4 H-gly-phe-
- phe-tyr-thr-pro- -(€-TOS)lys-ala-OCH;(Bzs-s0) RIBAK DMF hee.
BS 其 中 Bi-ao 由 Cbz-gly-phe-phe-tyr-thr-pro- (€-TOS)lys-ala-OCHs” pov.
上 而 得 ， ; 傈 由 Chz-(y-OCH;)glu:-ONP 和 确 基 精 氨 酸 其 合 而 成 。 也 si-so 经 皂 化 所 ， 了 ae
”得 的 保 访 的 十 肽 , Chz.glu.(Ne-NO,) arg-gly- ‘phe-phe-tyr-thr-pro-(€-TOS) ys 4
ala.0 也 (Ba -ao) ,[ 炊 点 186—190°, [a] = —81.0° + 1.0°(C,, DRENAR)] HEAT PERRET
: a: Reva, Ti 2S ESB Ha STS A PE Be HH Ct 0 SL, SB NERA AB (Baton)
或 胰岛 素 B 链 径 同样 处 理 所 得 的 粘 果 相 符 。Bs_。 经 较 长 时 间 的 催化 氧化 可 以 觅 除 玉 二
OY, > HE ARRIEAN Ne- 的 确 基 , 但 所 释放 出 的 o- 氨 基 很 容易 和 y— HR RE A ,形成 四 氢 吡 咯 柄 4
ALAA, Me EAH 045°) CA ETEK AEE q
有 a - jikii#, H-(y-OCH;) glu-arg-gly-phe-phe-tyr-thr-pro- ¢€-TOS) lys-ala-OCHg, sass =
，， 代 之 以 大 量 的 划 三 酮 除 性 和 坂 口 反 应 阳性 的 斑点 。 BULA TIZARD EI
© 化 。 另 一 方面 ,在 同样 条 件 下 将 Ba-so HEAT EAC LACIE, HHS yO EL EE, TARA
似 的 环 化 产 肠 而 获得 Ne- 对 甲苯 磺 酰 化 的 自由 十 肽 。Bs_s REGUL AG KREMER
时 间 态 理 和 后 划 三 酮 反应 很 明显 ,该 物 经 氨 肽 酶 消化 也 可 释放 出 谷 氨 酸 y- 甲 酯 、 确 基 精 所 了
酸 以 及 其 他 和 成 氨基 酸 或 其 衍生 物 。 因 而 可 以 初步 表 定 十 肽 的 Ne IERIE RE IE
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RENE AR, EATRR MA AA RRL Ce MARR Aceh eT RET RG We, OREO ME
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FEAT WIZE LIRR TIARA, ASP c- 氨 基 已 否 环 化 ， 均 能 科 且 蛋白酶 水 解 ‘s
BAKA, BAPE MT. BEAM AMA HA SMB (Ba
a aaa) BA BE (Bas-20, Bas—soa) 经 催化 氢化 后 所 得 的 相当 衍生 物 ， 不 论 从 电泳 或 层 析 行 WE
— ERAULMMBE RE. HB he. -(y-OCH,)glu- -(N°-NO,)arg-OH FMR
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， 。 肽 酶 完 公 消 化 , AKO ICE ERT AE, PUR kM SES, 因此 肯定 了 i a
4 Hk ER 6 3) an
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[1] ee ee Te Tae Ts RAS Be PABA I, Se EA an te ‘Ne
CBRE BARRA MHA, LM PREMIER 1961 4,14, 85. a
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BEE 5 磺 酸 型 B 印 的 直 线 来 合作 用
ATH Wink Bee WRG 5
(中 国 科学 院 生物 化 单 研究 所 ,上海 x
— KAAS TEMA HR, RI ME TR
fo HPA MLE RRS REREAD. LRM ei
蛋 自 质 都 具有 直线 聚合 的 能 力 。 过 一 作用 的 重要 性 在 於 其 聚集 是 定向 的 。 蛋 白质 分 子 间 i
RERAASZMBR—-EMPREAH ,而 蛋白 质 的 许多 功能 都 与 这 种 和 结合 有 关 。 A
此 研究 直 团 聚合 作用 不 仅 对 了 解 生物 给 锥 的 形成 有 其 意义 ， 对 蛋白 质 分 子 间 力 的 本 质 及
蛋 自 质 条 微 构 型 等 都 能 提供 有 用 的 材料 。 ie x
Waugh ati DiS 0 HR A te NR EIR OE PA Ba. 其 聚合 过 程
DROS HEBD Rh, REBBIAER ROME. PORRMESE BDL SE-F I AER
PERISEAR Fe ST Rute AE RK | PAAR ES Se BGR, Leach 和 与 Scheraga sEeqEH
氧化 的 磺 酸 型 B 链 在 pH 3 时 有 聚集 体 存 在 ,但 没有 余 明 其 有 无 直线 聚合 作用 。 我 们 的
过 一 工作 说 明 S- 磺 酸 型 B Sk (以 下 简称 B 链 ) ATER HER, WRAL AER
一 自动 催化 过 程 。
=. WEN1%, pPHT—8 之 间 的 B SYS MERE Hh, 85°C 放置 一 天 和 后 礁 二 光 轴 相
HRM MIR CHR, 可 以 看 到 有 黑白 的 兹 煌 , 此 花 攻 逐渐 呈 具 彩色 。 时 间 稍
$e, YEAS ATS. MUCHA, , 即 形成 机 械 强度 良好 的 凝 腰 。
经 上 述 释 化 的 B SAFER IR AS eRe, 即 其 粘度 因 粘 度 计 二 端 所 加 的 压力 差 而
Bho, SGD SET SH HUE HEI GHA, 欠 很 低 的 速度 梯度 时 ,分 子 就 开始 定向 排列 , 当 速
— 8] 一
随时 间 而 增加 ,只 是 长 时 间 和 后 也 不 妊 成 凝 腰 。 pegs: “a 3
ss BRERA PH EARAAER Int. 8M 脲 中 的 解 聚 比 高 PH 的 解 聚 程度 高 ， sok
> ”也 不 能 到 单 体 的 水 平 。
BK, ) 到 小 , 轴 比 儿 大 。 过 些 粘 果 说 明天 然 B Bb AR AMES Te Ho
ELBE A a HE Ha Ly WG ETI FE poke
4, RRL ROL, A ATHE Te: Ee
不, 因此 了 链 有 可 能 是 胰岛 素 聚 合作 用 的 担负 者 。
ep rey 800 秒 -: 时 ,消光 角 即 开 姑 趋 放 常 数 。 sai B SE FAN AA 4
TAH SHAME, SETAE HY 50 A, ye
; 因此 B 链 的 上 壕 磷 化 傈 一 直线 聚合 作用 ,其 粘 果 生成 长 纵 蕉 。
=. B 链 的 聚合 速度 与 溶液 的 pH fi. METRE (4). B SHUR BE. 温度 以 及 某 些 机械 、
因素 有 关 。 我 们 研究 了 前 四 种 因素 的 影 闻 。 其 粘 果 说 明 ，B 链 的 省 度 增加 , 崩 子 强度 培
加 此 使 聚合 速度 增加 。 聚 合 速度 因 温度 之 升 高 而 增加 ,但 从 15°C FFB 25°C 时 其 到 化 较
大 ,而 255C 升 到 85sC 则 季 化 较 小 。 沙 液 在 pH 6 一 9 Zi, DH AMS, RAR 4
加 。 低 认 pH6 时 沉 泪 而 不 聚合 。 高 至 pH 9.0 时 , 当 /一 0.01 ,不 聚合 ; 风 =0.11， UR
Po LEBER AB We A SD a i EHF. S- 形 - seme,
eM hh MCA BSE, ZR ER AN, ASI ea UE. fe 7
线 的 S- 形 看 ,过 有 可 能 傈 一 自动 催化 过 程 。 将 少量 聚合 后 的 B SEM ARRR A Be
VU CHORE MME BREA LL. CEFR, ROR
FG BI AAT HY MEME, REE ES REE. ASE RK. seem
MMR. BRU, BT + ARMA. } ie
ESR BER IOR AR EE. PYRE ERS Baa HEI A, 由 更 2
BEC: 然后 是 过 些 核心 相互 连接 形成 长 稚 稚 。 直至 凝 爵 形 成 ， eel
#E. & ke
五 、 Povey tT Ee pH 10 pLERF, SOR ET BE, (EPR IEATIE sean
conga ee 测定 了 B gesngees —sete9, 和 结果 如 下 : ag Pies Yq
从 旋光 值 估计 ,应 有 20 多 的 螺旋 度 。 和 从 粘度 值得 轴 比 是 5。 在 8 Nip, 旋光 负 值
1%
OL RB BEE TR RH SE RIM, SOR RR AL
2. 从 p 瑟 影响 看 ,聚合 过 程 与 侧 键 带电 情况 有 天。 ER RR, eR
BMT ER LWT MOPED TATE MENA RUS. 江 腺 让
的 解 聚 说 明 过 二 种 键 的 存在 都 是 可 能 的 。 将 拆 开 硫 - 硫 键 的 试剂 加 入 B Seen, A
能 聚合 ,因此 B 链 的 京 合 因 硫 - 硫 键 交换 形成 多 状 粘 构 的 可 能 性 不 大 。
聚合 机 制 在 进一步 研究 中 。
7D & A Me 0 OOF
IV. 38 Pe) AURAL ICE
RE WARS
(中 国 科学 院 生物 化 学 研究 所 ; 上 海 )
碟 代 乙酸 , 砂 代 乙酰 胺 一 向 都 被 现 坊 是 典型 的 散 基 试剂 。Smith 等 也 全 根据 碘 代 乙
酰胺 半 森 瓜 蛋 白 酶 的 抑制 研究 了 甫 基 与 木瓜 蛋白 酶 作用 的 关 傈 。 但 是 近年 来 的 工作 指
出 , 夏 代 乙 酸 , 冲 代 乙酸 等 与 蛋白 质 便 链 基 团 的 作用 各 不 是 专 一 的 。 例 如 Barnard 等 研
沦 高 江上 度 省 代 乙 酸 对 核糖 核酸 酶 的 抑制 烙 果 指出 ， 省 代 乙 酸 於 不 同 pH 条 件 下 可 以 和 与 核
糖 核酸 酶 中 的 组 氨 酸 , 甲 硫 氨 酸 或 加 氨 酸 残 基 作用 ,生成 状 甲 基 衍 生物 。
我 们 在 前 文 报导 了 钥 氨 酸 及 色 氨 酸 是 木瓜 蛋白 酶 的 必需 基 团 。 进 一 步 研究 省 代 乙 酸
对 木瓜 蛋白 酶 的 抑制 作用 灶 果 指出 : HS DHS 及 后 胱 氨 酸 允 量 500 至 1000 倍 的 条 件 下 ，
微量 的 省 代 乙 酸 或 硕 代 乙 酸 对 木瓜 蛋白 酶 具有 强烈 的 抑制 作用 。 观 察 着 代 乙 酸 及 磺 代 乙
酸 对 林 压 蛋白 酶 抑制 的 当量 关 傈 , 按 每 克 分 子 木 瓜 蛋 白 酶 分 子 量 21,000 计算 , 0.5 克 分 子
省 代 乙酸 或 矿 代 乙酸 即 可 完全 抑制 。 同 时 从 测定 磺 风 子 的 酸 放量 看 来 磺 代 乙酰 胺 对 大 木
瓜 蛋 白 酶 的 抑制 当量 与 站 代 乙酸 相似 。
省 代 乙 酸 和 与 木 瓜 蛋 白 酶 作用 和 后 生成 的 沟 甲 基 木瓜 蛋白 酶 , 仍 可 精 晶 , 晶 形 与 未 瓜 蛋 白
酶 相同 。 BEAL CZAR BLK OE BBN PP ESR EI Dy SE SEK AAT ABER | AER
FPIHAREMRABATEE, BT RMAC EAA E OBE
傈 ,我 们 观察 了 尿素 对 溴 代 乙 酸 抑制 作用 的 影响 , 粘 果木 瓜 蛋 白 酶 在 DH 5, 6.2 尿素 深
ep SHE AP OF EE, SSI I 60 OS RHE. 在 同样 条 件 下 有 演 代 ，
乙酸 存在 时 ,60 分 猎 时 间 内 活力 降低 40 多 。 但 无 尿素 存在 时 ,在 上 述 人 条件 下 仅 10 598,
省 代 乙酸 对 木瓜 蛋白 酶 的 抑制 作用 即 过 完全 ， 襄 明 省 代 乙 酸 的 抑制 与 木瓜 蛋白 酶 的 空间
构 型 有 密切 关 傈 。 当 木 瓜 蛋 白 酶 处 在 活化 状态 时 省 代 乙 酸 才 能 作用 。 另外 底 物 工 - 白 氨
“酰胺 对 木瓜 蛋白 酶 受 省 代 乙 酸 的 抑制 具有 题 著 的 保护 作用 ， 过 些 都 襄 明 省 代 乙 酸 的 作用
ee Cae: RENKIN ERS Er eG
ME AMHR RAR.
BT ES MIR Res ES, RA 0.2 N 醋酸 溶液 1000 V 电泳 后 ,进行
龄 相 层 析 (〈 正 丁 醇 :吡啶 :60 多 乙醇 :水 =5:1:1:1) 分 析 和 组 成 氨基 酸 方法 ,比较 了 木瓜 蛋白
酶 和 羧 甲 基 木瓜 蛋白 酶 的 氨基 酸 图 谐 。 送 甲 基 木 瓜 蛋 白 酶 氨基 酸 组 成 中 在 SHOP SE
胱 氨 酸 位 置 无 苟 三 酮 题 色 斑点 , 过 样 就 排除 了 省 代 乙 酸 和 与 木瓜 蛋白 酶 芝 基 作用 的 可 能 性 。
但 浆 甲 基 木 瓜 蛋 白 酶 氨基 酸 圆 讲 中 在 门 冬 氨 酸 位 置 上 部 出 现 一 新 的 曹 三 酮 题 色 点 。 同 时
我 们 也 按 Gundlach 及 Stein 等 的 方法 使 省 代 乙 酸 与 核糖 核酸 酶 作用 ,以 同样 方法 比较
了 核糖 核酸 酶 和 产 甲 基 核糖 核酸 酶 的 氨基 酸 图 计 。 Ee em Ba
中 也 在 门 冬 氨 酸 位 置 上 部 出 现 一 个 新 的 草 三 酮 题 色 点 。 已 经 知道 核糖 核酸 酶 不 合 游 允 踪
由 基 , 站 日 根 据 Gundlach 等 氨基 酸 分 析 千 果 ,在 他 们 的 条 件 下 溴 代 乙酸 只 作用 基 硼 氨 酸 到
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乙酸 作用 A EE He
残 基 很 可 能 是 木瓜 蛋白 酶 活性 中 心 的 一 部 分 。
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(中 国 科学 院 生物 化 学 研究 所 , i)
了 全。 = see so ae <- | - . ” = = y ere = a Re
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MEBALRK™, 因此 关 明 如 此 紧密 桔 合 的 酶 肝 与 辅 基 连接 的 方式 将 是 十 分 重要 而
有 典 趣 的 问题 。 但 由 亦 材 料 的 缺乏 及 工作 本 身 的 困 诡 性 , 渤 今 需 止 ,文献 中 关 堆 过 方面 的
WMBRD. Singer” 等 人 便 提出 肽 链 可 能 是 经 酯 链 连 礁 辅 基 中 核糖 醇 的 OH 基 上 。
Kearney™ 全 从 牛 心 的 琥珀 酸 腕 氨 酶 分 出 舍 有 6,7 (HRA REI, IRI Re
fi N Ait, ATR SKE ELDER L. He Kearney 的 报告 出 现 以
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VOL AA A HM IE HEPAT SE Lk SS SA GH FL RL, 其 连接 点 可 能 是 在 屋 的 4
OC (PARSE Hi LER ES BRA) 0 |
本 工作 的 目的 是 在 和 进 一 2 PARI RENIN ATA RRS
和 组 成 及 排 烈 顺序。 实验 所 得 的 结果 如 下 。
(1) 办 咯 嗪 肽 的 分 购 与 肽 链 中 氨基 酸 和 组成 的 测定 :
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: 表 1 A® BR ik WW BE
和
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应 该 指出 , 肉 然 经 电泳 层 析 等 分 诅 , 但 在 未 烃 氧 化 前 所 得 到 的 机 咯 嗪 肽 中 仍 混 有 部 份
| 不 含 辅 基 的 肽 ,只 有 氧化 后 再 电泳 分 骨 才 得 到 芳 的 要 咯 呈 肽 I。 要 咯 嗪 肽 工 以 酸 至 水 解 径
使 癌 和 电泳 居 析 分 衣 氨 基 酸 后 定 量 测定 , 粘 果 列 认 表 2。
表 2 SL cy IR A (susaegen a8)
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(2) ARMOR RIE MIG IBS MB ES A BE: 3 |
行 部 份 酸 水 解 48 小 时 ,除去 HC] 4h, BBR KAR, RERNUEAT RELIG. 在
两 泽 都 消失 ,可 能 翼 咯 嗪 的 核糖 醇 支 链 失 去 , 生成 [6,7]- 二 甲 基 咯 嗪 肽 ) Bek IL, 更
Ald A, 肽 链 的 氨基 酸 分 析 粘 果 见 表 2。 过 些 粘 果 指 出 通过 酸 部 份 水 解 可 以 得 到 仅 带
Hie IS Seve DENN SE SLM ORK TB BRIE ATA In。 APRS LORE DUA
肽 链 顺 序 很 可 能 是 :
要 咯 嗪 辅 基 - 称 氨 酸 -[ 甘 氨 酸 - 谷 氨 酸 - 门 冬 氨 酸 ]-[ 匣 氨 酸 - mitre,
(3) FPR Rte ANAS eee:
JA FDNB 方法 未 测 得 任何 N 未 端 氨基 酸 ， FRE TT RE Sate NV Se SB Hs RR
上 Lani (2) 式 所 示 ]。 但 也 可 能 辅 基 与 疆 氨 酸 按 图 中 (1) DURFEE, PLA
| YWEDNB 化 的 量 较 少 或 者 在 FDNB 反应 的 条 件 下 产生 N-O 移 位 而 未 能 测 得 N 端 氨
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da) = OCHe — CH — COOH
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SAVE iik IL, 在 pH 10.5 GEA Rp 80—25° 进行 碱 水 解 , sc I
IR B57 WA SER RIE Oy Ls A AK AR REM, Bb REWtE DH 2.7 B pH 5.0 Be IH oho
中 电泳 及 在 正 丁 醇 -醋酸 -水 溶剂 系 葡 中层 析 均 不 与 肽 分 风 ， I AIR BN
HL AREAS Q 中 ， SEER IR SUA RE 4 RA A RA ES, se
SHAN FY AEA Rs WEBNS 1,2 或 3 位 上 ,而 可 能 在 第 4 位。
(5) 羊 心 琥珀 酸 腕 氨 酶 的 研究 : Me | ee
Fs EI AR WN 起 要 咯 号 用 和
部 分 酸 水 解 (人 条 件 与 猪 心 琥珀 酸 腕 氨 酶 同 ) 得 到 类 似 的 要 咯 哑 肽 IIT, 及 IIIs， 其 氨基 酸
的 定量 钥 成 数据 烈 於 表 2 中 ,根据 表 2 BY AR FEO BRAS RAEI GED BE i
, Rg -R-[TRR-FAR- ARB] ee
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[1 ] eee ema EM: EER 20，84 (1956); 31, 174 (19875 AHL HE a a
HB, 化 15 (1956), .
[2] E. B. Kearney, V. Massey and T. P. Singer: Fed. Proc. 15, 286 (1956).
[3] E. B. Kearney: J. Biol Chem. 235, 865 (1960). ;
[4] EER EAP MAR B RiES EA: ”生化 学 报 2, 31 (1959).
BRR EA Ee
me 昌 大 学 生物 系 ,上海 ) A
. 2 LP eh 52 TF os PA PT YH PH 之 间 的 关
国 是 。 。 傈 。 从 育 定 曲线 可 推测 蛋白 质 分 子 上 存在 可 解 见 基 团 的 性 质 和 数目 。
AST fe SS AEE MLD Bi, 4% 0.37 HALLS E ET REM UL Ato
mame re KI — (DIRE, DH 8.5)。 电 位 涌 定 使 用 带 有 雷 磁 221222 eS
上 比 电极 的 19 型 精密 酸度 计 进 行 ; 用 分 点 法 测定 。 省 度 用 乾燥 法 测定 。 PERE TE
p=0.049, 25°C 下 的 涌 定 曲线 及 甲醛 满 定 辕 果 , 音 考 虑 分 子 所 带电 荷 的 帮 电 效应 , HET
有 了 关 基 因数 及 相应 汉 定 常数 篇 :
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每 个 分 子 上 的 数目
2 @ (4 M=85,000) pKo
x ” 基 66 4.4
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\ 咪唑 基 17 7.0
6- 所 基 24 9.4
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TEHERI EIRP A C:- METRE: DH 2 WFR A BS 81, DH 8 WFAA BS 15,
“RGF Re) BE JS EE bk WE GE
， ”我国 (上 海 ) 人 的 Hp 型
BRE WAR 方 深 高
(EAGER, 上 海 )
1955 年 Smithies ARMS TRO, SAME. 此 合 , 相 ，
| FB SRW EI. 过 种 电泳 法 具有 上 比 目 前 所 有 的 其 他 电泳 法 更 _
BMA ACRES AS ee RSS wT.
Feb DU EB BY ES. EPI A TE, 发 现 属於 oa- BRAS
fA A Haptoglobin (Hp) HAWAHEAREE, WORRIES BS, .
被 命名 篇 Apis, Hp. 2, Hp... MARZ Hp. MIWA BES
BR AW. Hoo 型 ,不 过 和 后 二 种 类 型 很 少见 到 。 根 据 家 系 研 究 Smithies 和 Walker 指
出 过 些 差 旭 是 在 二 个 不 完全 题 性 的 等 位 基因 Hpl 和 Hp? 控制 之 下 , 箱 守 孟 德 页 独立 分 风
定律 和 遗传。 表现 型 Hpi, ID 3:35 Hp2-, HAASE Hp?/Hp?’, Hp?/Hp’, Hp?/
Hp?, Parker 和 Bearn #RABAMME., HW Hp ERA HAR BFS
ims Hp 型 的 研究 有 着 人 类 学 上 的 意义 。
Ha HOSE SEEMED J SEA YE Gs BE I. | OR, PEE
Bb HET T OIE Ek, WE T 104 ZR Ls) AM—( RAM Hp 型 。
血清 凝 腰 电 泳 参照 Smithies 方法 进行 。 通 程 中 ,我 们 试用 了 国产 马 谷 昔 泪 粉 ,同样
可 以 由 得 合适 於 做 凝 腰 用 的 部 分 水 解 泪 粉 ; 改进 了 在 电泳 后 ,使 凝 爵 透 明 的 方法 , 以 脲 素
加 在 洗 脱 凝 胶 底 色 用 的 深 沪 对 ,， 简 化 了 以 热 醋酸 、 蔡 醇 或 甘油 处 理 的 步 又 ; 丝 且 以 常用 的
狐 电 访 寞 代替 凝 胶 专 用 的 电 访 槽 ,使 用 比较 方便 ,在 需要 降低 槽 瘟 时 , 手 炉 也 较 容 易 。
进行 人 的 Hp 型 测定 ,也 参照 Smithies HH, UMMARBMRHK, LAK.
Baa. KATHI +S, BEE Hp 和 与 Hp -。 型 之 间 的 一 些 烙 合 珠 蛋
A, AREER LA SIA, CPR, RAPT MSG. 另外 再 po-。 与
Ap BZ RE, MARE. RU OME EG Awe, eM, a
探 用 Tris-C,H,O, (SKN?) 和 EDTA-Tris-H,BO, 248k, 没有 改善 Hp Wy
“BD. 在 正式 测定 Hp 型 时 , 探 用 的 是 加 以 血红 蛋白 (Hb) 的 血清 作 篇 样品 以 联 革 股 课
色 , 联 苯胺 只 对 具有 催化 氧化 作用 的 结合 珠 蛋白 是 色 , 得 到 与 纯 的 烙 合 珠 蛋 白 相似 的 电泳
(BLM, PY EER Hp 的 各 种 型 别 。 现在 看 来 ,以 单纯 血清 的 样品 ,对 Hp
测定 不 适合 ,但 是 用 作 其 他 目的 ， 如 病理 血清 等 的 研究 工作 ， 仍然 有 效 ， Ti ei
特征 与 其 形成 机 制 ,也 是 极 重 要 的 线索 。
FLV A rt & AP » Ai EL BR , VB nee A dT :
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解 其 分 子 的 外 形 , EM 5-H ADF AB EE FB, RA a Sy TB) A=W ME BS EE
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肌 A SR = as 冤 檬 ”， 品 ih & 间距 横 RM i
REM | 1 on 晶 体 420 A BE 70 人
局 ” 上 ole a en nh oft 400, 200 A | 1% 200A, 100 A
HE ATEN eee REE 1400, 725 A 5 WE 145 A
同上 同 上 ish Sr enti CE eae 5 We a
REEMA RB ES, TAR LA eB 6 ISL BPS AZ
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v 我 们 对 104 名 健康 人 中 进行 Hp 型 型 测定 辕 果 : Hpi 型 9 人 (Ai 8.65%), Mpa 型
4B XK (hf 41.35%), Has B51 A Chik 49. 05%) 以 及 HPo-o M1 A (4H 0.96%), BA
请 Hos BEA. 从 上 述 比例 计算 得 Hp" 基因 频 度 是 0.29 奥 国 外 四 不 报 草 关 认 非 估 的
‘a Hp" 基因 频 度 很 接近 ,它们 分 别 篇 0.28,0.34,0.29,0.28。 SRA Hp 型 的 测定 在 法 医学 上 ，
re FY Ae AE — A EE he, ME— 2b BATE» A] Hp 型 与 其 他 血型 独立 无 关 。 我 们 对 一 个
家系 的 测定 粘 果 , 屠 代 和 子 代 (二 女 一 男 ) 共 五 人 都 是 了 ps- 型 是 与 假定 的 得 传 规律 符合 。
Om ; : . ‘ t
| 2 上 B 二 三 而
原 肌 球 蛋白 晶体 的 电子 题 籁 观察
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ee (中 国 科学 院 生物 化 学 研究 所 ， 上 海 ) ~
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此 中 值得 注意 的 是 原 肌 球 蛋白 与 副 肌 球 蛋白 二 者 间 的 并 傈 ,以 抽 提 方法 , 稳定 性 , 毛
基 酸 租 成 ,三 旗 侧 鳃 占 61_63 多 分子 的 高 度 不 对 称 性 , 枉 高 的 & 曙 旋 百 分 比 等 各 种 特 伍 衫
此 ,两 者 小 有 差 嫁 而 基本 相同 。 区 别 最 大 之 不 在 认 副 肌 球 蛋白 在 茵 娩 溶液 中 溶解 度 很 低 ，，
硫酸 钙 匣 析 时 也 在 40 多 饱和 度 前 析出 。 因此 文献 中 也 有 称 之 篇 “不 溶性 原 肌 球 蛋白 ”的 。
但 过 种 区 分 也 不 是 犯 对 的 。 我 们 内 年 前 全 报导 中 对 量 原 肌 球 蛋 白 在 15 狗 他 和 度 即 析出 。 ，
目前 已 有 不 少 实验 盖 据 ,说 明 闭 壳 肌 中 的 副 肌 球 蛋 白 是 “紧张 收 熔 ”的 底 物 ,相对 於 肌 动 蛋
a AARES 2 Re we. URES RE
进一步 于 解 ， 也 是 开明 到 目前 篇 止 舍 未 清楚 的 原 肌 球 蛋白 生理 功能 的 一 个 重要 业 案 。 Fe tom
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RSE T ALA, Bp RE HEHE ALE AL, PME AMIR
IO EMRE PSO (0.1%, DH 5.4) ete. SURI, QUAL, WAM.
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gaxan | @anw | 车 入 等 全-
) 轻 酶 解 肌 球 蛋白 | aie 430 A
猪 . 膀 胱 | 原 肌 球 蛋白 BEEN | 200, 400 A \
a |) RSE PE GRRE fh, 200, 400, 800 A !
983 i | 原 肌 球 蛋白 磷 鲜 酸 染 色 | 195, 780 A
m= | 原 肌 球 蛋白 “| RMR | BINA
TES EL | 原 肌 球 蛋白 SHIRE 410 A
同 上 | 原 肌 球 蛋 白 BRST (6, 410 A
同 上 | 副 肌 球 蛋白 SHEER 710 A
WAI | WER 磷 铝 酸 染 色 750 A
fal ， 上 | 原 肌 球 蛋 白 钙 投 影 750 A
A 上 ，|， 副 肌 球 蛋白 SHIRE 720 A
ae eas Lees
(一 ) TERRE LEO FIR, (OBER TREBLE, —
CSL PAA es RTL AAD, FEAR. IT PAD ABA 200-8 和
400 A,
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(=) 值得 注意 的 是 河 时 于 帝 肌 原 肌 球 蛋白 范 具 有 750& SmI RENE R, 也 即 具有
奥 副 肌 球 蛋白 类 位 的 横 术 间 距 , 尖 一 初步 推 喻 温 需 进一步 加 以 如 实 。
(=) ZENG SDL RE BHP ARS RES RA 800A 的 横 ，
PUTER AIOE. 值得 注意 的 是 : AURWERCHIEEE 800 A 的 话 ,根据 分 子 排列
的 可 能 过 两 种 原 肌 球 蛋白 的 分 子 长 度 显然 不 会 小 於 800 A。 BRM SAG RE
白 进 行 过 一 系列 的 物理 化 学 研究 ,发现 它 的 分 子 轴 比 , 分 子 量 都 比 其 他 的 原 肌 球 蛋白 大 ，
初步 看 来 ,过 些 粘 果 和 还 是 比较 一 致 的 。
到 目前 篇 止 副 肌 球 蛋白 仅 在 软体 动物 肌肉 内 发 现 ， 对 撩 不同 种 属 动物 原 肌 球 蛋白 的
WZ LOBED ZS, SPOIL BE es AG A SL ES ZI SB ETE, TERE
进行 中 。
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(中 国 科学 院 生物 化 学 研究 所 , 上 海 )
对 横 才 肌 原 肌 球 蛋白 在 无 岂 紫 子 的 水 溶液 中 分 子 以 直 缕 方式 聚合 。 过 种 聚合 作用 主
意 到 殖 基 的 完整 伍 否 对 聚合 作用 有 很 大 的 影 兆 。 目 前 , 原 肌 球 蛋白 的 化 学 烙 构 倚 不 清楚 。
坊 了 革 找 过 种 解 欢 聚合 的 特点 和 与 其 辕 构 之 闻 的 联系 ,首先 从 好 殊 基 团 - 一 获 基 开始 ,企图
礁 定 殖 基 的 数目 和 了 解 哮 基 附近 的 氨基 酸 排 烈 砍 序 与 空间 构 型 。
GURNEE PSS BAECS BRE, BP aS RAVE A
同 或 测定 方法 不 同 (NEMI je, NEMI 光 谐 涌 定 、PCMB ie, PCMB WKS), 数
据 颇 篇 晴 殊 (0 一 4 个 -8 了/ 分子)。 我 们 将 股 原 肌 球 蛋白 反覆 提 生 滩 化 6 一 10 次 后 按 Hirs
的 方法 将 蛋白 氧化 ,使 路 基 氧 化 成 磺 酸 基 。 再 从 酸 水 解 物 经 除 见 子 交换 柱 测定 生 胱 磺 酸
BURG GY BRIE ILM. 除了 过 种 机 制 以 外 ,在 以 往 的 工作 中 还 注
时
的 含量 。 同 时 ,从 氧化 原 肌 球 蛋白 的 酸 部 分 水 解 液 中 分 见得 到 一 些 含有 后 胱 磺 酸 的 肽 息 ， 4
” 班 测 定 了 它们 的 氨基 酸 排 烈 砍 序 。 通 通过 一 工作 半 国 产 演 红 和 树脂 的 应 用 初步 积累 了 一
些 经 验 。 _
1. SCRE AME : | wee
WEA AUP AC TE A wi BE BE eT BY Be LETT RI, PRR YS Pe, FE — 10°C 氧
Me, 25 ANE SAT RSE FF ARR , FAR IR RAF o 3
- OTM 8= FFE MAE (DNP 法 ) KEE (PTH 法 ) BEM AIRE.
样品 在 5.7N HC 中 110°C 水 解 24 小 上 时， 再 用 Moore & Stein 方法 测定 其 氨基 酸 钥
成 , EBA: 甲 态 氨 酸 全 部 氧化 成 甲 硫 氨 酸 碍 , 盾 胱 氨 酸 则 又 成 后 胱 磺 酸 ， 而 酷 氨 酸 及 其 他
的 氨基 酸 都 没有 遭 到 破 壤 。 利 用 Boyer 的 PCMB 法 在 8M RRB PMMA
坊 零 ,表示 样品 氧化 完全 。 OTM 不 能 和 粘 晶 亦 不 能 聚合 , 它 的 粘度 行 篇 与 解 聚 了 的 原 肌 球
蛋 自 相似 。
2. 驴 基 的 数目 : dries th.
4 OTM ££ 5.7N HC, 110°C 水 解 24 小 时 ,在 0.916 JK hy BEB 201 x 2 KE
中 分 析 得 后 胱 磺 酸 的 含量 篇 1.83 个 /分 子 。 未 经 氧化 的 样品 经 Boyer wy Atete 8M jR
FRCP TUS SAE A 5 1.82 个 /分 子 。 对 从 原 肌 球 蛋白 目 ONE SEER eee |
淮 。 和 从 测定 的 结果 看 来 ,如 原 肌 球 蛋白 中 含有 2 (SEE.
3. PRERMMSHASE : |
OTM #6 12N HCl, 37°C 2kR 7K, 7K , 加 入 2X 50 厘米 的 国产 强
Me1x2, Ht BE ERS FRAME AY See EE ETRE 3 HEU EME
Teer BRE 2 x 50 厘米 的 强 具 2012, Cy, 型 树脂 柱 上 用 pH BA REREMETT ABIES SRE
LBS TA Boot 2 Fi Ae aT i, ABP 1 EVR EE TET Be FA R- 7k (15 3:2) Be, Ae
度 , 再 用 DNE ERM EAA RRN- 端 。 HSCRRWRA=RKEAFER. 它
0
们 的 排 烈 芯 序 是 : CySO,H - Ala; CySO,H- Phe; Leu[Asp, CySO,H], 其 中 Leu
[Asp, CySO,H] ink Satara a SMR Oe i 进一步 的 化
学 千 构 测定 集 在 进行 中 。
走 : PCMB RAMEN: NEMI 代表 N- 乙 基 正 于 烯 二 酸 亚 胺 ; CySOsH 代表 牛 胱 磺 栈 ; Ala 代表
AAR; Phe 代表 苯 丙 气 酸 ; Leu GAM; Asp RAMAN; DNP we RoI MAW: ei
ARSE MRE
EEO UAARE AE
| hee WC RR LER A 的 一 些 特 性
RSG Etc SRE BKK
CPR See yb SST, Eye)
FULRER OES AR AENEID EDL, Bailey, Hamoir, Sees
MATE rd $A (WE AE fh) DATE ABR WAAR AENEAT T LETTS. SHAG BLL RE BER
HERB ea — FEE AR EP, TELA, BR aE AP BS LSS, 3 PE AE RU KE A BY
功能 有 关 。 此 中 最 突出 的 例子 是 海 蚌 于 壳 肌 的 "不溶 性? 原 肌 球 蛋白 ( 即 副 肌 球 蛋白 )。 近
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. «¢ eo. & © ot 可
来 有 许多 王 据 说 明 它 是 “紧张 性 收 蓉 ?的 底 物 。 在 肌肉 蛋白 的 比较 研究 中 , 无 看 椎 动物 的
比重 越 来 越 大 。 在 春 椎 动物 中 由 帮 软 肯 刍 接近 演化 梯 障 的 最 下 层 ,与 无 奉 椎 动物 接 吏 , 在
分 子 水 平 上 追踪 其 演化 的 法 味 ,车 求 烙 构 功能 的 特点 , 仍 是 有 其 意义 的 。 我 们 选择 了 供应
较 多 的 馈 、 洗 需 代 表 , 和 进行 了 一 些 研究 。 在 方 行 中 除了 常用 的 物化 和 化 学 技术 外 ,休克 用
了 名 敏 度 高 专 一 性 强 的 如 疫 化 学 方法 。 以 下 是 一 些 初 步 机 察 和 精 果 。
i TELE) TK GEER) 的 原 肌 球 蛋 白 分 别 掖 Bailey 硫酸 铁 曙 析 和 乙醇 沉
泪 法 朱 提 和 滩 化 七 藉以 上 ,站 得 到 了 结晶。 其 溶解 度 . 收 吸光 计 、 热 称 定性、 分子 的 不 对 称
i MN RASH RAVES CL LARS BETES fit
RAE, 不 合 色 氨 酸 ,而 次 每 分 子 攀 合 一 个 色 氨 酸 。 BRL NG HEL (PH
8.0 及 6.5) 均 得 对 称 均 一 的 崇 形 ,但 自由 电泳 下 行 可 观察 到 尝 形 渐 趋 不 对 称 。 政 脂 志 永和
Hii Wk (DH 8.6) 用 省 酚 蓝 、 氨 基 黑 、Nigrosin 染色 可 以 见 到 快速 部 位 有 相当 省 度 极
低 的 染色 部 分 ,只 经 多 次 乙醇 或 路 析 法 渗 化 均 不 能 除去 之 。DEAE sar SLID
”中 得 主 带 , 重 复 操 作 第 ,快速 部 分 又 复出 现 。 此 快速 蛋白 对 乙醇 . 热 . 酸 的 稳定 性 与 原 肌 球
蛋白 极 相 似 , 俊 带 电 性 质 与 空间 构 型 有 所 不 同 。 因 此 可 能 :
(1) 原 肌 球 蛋白 局 部 芍 基 在 操作 允 程 中 裤 氧 化 或 由 於 其 他 称 故 影响 了 空间 构 型 和 电
荷 分 做 。
2) 带 有 非 蛋白 基 围 的 原 肌 球 蛋 白 ,在 实验 过 程 中 解 风 或 纤 合 。 EA WR
酸 、 脂 染色 者 也 不 显 色 ,但 品 红 法 染色 , 避 明 慢 速 部 分 含 糖 。
(3) 其 他 原因 使 分 子 构 型 的 不 对 称 性 减 小 ,降低 了 开 脂 盘 效 应 。 FRAPS HRS
be j pes
| BMWS , 原 肌 球 蛋白 脖 移 达 高 ,可 能 开 脂 对 极 不 对 称 的 分 子 有 阻 三 作用 。
| 笨 的 形成 ,也 是 由 病毒 中 的 核酸 所 控制 ,而 不 决定 亦 寄 主 的 址 传 系 粒 。 FS AR SE ch
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“4 Weal et 7 本 ome 3 yr Re ATR
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(4) 不 稳定 肽 键 局 部 断裂 。 以 此 种 可 能 性 有 待 进一步 研究 。
» Bailey 和 昔 注 意 到 原 肌 球 和 蛋白 BA He REE Eo UPR Fs 70% HB i RAS HEIR |
BRE. RUM ARE EA EE KORE A
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REIL T AREER LEE BO, CRE. UB ER
接近 90%. (HRV B BGR ECR a HORE, HFRS Cohen 的 和 张 和 草 最 近 所
发 表 的 数据 之 间 。 Cohen 的 数据 可 能 偏 高 ， 因 篱 在 氧 乙 醇 中 的 原 肌 球 蛋白 螺旋 度 超 通
100% , 闪 以 理解 ,而 张 和 曹 所 用 的 样品 已 保存 四 年 以 上 ,螺旋 可 能 有 所 瑞 失 。 最 近 我 们 注
意 到 与 此 同期 保存 的 另外 闪 种 原 肌 球 蛋白 ,溶解 度 只 仍然 很 好 ,但 均 失 去 了 糙 晶 的 能 力 。
~~
根据 以 上 车 果 ， 如 何 保存 原 肌 球 蛋白 使 之 不 失 原 有 的 构 型 ， 将 是 一 个 值得 注意 的 间
题 。
将 不 同 种 类 的 角 以 及 同一 板 鳄 亚 欧 ， SP 8 AAG ESI RES)
«genes hak act dea rin - RA ETE Alo
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芝麻 敬 核 型 多 角 体 病毒 的 研 完
工 形态 及 其 他 性 质 的 入 诗
TT. 包含 星 酸 龄 溶化 曲线
Ee aOR Ene Site BIS
《中 国 科 学 院 实验 生物 研究 所 , 上 海 )
本 病毒 是 棒状 ,由 1 一 3 个 病毒 棒 集 合 在 一 起 ， Re #) 34 ret .
青 膜 ,又 被 包 合体 蛋白 质 围 成 一 个 有 规则 的 多 角 体 。
| 多 角 体 的 形状 有 三 角形 ,四 角形 ,五 角形 及 生 形 。 大 小 坊 12-2. 9 [bo 所 以 其 形状 及 ie:
KARR INNA. HEE MEI RT HE 250-280 x 30—40 mp
JA ss AES HK, HG, ALR. IL PS SLR PS BS HK A. 1k es JS BY
(FSR) RRB ESS) ERIS 8 一 20 天 。
FREE (RELAY) 5 He IL FREY) BEA LAR COSI ES PN EIU ;
AR Vly es wah OS Ss HE HE AH ML , Ze ASE BEE 其 与 金 疫 有 关 的 蛋 日 质 部 分 ， i
BR EG es Bt :
VAR ELISE ALES WBE BAS PME (六 角形 )。 所 以 病毒 包 舍
i 9
人 人
ie net Pith i aul Cy Md tied Big cle NACA Used 1 TY Bese Bei nh
eke Toh ea le tagl feos eae LGA op ，
。 。 病毒 的 包含 体形 状 截然 不 同 ， GET ERT LE, Pi te SED
的 研究 时 ,过 是 -- 个 很 好 的 材料 。
病毒 中 的 核酸 是 胶 氧 核 精 核 酸 。 ，
ee ee re er eee
© TiS, TAT eI FE, Gd NasC0s AARC BENE 0.05 M, HCL 的 是 025 M1,
而 NaOH 的 省 度 , 则 只 要 在 0.01 M 以 上 ,都 是 有 效 的 。
ARRON IE, BA HL EAN, i EL WA AE 以 KCI
“车 ,最 佳 强度 篇 0.05 Mo | ie
| RARE Th HOVE CSR BE Al
在 最 佳 省 度 下 BLE & ET ,所 能 溶解 的 包 合体 量 是 有 省 度 的 。 最 大 负荷 是 ees
”每 毫升 能 深 5 mg 多 角 体 。 |
3a, SAIL E56 HAG HOS — SORE OT EEN NCAR A, 省 度 ，
HET TE PROG TN RS NOR OT ER TL ELUNE T ee
。 。 EROGREAT, 其 中 可 能 存在 氧 刍 ， DOR Te NDEI Be A
«Bem. *
PALE AE ERT BA
“物理 化 学 的 比较 研究
mA SSE BK AS
(PRA Shey bBo, 上海;“* 中 国 科 遍 院 微生物 研究 所 , 北京 )
“在 植物 病毒 中 ,烟草 兹 灶 病 毒 (TMYV) 是 研究 得 最 多 的 一 种 。 在 化 学 方面 , TMYV 普
通 株 的 氨基 酸 排 烈 顺序 已 经 完全 开明 。 在 物化 方面 , 它 的 四 级 千 构 及 分 子 形状 也 研究 得
很 清楚 。 株 系 关 的 比较 研究 是 病毒 研究 的 一 个 重要 方面 。 首 先 株 系 天 傈 的 确定 在 病毒 的 ，
镭 定 上 是 十 分 必要 的 。 同 时 对 株 系 间 在 分 子 千 构 和 生物 学 特性 上 存在 的 差 黑 进 行 分 析 温
A BRA SB AEB Sy OB SE) SR
在 国内 ， 已 经 从 烟草 WAR WR RU LSE DU MS UR AS TMV-1，
YMV35, DDV PV), MASK He se Ee ELABHIS TMV 的 株 系 。 本 工作 的 目的
EU TSAR Zs — ee REE, LER TM 的 ，
Pk AR WAGE . IEE KR A TF TE ER
在 化 学 方面 所 作 的 分 析 有 : 1) 氨基 酸 的 定性 租 成 ; (2) C 末端 的 狂 定 ; 〈3) REA
酶 酶 解 图 六 ; (4) 胰 和 蛋白酶 酶 解 碎片 的 N 端 。
在 物化 方面 的 分 析 有 : (1) 流动 甸 折 射 ; (2) 等 电 点 ; (3) Pores (4) 电子
HCLSEDLE 0
TETRA SHEA Ae C ARMS ARR ARR EF Ge Ri SET BR,
—93—
它们 的 形状 均 篇 趴 型 的 棒状 ,紫外 吸收 光 讲 和 典型 的 TMV 也 大 体 相同 。
但 是 除去 以 上 的 一 些 共 同 点 而 外 ,也 可 以 看 出 株 系 间 的 某 些 差 展 ,其 中 特别 值得 注意
的 是 YMVis。 从 物化 方面 来 看 ，YMV:s 的 聚集 现象 特别 显著 , 在 电子 题 微 钥 下 观察 可
DH YMVis 容易 聚集 成 束 。 在 放置 合 YMVis SAS) MIE SERN, 在 正 交 仿
振 片 间 下 层 出 现 彩色 的 花 攻 。YMVis 的 等 电 点 也 很 高 。 与 YYMVi 相似 ，DDV wes
聚集 成 束 , 等 电 点 也 较 高 。 根 据 觅 疫 学 的 研究 ，DDVY 和 与 YMVis 也 有 较 多 的 共同 抗体 。
SEPT ALL HHS YMV,, 与 DDV 的 表面 基 围 或 电荷 有 类 似 之 处 。 在 化 学 方面 ; YMV5i5 也
颇 多 特殊 之 处 , 它 的 酶 解 图 尾 及 酶 解 碎片 的 N 端 与 其 他 株 系 有 显著 差 慷 。 在 氨基 酸 棚 成 、
上 ，YMVus 含有 租 氨 酸 及 甲 太 氨 酸 。 在 国外 株 系 的 比较 研究 中 ，HR PRIOR,
它 也 合 有 上 述 二 种 氨基 酸 。 在 过 一 点 上 YMVi; HR 株 是 相似 的 。
从 上 述 的 一 些 结 果 来 看 ，YMVas 的 蛋白 外 壳 是 比较 特殊 的 ; 题 然 Y MV, 的 二 些 生
物 学 特性 正 是 过 此 特殊 车 构 的 具体 表现 。 因此 深入 研究 YM Vis 的 车 构 将 有 助 基 关 明 病
毒 的 粘 构 和 与 病毒 感染 功能 之 间 的 天保。 过 些 工作 正在 进行 中 。
在 本 工作 中 病毒 的 提纯 条 用 化 学 及 物理 方法 。 BSAA ST TEA
BEDE SB
$5 T GIRLIE FE AE REA: FEI 0 本 文 提供 了 用 氧 乙 醇 使 病毒 解 聚 出
的 新 方法 。 病毒 水 溶 液 加 等 量 氨 乙 醇 后 流动 公 折 射 请 失 , 加 丙酮 后 沉 出 的 蛋 自 丑 在 水 中
的 溶解 度 很 好 ,吸收 高 罕 由 260 my $845 275 mw。 解 聚 的 蛋白 很 易 被 酶 水 解 。
We
i A-3 对 类 入 二 类 化 合 物 的 人 化 性 能
EASE 2 at
中国 科 学 院 有 机 化 学 研究 所 , 上 海 ) ，
石油 等 笃 类 物质 能 被 组 菌 氧化 是 久 已 知道 的 ， 但 对 过 类 链 至 的 微生物 氧化 倚 少 系 敬
的 研究 。 我 们 从 士 壤 中 分 岂 和 节选 出 一 些 粗 菌 ,经 过 两 个 月 的 石 腊 油 培养 基 培 养 ,得 到 闪 株
能 以 石 腊 油 作 篇 唯 一 矶 源 而 生长 良好 的 菌 种 , 其 中 之 一 编号 乱 A-3 (PARE), 是 革 蓝
Bea TEA Bal ,在 石 腊 油 囊 脂 (以 石 腊 油 和 确 酸 钙 作 篇 碳 源 和 氮 源 ) 科 面 划 米 处 长 成 奶油 色 ` 平
滑 、 油 油 、 成 片 的 菌落 ， RET ER A BE MEAT KATE ee ( 石 腊 油 2M、
PAPE 0.2% DAN — ASF 0.05% BRM — Gi 0.1% , HMRBE 0. 02% Bets a SR pH 7)
HE, 28° Pete Hi Fe, SAMAR , nlite 油性 。
在 37* Hevea yy -2 siaisietailed +e Be A- “FASS A
EGE BH AAW:
(—) SERIE TET ANKE TET AUR, BAIT GVA 58° A Cs ris) yA REAR
Qo, (N) 分 别 篇 1238, 1830, 935 (Ite IAT BR ER MER). TESTER GE
氧化 不 显著 。 该 菌 对 正 十 六 烷 和 正 十 八 烷 的 呼吸 商 RQ 5-318 0.27—0.47 (SEH, SY
一 94 一
稍 天 ) 和 0.45—0.49 (Hk= Fe). 如 完 公 氧化 篇 二 氧化 矶 和 水 旭 计 算 的 呼吸 商 应 篇 0.65。
这 似 说 明 烷 烃 分 子 的 大 部 分 已 破 氧 化 需 二 氧化 矶 和 水 。
(=) 脂 醇 及 脂 酸 “ 粉 未 状 的 正 十 六 醇和 十 八 醇 能 迅速 被 该 菌 氧化 ， 其 氧 耗 棕 分 别 篇
> 1838 和 1308。 粉 未 状 正 十 六 酸 和 十 八 酸 不 彼 氧 化 ,但 其 钠 咯 溢 液 (10-3 M) 旭 易 氧化 ,其 -
“ 耗 氧 奉 分 别 得 1425 和 833。 正 十 六 烷 和 正 十 六 醇 或 正 十 六 酸 的 混合 氧化 以 及 正 十 六 酸 和
“ 正 士 六 醇 的 混合 氧化 的 氧 耗 李 分 别 篇 1520, 1632 和 1528。 混合 氧化 比 各 底 物 的 氧化 略
高 ,但 束 不 及 两 种 底 物 单独 氧化 氧 耗 率 之 和 。
(=) 芳烃 . 环 烷 及 其 他 SORA (RRMA) BOW SK Be
”省 醇 和 胆 酸 钠 (10 ? M1) 没有 显著 的 氧化 ;其 氧 耗 率 (25 一 123) 凡 和 与 内 源 呼吸 相仿 。
《四 ) 到 天 氧化 的 抑制 ”不同 滤 度 的 县 氮 化 钠 , 握 化 钠 和 夏 栈 酸 (10 “一 10 M) 对 着
A-3 氧化 正 十 六 烷 和 正 十 六 醇 的 上 E 力 有 不 同 程度 的 抑制 (20 一 84 多 )( 附 表 )。 abet
”“ ”将 过 两 种 底 物 的 氧化 抑制 作用 似 无 明显 的 区 别 。
“和 从 以 上 混合 氧化 和 抑制 氧化 的 试验 车 果 看 来 ， 正 十 六 煤 及 其 相应 的 醇和 酸 在 菌 体内
可 能 是 通过 相同 的 途径 氧化 ， 而 主要 的 氧化 酶 系 似 属 雁 合金 属 的 氧化 酶 。
附 表 “ 兹 种 抑制 剂 对 土壤 和 菌 A-3 氧化 正 十 六 烧 和 正 十 7 六 了 醉 的 影响
BMA il %
Htim| 2B
十 六 醇
BEALS 2.5X10-3 M : 27.3
5x10 M : 64.8
102 M : 84.1
G tt 9 2x10 M ; 20.0
. 5x10 M : 48.4
4 2x10-3 M - : 59.7
a: » 6x103M ‘74. 65.8
102 M : 70.7
RRL PS EER. SEMBLE MEO BLN 0.427 BET HAL
i ah 1) an Gel AC Ae HE =
15 eI Ws WE A BD 2 BE 2
ee EK UH TE: mR
CHR BE bc a BUCS SE AT, 上 海 )
土壤 组 菌 A-3 Gasca ELITR AS — GB HH PA EAS RO
级 脂肪 酸 : 酸 甲 (Cy5H3005) > 酸 乙 (Cy HisOs) 和 酸 丙 j (CiHaaOa)。
She ”将 组 菌 A-3 接种 在 石 腊 油 一 一 确 酸 狂 培 养 液 中 ，28" 振 漫 4 一 5 天 。 发 酵 液
一 95 一
ee Orne |S ("wal —_ii* . oe tS ， ee. tsa "— 7 U2, iv mw
. ; oP 1
渐 呈 乳 渴 状 ，p 也 下 降 至 6.2 左右 。 欢心 分 去 效 体 后 ,发 酵 液 纸 酸化 放置 。 分 出 的 昔 体 以
ARV. (ARV AUER RRS). REMAN
SAGAR AIH, PED, 石油 醚 可 溶性 有 机 酸 , DRE EREDAR
性 有 机 酸 等 。 不 溶性 酸 可 以 通过 离心 分 底 , 再 纸 茶 -70 多 甲醇 水 溶液 分 溶 和 纯化 。 从 水 层 儿
”得 固态 的 酸 甲 (TD)。 帮 雇 心 后 的 漆 清 石油 醚 提出 液 再 以 氨 氧 化 钠 溶液 提取 其 中 石油 醚 可
浴 性 酸 部 分 , 碱 性 提取 该 经 酸化 后 可 分 见得 液态 的 酸性 物质 。 和 后 者 再 用 石油 栈 (60 一 90”)
-70 儿 甲醇 水 溶 被 ( 合 10% NaCl) (体积 比 5:3) 作 溶剂 ， 应 用 逆流 分 溶 法 进行 进一步 分
ME, M1 KB, 用 碱 涌 定 测 得 第 4 和 79 管 前 后 各 有 一 高 沟 。 分 别 自 第 24 SF 51
” 管 和 65 管 至 83 管 收集 得 到 液态 的 酸 乙 (II) 和 酸 两 (III)。 两 者 可 以 通过 上 其 空 分 饮 藉 化 。
酸 甲 (I) 石油 醚 不 溶性 的 固态 酸 易 溶 大 乙醇 ， 其 钠 霹 (ITV) 2M 90% 乙醇 和 水
” 车 晶 纯 化 依次 得 无 色 乌 片 状 和 斜 状 有 弱 旋 光 性 的 结晶 [和 燃点 177—178°, [a]p'—0.7° (C
1.06, 7K, 14.0 分 米 )。IV 的 水 溶液 经 酸 化 后 分 见得 一 有 鸡 旋光 性 固态 的 游 驹 酸 甲 (IT)，, 熔
i 103—104°, [a]?'+2.1° (溶解 后 立即 测定 ，C 3.2, 乙 醇 , 14.0 分 米 )] ,根据 分 析 傈 无 支
SEA PFN. (GPT CisH 0005, HAGE %: C 62.04; H 10.41; C-CH, 5.18; 中 和
#290, 实测 值 多 : C 62.18; H10.53; C-CH; 5.19; HAN B, 292.) CIV BeSH ;
省 茶 甲 酰 甲 酯 (V，, 燃点 150.5—151.5°); He 1 CAG (IV, 燃点 98—99°), 从 VIG
酰胺 (VIL, YAR 146.5 一 147.5")，N- 葵 基 酰 胺 (VIIL, 燃点 140—141°) A (IX, @ -
点 165—166°) AbRE AT EAA ©
I RARER A RK [ymax: 3450 (i) 3290 (5) , 1695 (a), Vcd ) je
7], VI 和 与 3,5- 二 确 基 葵 甲 酰 氧 作用 生成 三 -(3,5- 二 确 基 ) 葵 甲 酸 酯 LX, 熔点 150 一
151"，[w] 节 一 3.6(C 2.1, —MAB), AT CarHssOsNe, HAG: C 50.12; H 4.32;
N 9.48。 实 测 值 多 : C 49.88; H 4.42; N 9.69], Wet] BR—-B=HM CHx(OH)s
COOH, PW.
I 在 乙醇 溶液 中 ,部 分 自动 环 化 而 成 内 醋 (XI), I St XI 在 溶液 中 呈 一 平衡 状态 , 因 ，
， 而 有 殉 旋 现象 ，[a] 创 十 2.1" (开始 ) 一 > 十 18" (220 小 时 ); 1 FEZ EYRE (95:5, HB
积 ) 中 内 酯 化 很 快 ,迅速 连 到 过 一 平衡 。 其 [a] 18+10.8° (C 1.5) HEPA BIA, He
们 和 从 工 与 乾 葵 的 旬 流 产物 中 确实 分 见得 它 的 内 酯 XI [燃点 63—64°, [a]}°+59°(C 1.35,
ZB), Ar CisH.sO., HAZ: C 66.14; H 10.86。 实 测 值 多 : C 65.98; H 10. 49],
XI RARER PH C=O 的 红外 吸收 案 : ymax 3510( FR) ,3350(5H) ,1705(48). XI 的
内 酯 环 存在 由 它 与 3,5- 二 硝 基 茶 甲 酰 氧 作用 仅 产 生 二 -(3,5- 二 确 基 ) 葵 甲 酯 COT, 燃点
了 73 一 174"， 分 析 CopHs201.Hi 计算 值 %: C 53.38; H4.94; N859, 实测 值 多: C
53.21; H 4.77; N 8.26), WRG SUB R REAL he XI mute. XIACLeE—-ERRwe
rb Ay heICH: (Lo +10.8[C 3.0]) SI tl. HI AAS = AM, He
羟基 在 Cy 或 Cs 地 位 ,能 形成 y- 或 8- PUM. HE XI AOAC RHEL REIS 5- 内 酯 ，
酸 Z (II) 及 酸 丙 (III) II (Eh 108°/1 毫米 ) 和 III (沸点 134°/1 SK) WH
和 酸 而 有 旋光 性 [II: [a] 2? +23.5° (C 5.0, 乙醇 ); TT: ]a]?2+25.7° (C19, ZB]. 由
元 素 分 析 ,， PANE RB EB Ri Aa i A AEB II 篇 具有 一 至 二 支 链 的 万 烷 酸 〈 分
析 CsHais0。 计 算 值 男 : C 68.31; H 11.47; 2C-CH, 19.0; 3C-CH, 28.5; HP All fa et 158,
FH %: C 68.35; H 11.23; C-CH, 21.46; 中 和 当量 160)。II 的 甲 酯 : 沸点 189.5 一
wet 96 5
ee ce ee ae ee
ae 190° , [a] i$ +29. 5°(C 2.0, 乙醇 ); 和 它 的 SAEED BR [燃点 124—125°,, [a] p'+7.0 (C
2. 1,Z28))]. xii 系 具 有 二 个 或 二 个 以 上 支 链 的 十 二 烷 酸 (分 析 CisHasiOs 计算 值 多 :
Cc 71. 95; H 12.08; 3C-CH; 22.53; Ane 200。 实 测 值 多 : C 71.27; H 11.78; C-CH,
i; | 22,73; 中 和 当量 202), III 的 酰胺 [熔点 67.5—68.0°, [a]}+35.3°(C 1.9, 乙醇 ) 和 III
的 SKATER (次 点 117.5—118.0°,, [a]n+5.2 (C 1.1, 乙醇 )]。 TRE
ania AE oP JII da i il
er
， 上 张 古 青
(中 国 科学 院 有 机 化 学 研究 所 ， 上 海 )
eA 一 ) 氨 化 可 的 松 的 铀 菌 氧化 产物 :
EMEP BEE img C.B, (Corynebacteriumsp. B,) 在 Nia be 35 Wy (0.1 克
- NH,NOg, 0.1 % KsHPO,, 0.05 克 MgSO,, 0.05 克 KCl, 极 微量 FeSO,, 2 克 变 芽 糖 ，
”100 毫升 水 , 减 菌 前 DH 7.0) 内 28° 振 温 培养 15 小 时 后 ,加 氨 化 可 的 松 (1) (10 毫克 氢化
UL “可 的 松 溶 解 认 1 毫升 95 儿 乙醇 ),， RRR 3 小 时 。 发 酵 液 按 一 般 方法 提取 及 经 反 相 狐
层 析 二 次 题 层 ,紫外 光 检 和 视 层 析 谱 发 更 有 四 斑点 : (1) 氨 化 可 的 松 (Ri 0.47), (2) 1- 去 氢
扎 化 可 的 松 (II) (Ri 0.28), (3) 未 知 物 甲 (III) (Re 0.17), (4) 未 知 物 乙 (IV) (Re0.1)。
| RRMA ER I KI BA, 双 与 TPTZ Alem (blue tetrazoium) 均 不
Rif. 很 可 能 均 篇 Coa - 酮 的 还 原 产 物 。 AT SRE Ei RHE 242 mw 的 光 吸 收 强度
初步 定量 。
i SSA HET BRE, TL 的 生成 很 少 , 大 部 分 工 已 缀 化 TIT, 但 无 IV 的 产生 。 KR
Zane II 作 底 物 则 只 有 IV 的 产生 。
从 上 壕 糙 果 推 花 很 可 能 III #5 118, 17a, 20, 21-paye I-A MR MA-(3), IV
W118, 17a, 20, 21- 四 羟基 45?- 孕 省 二 烯 酮 -(3)。
硒 菌 氧化 的 时 间 如 延长 至 5 小 时 , 轻 颖 层 析 检 定 ,I 的 量 减 少 不 多 , II 更 多 洽 失 , 另
外 飞 出 现 不 移动 的 一 个 斑点 LARA (CV), ERE TAMA IG, 而 能 与 TPTZ
BE, TL 的 分 子 中 Ceo- 酮 基 似 仍 存在 ,其 粘 构 何 待 登 明 。 如 直接 以 II A 2 A AR
化 , 亦 产生 V。
因此 工 的 和 狙 菌 氧化 殿 程 如 下 :
AR AR aE ech ME TYME. BaD
(c) ‘(a) (b)
(d)
7
一 97 一
内 Bh
‘ ‘ WA
“Sata
.
(=) 工 的 钢 菌 氧化 的 抑制 :
在 I(10 毫克 ) 的 狂 菌 氧化 过 程 中 加 (1) 对 氨基 酚 (YI)，(2) NaS (vIn), (3)
SERGE (VIII), (4) 8-HEww (1X) 或 (5) ARMEIE MY (X), 5—6 小 时 和 后 与 光照 、
比较 得 知 VI 或 VIL (各 0.5 x 10-3 M) SRL ERY I (11 和 1.5 BE) 及 II (15
和 2.2 毫 克 ) 的 量 无 影响 ，VIII、IX (以 上 各 0.5 x 10-* M) ak X (0.43 x 10- M) Wal
了 历程 中 (d) 的 一 步 (I 分 别 篇 1.3, 0.9 和 0.8 毫克 , IL FH 4.1, 5.2 A 44 BET), ( 当
Ra: 10.5 毫克 ; II 1.6 毫克 )。 另 一 实验 比较 TX 对 3 小 时 和 5 小 时 T RUC
的 粘 果 显 示 在 3 小 时 移 了 ,对照 的 和 II 分 别 篇 08、4.6 semi TX wT ANIL HBAS
23、4 呈 毫克 。 5 AGH T PMMA T An II 分 别 篇 06 和 2 毫克， 而 加 IX 的 工 和 下 移
0.8 和 5.8 毫克 。IX 仆 除 抑制 了 (d) 的 一 步 外 。 渤 抑制 了 工 的 破 六 。，
初步 试验 攻 菌 如 不 先 与 工 接触 路 与 II 一 起 培养 5 小 时 亦 不 见 II LA, 因此 黄体 内
ES II 的 酶 开始 时 似 不 存在 或 不 活 小 。
BAM ei C. By 先 与 氧化 可 的 松 培养 4 小时， 然后 试验 各 种 滤 度 的 IX (0. 5x 10-* M)
All X (43 x 10-? fl 1x 10-* M) 分 别 抑制 该 菌 对 II (4 毫克 ) 的 作用 (作用 2 小 时 万 ESR
题 示 对 照 与 加 0.43X10s M X 的 试验 产物 分 别 有 38 和 .32 儿 的 1 Bw, Ie V ROE
生 ; 加 10-2M 和 和 IIX 的 试验 产物 中 II 很 少 破坏 (分 别 篇 0 和 570) UA A Vz
Ko IX FAX 似 都 有 抑制 作用 , 且 IX 比 入 得 强 。
另 一 实验 经 工 预 培 养 的 苗 和 与 I (6 毫克 ) 及 X (10 M) JERRY 2 ANB, 产物 中 所 有
cs oe
rat ain oe
I (1.1 S35), II (4.923), Ba Pe Ay (1, 0.8 毫 克 ; IT, 4.5 Sat) SER, XW
AS ARR AA EA LS 1 RR SEA TE Bo
—— 9 — BE eT HE A
氧化 的 和 步 报告
汪 ar TYE BK plea ERR
《中 国 科学 院 有 机 化 学 研究 所 , 上 海 )
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“*
BREA oa SERS EAL TE 2k A AES eee resect asd
KERIO. ARCH T Ae RW 1, V/-— A -(3,3',4,4’) PEE Ao, B- 和
?7- ALR A 1HS REACIE Dy AS SCIBE, AE RIESE BAN ED, 以 及 对 正 丁 胺 的 俊 化 氧化
所 生产 物 的 研究 辕 果 。 ‘ : |
| 实验 材料 及 方法
按照 Langenbeck 的 方法 用 Warburg 法 测定 氧 耗 量 比较 催化 剂 的 活力 。 ME
37°, 用 10 匈 醋酸 -吡啶 作 介质 。 催化 剂 用 量 狗 1—20 微克 分 子 ; 底 物 用 量 狗 20 一 300 微
克 分 子 ;反应 液 焰 体积 篇 2 毫升 。 氧 耗 量 的 计算 已 减 去 催化剂 的 自动 氧化 氧 耗 量 , 一 般 底
一 98 一
有 物 自动 氧 耗 量 很 低 可 不 计算 。 oi
ae ic 过 |
(=) a, 8- 和 Y- 氨 基 酸 的 氧化 | BTEC LATED Ao HE
BER EL, B- 和 y- 氨 基 酸 也 能 被 氧化 。 在 三 小 时 内 90 微克 分 子 w- 丙 氨 酸 , 8- 丙 氨
酸 ，7- 丁 氨 酸 和 有 餐 酸 的 氧 耗 量 分 别 筷 468、504、548 和 848 微 升 。 除 甘氨酸 外 ,其 他 所
”大 酸 的 氧化 速 棕 似 随 其 分 子 中 氨基 与 沟 基 间 之 碳 链 之 增长 而 增加 。' 另 一 实验 亦 性 明 8-
RRR (102 微克 分 子 ) 也 能 被 二 茶 二 本 催化 氧化 (687 微 升 03/3 小 时 )。 因此 在 过 一 俯
化 氧化 反 帮 中 分 子 中 状 基 的 存在 似 非 必需 。
(=) 腔 酉 的 氧化 。 在 二 茶 二 醒 的 存在 下 ,各 90 微克 分 子 的 乙 胺 、 丙 胺 ` 丁 胺 、 苇 腕 、
人 三 小 时 内 的 耗 氧 量 分 别 篇 326, 436, 476,
626、734 和 784。 过 一 粘 果 题 示 二 蔡 二 柄 央 没 有 次 基 的 胺 类 化 合 物 亦 具 有 强烈 的 催化 氧
化 作用 ,将 陵 状 基 胺 的 作用 似 更 强 。 半 照 实 验 促 明 乙 醛 、 丁 醛 等 自动 氧化 的 氧 耗 量 及 各 在
REACT FE EEE Hs RE HLA AS 356 82 430. 192, THIBERCALIE rit BREAD BAS 834
”和 852。 ALCS a REAR LIED To a 42 A IE I
ABT XE—25 HO PRA Ko
(=) 每 分 子 氨基 化 合 物 的 氧 耗 量 WHEAT Ho HAM EBRMMETRD -
“ 别 和 与 等 分 子 比 的 催化 剂 进 行 24 小 时 的 催化 氧化 , 按 每 分 子 底 物 计 , 分 别 在 最 初 9,6.5,3.5
小 时 内 很 快 地 涌 耗 了 狗 牛 分 子 氧 ,此 和 后 氧化 速度 减 慢 ,到 16 小 时 以 后 已 不 显著 。 在 23 小
_ 时 内 w- 丙 氨 酸 .正本 胶 和 正业 氨 酸 分 别 消耗 0.7,0.9 和 1.1 FH. TELA ERE
节 三 酮 或 柄 的 氧化 每 分 子 突 痊 耗 后 分 子 氧 的 千 果 不 符 ， 可 能 由 秦 以 二 茶 二 柄 作 催 化 剂 时
胺 类 的 催化 氧化 包括 二 步 反 应 : (1) 胺 的 氧化 成 醛 ; (2) 产物 醛 的 进一步 氧化 。 前 者 似 较
ZR, eB 0°
_. (a) “BI BYARLAMHELED 300 微克 分 子 的 乙 胺 、 a FER 2 - 丁 氨 .
酸 、 正 丁 胺 和 正邦 氨 酸 各 和 与 1 微克 分 子 三 蔡 二 柄 进行 催化 氧化 反应 12 小 时 , 氧 耗 量 分 别 ，
篇 5.2、8.9、18.7、12.5 和 25.4 FA MED FADIA RD ERE
Wp es 5a He BFE) ECR RE EAL 5.2 分 子 乙 胺 , 8.9 分 子 o RM 18.7 OF y-T A
酸 、12.5 分 子 正 丁 腕 和 25.4 FIER FERMI -氨基 酸 的 氧 消 耗 中 不 强 ,但 很
持久 ,到 芭 AFA RCIA ANB. KZ 7- 氨 基 酸 和 胺 类 在 反应 初期 氧化 较 快 ，
但 不 持 久 , 5 一 6 小 时 以 后 催化 剂 的 活力 已 不 显著 , 氧 的 消耗 题 著 减低 。
(五 ) 正 丁 胺 催化 氧化 产物 的 钥 定 ”前 人 全 伍 明 以 配 类 物质 作 催 化 剂 -氨基 酸 的 氧
,化 产物 篇 同系 低 一 级 的 醛 ， 靛 红 能 氧化 茶 甲 胺 篇 茶 甲醛 , (ASE -氨基 酸 和 一 般 的 脂
。 肪 族 胺 的 催化 氧化 倚 少 研究 。 我 们 进行 了 正 丁 胺 催化 氧化 产物 的 分 风 ; 间 六 明 了 丁 胺 氧
化 成 丁 醛 。 400 毫克 二 蔡 二 配 、400 VE TET eH 28 VFL MEM 12 SF 10% 醋酸 经 6
小 时 120—130° 加 热 ,同时 通 入 空气 。 从 揭 出 的 气体 中 利用 2,4 — ASE RES 54%
“理论 量 的 丁 醛 2,4 HAFLER WN 硫酸 代替 栈 酸 则 该 中 的 得 率 可 提高 至 67 狗 。
一 99 一
是 -PS 1%
核酸 类 化 合 物 对 CWRBB ABI
KM eee)
ee ae eee:
《中 本 CAAT, te
区 及 Nisman 等 人 的 工作 均 已 表明 ， Sa AEA ERO EROS A
BTW AEMIIODUIL RMA. 本 女 探 用 Lissapol BSA AF AIPA ER ME,
图 探讨 C¥—H APB HB ARR
«KAR Lederberg AEWA Kis pet 生 质 体 ， ave 1* Met,
ROR GEL: ATE H NATE 1p. Mm ASERORTH Lissapol YAR (5% V/V 溶液 2**).
立即 摄 动 , REM SAE 1 SR, RR i 5 一 10 5), GEE 680 my, TEE EASE BRIS
RAR 50% 0 欢心 80,000 2 ,收集 沉 小 部 分 ,再 用 溶液 2 VARIED BE BEVE I, Hie
RAVES 2 ob, GEOR EA SS 3 一 5 毫克 /毫升 。
| JA ae |, ATP, GTP, Me#, 17 种 混合 氨基 酸 ， C4} TRIS Bie:
WEPH TA, 7£ 35°C 保温 二 小 时 和 后, 加 10 多 三 氧 栈 酸 停止 反应 , FR EL
BA, = AAA BE (100°C, 15 A) 及 有 机 溶剂 处 理 , 待 沉 泪 乾 后 , 加 3N NH,OH ©
”使 其 洲 解 ,用 溶 体 杀 样 法 , 钾 曾 型 计数 管 测定 放射 性 强度 ， DAES TRE 455) Gil Cs RAT BK
计算 参 入 活性 。
ESTO RMA KPA CTP RRA RIM, RAF es $RNA 对 甘 氨 ，
， ”- 酸 的 参 太 有 了 时 有 提高 作用 ， 但 不 显著 。 大 分 子 RNA 的 效应 旭 更 不 明 题 。 然而 不 论 是 ，
”8S-RNA 或 大 分 子 RNA, 经 0.3N KOH 水 解 46 小 时 和 后 ,刺激 作用 都 题 落 增 高 , 水解 液
GAT ,刺激 作用 又 随 之 下 降 。 由 於 KOH 水 解 RNA 主要 得 到 2 ,3- 核 昔 酸 ,因此 直 “
接 覆 察 炉 答 酸 朵 甘氨酸 参 入 的 影 兆 。 粘 果 四 种 单 核 苷 酸 ( 腺 , 饲 , 胞 , 尿 ) BEARD ，
刺激 作用 ,其 中 以 尿 喀 啶 核 苷 酸 篇 最高， 有 人 少数 情况 腺 嗓 哈 核 苷 酸 较 其 他 三 者 需 高 。 四 种
核 昔 酸 同时 加 入 ,其 刺激 作用 赣 不 等 於 个 别 核 昔 酸 作用 之 和 。 尿 喀 啶 核 苷 酸 的 刺激 作用 ，
在 加 入 后 10 分 钾 内 已 很 显著 。
BEST A Rt BAIS ere SLANE BERR. RESEDA
抑制。 ae
除 核酸 类 化 合 物 外 ， ae Lea 油 及 6 mer Tee AHEAD, Be
Gale 及 Folkes L(FAHER MBAR L” ROHL, 5 GEE MOREA LTE AE
eat A) CY IRS ABE A PUSS , SEL BI IRS ASAE i , Tel
BFAD Soll FH Be HK ig Be 2.4- HE SAAR BEBE ST EH AAC, N 末端 氨基 酸 ， 分 别 测 定
Fe) fa Fe EAR A TT CGA, HE — A EBS A BH i TH AEA DE EAD READ
* (me 1: yest 0.6 M, TRIS 0.05M, MgSO, 0.008M pH 7.4),
## (Yew 2: 琥珀 酸 0.25M, TRIS 0,05M, MgSO, 0.02M pH 7.4),
= 100
Zea SE Ie oa, a
Nanri arses
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到 蛋白 质 的 肘 链 中 。 ‘
RIEL) Lissapol REA Ce MUA STO BUALN AS A CROMER LU,
Se MER DLA UE NBER iH 5 MC RJ MO LE SCA oa
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Ba, Sea GUE DUE ard é Ex
Eee = 威 正 起 ee
(中 国 科学 院 生物 化 学 研究 所 ,上 海 )
在 各 种 豆 类 植物 的 种 子 中 都 合 有 很 个 富 的 胰 蛋 白 酶 抑制 章 ， 而 一 般 又 包括 对 热 不 种
定 ( 在 25% TCA 80°C 下 加 雪 5 分 钾 ) 的 大 分 子 租 份 分子量 狗 20,.000 左右 ) UAE
定 的 小 分 子 组 份 (分 子 量 少 从 10,000)。 前 者 如 大 豆 (Kunifz，1945); 洋 局 豆 (Tauber ha,
1949) PABA CAR A, RAVER IT AN
Fk ST) AE BHA TEREST Rho |
HRIAD BEBE ERTL PAD TRE AMS MI
PAR DP OARS Hh, PRG CZ TA UY, HE — 2 On Da os
HERS CLM EI 0.25.N -HSO, ZEA Fae, BEDIOR, WM TCA”
2.5% SE. 离心 去 沉 泪 ,清流 调 DH 至 5, 加 固体 (NH,)2SO, % 0.75 他 和 度 。 BURR
之 沉 泪 对 1.5% NaCl pH 7.5 0.05 M 磷酸 线 衙 液 透 析 ,透析 后 之 清 液 加 等 体积 5% TCA
Fe 75°C 下 加 热 5 分 钾 , HGH. 去 沉 泪 后 之 清 液 再 以 0.75 fuAN (NH,)2SO, IR,
滤 人 饼 溶 认 三 倍 水 对 0.005 M pH 7.8 REGIE, 然后 用 DEAE MeO RD BL
0.015 M;0.12M & 012M 中 合 有 1M NaCl & pH7.8 BREA RAT RUE. FER .
— 三 洗 脱 液 中 得 到 具有 了 胰 蛋 白 酶 抑制 剂 活力 的 室 形 。 将 具有 活力 的 洗 腕 液 合 供 省 料 合 再 用
|. DEAE 粹 锥 粉 吸附 , 沙 用 梯度 层 析 法 洗 胶 , 洗 觅 液 分 别 坊 03 M NaCl+0.01M pH78
BRM 1M NaCl + 0.075 M pH 7.8 磷酸 组 竺 液 。 二 者 都 得 到 层 析 范 的 高 活力 制
| Ho FAIRER EVERETT RHO MLO A MERE (1% ihe BE) 对 0.01 M pH 5.4 RAMA MAGE
析 , 在 OC PREMABMSDGE RE ERSTE 100. HR
Velie FAR B RUA, WA 0.35 亿 和 (NH,).SO, pH 5.5 0.1 M MARE AME :
Br HE 5°C 下 放置 24 小 时 , 即 得 8 FIRES, EMEA TR LW) 150 毫克 。 !
MG A, BAAR EE LAAT Fl. RATTLER DHS 的 水 溶液 中 , BER ;
AMT. HE PH 4 时 , 0.35 角 和 的 (NHy)2SO, RETR. Hi BBM KAM
度 很 好 (pH 6 以 上 ) 在 较 高 的 他 和 (NH.)2SO, EE FREI
分 别 测定 了 抑制 剂 租 份 A, BRERA GRAD (RE) 和 小 分 子 底 物
( 茶 甲 酰 精 氨 酰 胶 和 对 甲 基 茶 磺 酰 精 氮 酸 甲 酷 ) 的 抑制 活力 。 在 固定 胰 蛋 白 酶 江 度 下 (用
标准 胰 和 蛋白酶 活力 单位 核 正 ) 加 不 同 量 抑制 剂 , 当 抑 制程 度 在 80 多 以 内 时 ,都 是 等 当量 抑
一 101 一
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Hil, BEIECREBA GR. 即 此 时 Ki 4 BeHSIE JSR Als RE SMR BE EAR ACIRE , SN Be E
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底 物 Te NS eee See eS
A B A. B
K # 8 13.7 | 1:45 | 1:3.0 :3.3 | 3.5x103 | 3.7x10°
ZR MAR | 1:42 | 15.4 | 1:3.5 :3.9 | 1.8x107 | 2.6x107
By AJL SE GBS A FH AS 1:4.6 1:5.5 1:3.5 :3。 0.7x10 | 1.0x10-
根据 以 上 在 等 当量 抑制 时 抑制 玫 与 酶 量 的 重量 比值 中 推算 称 豆 中 二 胰 蛋 白 酶 抑制 齐
的 分 子 量 狗 分 别 6000 及 5000 左右 。
与 其 他 胰 蛋 白 酶 抑制 剂 不 同 的 是 : be ep AS OUEST
胰 凝 乳 蛋 白 酶 水 解 大 底 物 都 不 抑制 。
猪 羊 胰 贞 中 若干 蛋白 水 解 酶 的
Poh, Hie
ER SRE SAE
(RAS be eee dh 上 海 )
ESR Kunitz 和 Northrop 等 自 1935 年 以 来 隆 蒜 从 牛 胰 碳 中 提取 各 种 千 晶 蛋白 水
ig: 胰 凝 乳 蛋 白 酶 A, B, PRAM, BKM A, B 以 及 它们 相应 的 酶 原 , 但 相同 的 拖 提
方法 薄 不 适用 共 其 他 的 哺乳 类 动物 ,因而 迄今 未 全 从 猪 . 羊 胰 及 中 得 到 上 壕 各 种 和 相 朵 的 烙
晶 蛋 白水 解 酶 ,虽然 有 一 些 酶 已 补 纯化 。 我 们 用 简便 的 方法 从 猪 羊 胰 有 中 提取 若干 灶 唱
EAT, GME IRR PBS MAHAR EEA
WATE DERE, SEED AAP AB RUSH 0.25 N H,SO, 抽 提 , 过夜 后 ,滤液 取 02
—0.5 蚀 和 (NH,)2SO0, ITB. WG YARS Hi 001M pH S MRR MGMGET.
REM TAK (GIR A) MEDIATE, HAH 0.6 fA (NH,).SO, TR. 泪 饼 深长 三 倍 “
水 中 ， 加 角 和 (NH,).SO, 溶液 至 0.25 FANE, HH DH 至 6, HWA Pw (25—-30°C)
释 12 小 时 和 后 即 出 现 烙 晶 , 二 ,三 日 后 粘 晶 完 至 。 烙 晶 即 篇 类 胰 凝 乳 蛋 白 酶 A, 每 公斤 胰 及
G5 4 35 ME KBE REERD IG 3.1, 25 jk 2.24, {AMES HERE HI IEAGE TS 0
类 胰 凝 乳 蛋白 酶 A Heth BA DH 至 3， 即 有 沉 溅 (I) 生成 ， 过 滤 收 集 。 滤液 "
— 102 一
)
Pe tc
用 0.8 他 和 (NH,)2S0, VOIR, IRE (II) ， 溶 於 十 倍 水 , 再 加 固体 (NH,)280, 至 025
POAT p 了 至 3, 可 得 第 二 鼠 少 量 沉 溅 (I) MAAS BE, AOI AMS AMEN (T) A?
BAB HEE CID IR 04 MX ?H 9 RRR BBE 5"C Bi HAT A
% Hi, BD DURES A Re B, 产生 每 公斤 猪 胰 狗 3 克 。
将 三 次 合 儒 后 之 沉 泪 (IT) 溶 於 二 倍 水 中 ,对 DH4. 5, 0.01 M 含 0.25 角 和 (NHs)2SO4
的 醋酸 绥 征 透析 ,在 5"C 处 放置 24 小 时 , 即 得 司 晶 蛋白 ,产量 每 公斤 猪 胰 狗 0.3 克 其 活力 ，
RHEE, 但 不 具有 蛋白 水 解 酶 CE WME, DNAse, RNAse, 胰 蛋 白 酶 抑制 齐
的 活力 。
RAVI, WH 0.7 他 和 (NH4)aSO, WH, 0.2M pHS8 含 0.4 他 和 MgSO, 的 确 酸
Wise eg ee ee area
3 F “
EMME TE 5—10°C REA 24 小 时 ， EDS Bl fei tn BE A ie EE Hr DOR 0.4 Fo HL
TEI RE MEE, WE BK PETE Ho
HEIR OE (IL) WSK, 加 等 量 5 多 三 氧 乙 酸 , WH 80°C Ap MF 5 分 链 ， 立即
WAL AVR. Wate DH3 下 用 0.8 饱和 (NH4s)2SO4 IR, HERA, EE
ii PS PHS.5, 0.25 饱和 (NHi)2S04 透析 ，24 MFR AN TE Hh A, 产量 每 公斤 猪 胰
#1 0.3 io FUGA ASAE A ARE A Bil AS J o -
用 相似 方法 亦 从 羊 胰 中 得 到 糙 晶 胰 凝 乳 蛋 白 酶 ,但 所 得 的 是 酶 原 。 在 PHS 下 可 用
3 APU Bie Bh BABE 产量 每 公斤 羊 胰 狗 2.5 Foo |
epee
PEL FA BR ih eZ BEB 0.7 饱和 (NH) 2SO4 Pr. VRBFHE PHS, 0.2M
& 0.5 #4 MgSO, ET ee BT IK He » BUGS By aE A ee IR saiiasaabhc Sik 2 Flo
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分 别 测定 了 重 辕 晶 多 次 的 猪 类 胰 凝 乳 蛋 白 酶 A,B , 羊 胰 凝 乳 蛋 白 酶 和 胰 和 蛋白酶 的 活
力 。 大 底 物 乱 酷 蛋白 ,小 底 物 分 别 筷 葵 甲 酰 酷 氨 酸 乙 酯 和 对 甲 基 葵 磺 酰 精 氨 酸 甲 酯 , 冰 和 与
相对 应 的 牛 胰 有 矶 中 蛋白 水 解 酶 相 比较 。
“在 我 们 工作 和 糙 束 时 看 到 新 来 期 刊 “Arch Biochem & Biophys 97, 217, 1962 中 ，
Ihavis J. 和 Liener I. E. 的 有 关 猪 胰 蛋 白 酶 千 晶 的 简讯 。
— 103 一
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将 泪 饼 (IT) 以 25 pO 0.5M HCl yf, Fe 90°C 下 加 热处理 45 Bb, Ye BD AGS, 3h
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与 其 生物 活力 的 关 傈
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| 许 根 俊 。 RARE
《中 国 科学 院 生 研究 所 , EWE)
Sven seo HR Liener FiSEZBEE DH 7.6, 8 M WEY, 5 OU a
BE, BA RBI, EA) ASE, (RARE Hy BO He BE A ES
， MRAP AG ARO BRE =. MEEK SRR
来 解释 ; 即 (1) 在 Liener 所 用 实验 条件 下 有 硫 硫 键 的 交换 反应 ; (2) 胰 蛋 白 酶 是 以 三 聚
MCRAE > 此 外 琢 乙 醇 除了 还 原 硫 硫 键 外 也 可 能 从 有 其 他 作用 点 。 我 们 用
比较 专 一 的 态 硫 键 试剂 亚硫酸钠 在 对 氧 秒 共 甲酸 存在 下 破 朗 硫 硫 键 ， 由 大 对 氧 东 茶 甲 酸
AEE REALE CMER TSAR, le a
SETH BAPE ANIE Fy BY BAK 0
REAP ES aD BRIE, EDGE FE pH 6.3, 8M Vere ees ee
WRF DEES Ay YE AY BA a BEAD HE A ES EE NT RB NK A
下 进行 , 分 别 在 DH 6.3, 8 M IRR 0 度 及 28 EVRA REE. TE
21 Bi A SE 9 LBS LE A PERL A FSP AAP BP
ARMED ,都 得 到 Va RIOR AMR. AA b= eR ONE
RIE BATH. | 比较 0 度 与 28 度 得 到 的 结果 可 以 看 出 0 度 当 3 BE
基 出 现 Ma = 0, ii 28 EF 6 RH Va = 0。
上 面 的 烙 果 表明 在 我 们 的 实验 人 条件 下 , 必需 的 硫 硫 键 数 是 3 而 不 是 1 aes 人 部 更
RIES HEE CHE 0 及 28 度 分 别 篇 3 及 6。 0 度 和 与 28 度 不 同 的 烙 果 襄 明 在 0 度 时
可 能 有 两 类 具有 不 同 反 应 速度 的 硫 硫 键 ， 其 中 易 於 反应 的 三 个 是 维持 活力 所 必需 的 。 28
度 的 结果 表明 在 0 度 不 易 反 应 的 三 个 奈 硫 和 亚硫酸钠 作用 的 温度 傈 数 较 大 ， 当 温度 上 升
时 反应 速度 增加 较 快 ， 在 28 度 时 所 有 的 硫 硫 键 对 亚硫酸钠 的 反应 速度 大 体 相 同 。Sanger 了
Bi Jensen 等 指出 在 pH 近 中 性 的 溶 流 中 青 基 的 存在 能 促进 硫 硫 键 交 换 。 Liener 用 8 ，
M 脲 素 和 过 量 的 硫 醇 来 还 原 胰 蛋白 酶 正 是 应 用 了 一 个 有 利 於 交换 的 条 件 , 可 以 想像 当 一
个 必需 的 硫 硫 键 被 破 壤 时 ,另外 两 个 必需 的 硫 硫 键 已 经 因 篇 交换 而 发 生 了 孝 化 ， 就 会 出 更
Vo 和 与 允 基 成 直线 天 傈 ,和 当 一 个 硫 硫 键 被 破 壤 活力 全 部 瑞 失 的 结果 。
另 一 方面 从 胰 蛋 白 酶 三 种 具有 代表 性 的 活力 和 硫 硫 键 破 壤 的 关 傈 一 致 性 来 看 ， 胰 蛋
白 酶 对 於 三 种 不 同类 型 的 底 物 的 作用 中 然 也 漫 可 能 有 不 同 的 要 求 ， 但 对 礁 催化 过 三 种 底
物 分 解 所 要 求 的 容 间 构 型 却 是 一 致 的 。 如 果 能 进一步 肯定 必需 硫 硫 键 的 位 置 ,将 会 对 胰
.蛋白酶 活性 中 心 窑 间 构 型 的 了 解 提 供 有 用 的 知识 。
一 104 一
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| 活力 的 影响
BARE RES 许 根 俊 AE
Ch BB been LSA, 上 海 )
证 ” 徐 改 释 的 侧 链 基 团 炉 数 的 测定 ， 钊 断 蛋 白质 的 必需 基 团 数 。 此 时 如 果 所 用 试剂 含有 发 色
a PER MOAB By HEI RICANS 0 HE BUN 2 Rah , REAR |
| EB, RAT MT LINE. EAA RUE
， 蛋白 搓 倒 链 基 男 的 改 帮 上 。) RAE OLA OO BE OA
HA, BRL P- 确 度 -本 -省 代 葵 乙 酮 (NBAP) 对 准许 多 蛋白 质 的 生物 活力 有 明显 的 影响 。
。 。 RPOIUE HMR NBAP, 79.M 在 DHS, 37 度 保温 一 小 时 和合 ， 酶 活力 受 抑制
上 90 多 左右 。 如 果 在 酶 与 NBAP 共同 保温 时 ,同时 合 有 胰 凝 乳 蛋 白 酶 的 吝 征 性 抑制 剂 ,二
ER, 17 mM 时 抑制 程度 即 降低 至 45 狼 左右 。 散 委 性 抑制 剂 二 氨 肉 桂 酸 的 题 著 保 久
«tei, StH NBAP 可 能 作用 大 了 酶 的 活力 中 心 上 。 NBAP 对 木瓜 蛋白 酶 的 抑制 更 是 十 分
SE, EAN BES 1M, 与 酶 当量 时 ,在 DHS 保温 个 小时， 虽然 有 过 量 牛 胱 氨 酸 存
在 , 酶 活力 受 抑制 也 沁 到 90 允 左右 。 对 於 核糖 核酸 酶 NBAP ey iil KACZOR,
‘BEL MEPES 6 mM 的 NBAP 在 pH 7 保温 1 小 时 和 后 , 活力 受 抑制 各 99 儿 以上。 胰岛 素
| 奥 6mM NBAP ff pH8 作用 3 小 时 后 其 活力 也 受 抑制 70 多 一 90 多 。 当 NBAP Bie
， 洗 我 蛋白 酶 或 胰岛 素 作 用 和 后 ,其 光 吸 收 性 质 发 生 改 屡 , 差 吸收 高 内 分 别 在 355 及 380 mr。
| 胰 凝 乳 蛋 白 酶 活力 的 降低 与 355 mp 不 光 吸 收 的 增加 成 平行 天 傈 。
从 以 上 千 果 看 来 NBAP 是 一 个 有 希望 的 改 公 蛋 白质 侧 链 基 团 的 试 坤 。 其 作用 方式
时 可 能 和 省 代 乙 酸 有 某 些 类 似 之 处 。 荡 且 根据 上 述 四 种 蛋白 质 的 氨基 酸 租 成 和 与 NBAP
re BS CHAE A wll SAPO A, Ae — AL Ws RBS PT EE Fh o
< 105 -一
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在 过 量 肯 基 化 合 物 存 在 时
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( 中 国 科学 院 生物 化 学 研究 所 ， LYS)
EA LE SEE CSE ASE LE, HAASE SO PE, ABH
ENE. — ALO FIRE: SRT, BLUM EE RON ATE
| POAT MELE IE BG BL, TT RE HR
A ASE EK ee ET SFE BL -证
我 们 首先 观察 了 茶 醒 和 歼 基 化 合 物 如 乙 歼 醇 、 屠 基 乙 酸 、 谷 胱 甘 肽 、 SLE ee
的 反应 情况 。 在 pH 5 的 甲醇 水 溶液 内 , 茶 醒 和 它们 有 当量 加 成 关 傈 。 Mmm
420 mp 左右 有 一 新 的 豚 收 案 。 在 同一 测定 条 件 下 吸收 党 高度 和 此 产物 淡 度 的 关公 符合
_Beer's 定律 。 改 公 测 定时 的 系 迷 会 对 此 吸收 滨 位 置 及 高 度 发 生 影 响 , 在 pH 5 的 甲醇 、
水 溶液 中 甲醇 滤 度 越 大 吸收 罕 越 高 , 在 75 匈 甲醇 溶液 中 比 在 无 甲醇 的 水 溶液 中 ， 消 光 剑
数 (415 my) 要 增高 20 匈 左右 。 水 溶液 的 酸 瞪 度 对 高 罕 位 置 及 形状 有 更 大 影响 , SE
乙酸 - 蔡 醒 加 成 物 的 吸收 宗 位 置 在 2NHsSO, 中 在 405 一 410 my; 在 PHS PURI 420—__
425 mw 且 形 状 比较 突起 。 谷 胱 甘 肽 - 葵 醒 加 成 物 在 415 mw 波长 。 在 PHS. 75% WBE
溶液 中 和 在 18 N 硫酸 中 的 毫克 分 子 消 光 傈 数 分 别 乱 2.7 mM-: 和 二 9mM-:。 不 同 的 足
基 化 合 物 与 蔡 醒 和 结合 后 吸收 宗 位 置 与 少 光 傈 数 大 致 相同 ,在 1S NV 硫酸 中 戎 在 425 mp Fe
Fic TEDL WEF SADE IE WUBI A BE. 8 GB OED. AA OO aa
FRA S A PIRI 1.9 mM,
GRAAL By AN Ze ES BCE EE AK Be CRE BS Ye PE Bi AL Ast SB AES
BAPE EE URE J ZA SEMI VIA EAR YAK, BRIE RPS I EES
BEAN, PRE HN YER CBE, TAC HA AD BLS Se UE BY MA ERC. FS SEE
AVE E A ASR RMREILE DY, WRLC, BRR BE, 即
Fe TE CAE TE I A RL IC ME, PAVE IR, CER HAE
蘑 醒 加 成 物 、 二 次 甲 基 二 硫化 物 以 及 过 量 的 葵 配 ,而 蛋白 质 青 基 和 与 蔡 配 所 生成 的 加 成 物 则
留 在 水 溶液 中 , 即 可 以 用 上 述 比 色 方 法 测定 。 根 据 过 一 原理 ,我 们 首先 测定 了 奥 过 量 还 基 二
乙酸 同时 存在 的 还 原型 谷 肛 甘 肽 ,得 到 的 结果 与 后 者 单独 测定 时 完 至 相同 。 放 用 此 法 测
Fe FAB Es 20 倍 甫 基 乙 酸 在 37 FE PHS 8M IkKRARBRAR At, rR aE
胰岛 素 三 个 硫 硫 键 在 10 NE PPT De A BS SEES
蒜 柄 - 青 基 乙酸 加 成 物 经 过 分 万 提 和 纯 , 可 以 在 甲醇 中 得 到 长 名状 黄色 烙 唱 。
( 埋 沾 元 和 张 廊 淋 同志 参加 部 分 工作 特此 和 致谢)
一 106 一
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Be i. 党， TBR =A gen
Aa 下 (中 国 科 间 院 生物 化 学 研究 所 ,上 海 )
， “Drescher SERIREINEAESRNEN, ShcA IR RMI LALLA
| -6- 二 磷酸 分 解 的 活力 圳 失 了 93 多 ,而 催化 果糖 -1- 磷酸 分 解 的 活力 不 受 损失 。 ALP
RAG LTS REE hah A PEER
| AERASTACREC AREA, RAAT
-6- 磷 酸 所 抑制 ，Ki 一 co, StH MEARE Las AIBA ARB URI BUSES T ALSRE-6-R
酸 糙 合 的 能 力 。 HEA PRP BUS) Ey RE 1.6-— BRE REEMA SERIA BK,
FABER RB AS A ERO Eh BN, 酶 通过 它 和 底 物 果糖 -1.6- 二 磷 ，
， 酸 及 散 符 性 抑制 物 果糖 -6- 磷 酸 分 子 上 的 -6- 磷 酸 部 分 类 合 ， 过 个 千 果 不 支 持 Mehler 提
册 的 底 物 通过 酶 分 子 上 碱 性 基 围 与 酶 千 合 的 假说 。
| 利用 竺 承重 新 近 提出 的 计算 必需 基 团 的 方法 计算 ， es = R=
个 是 栈 的 活性 中 心 。
es
作用 的 利 步 衣 完
RR BPR
(中 国 科学 院 生物 化 学 研究 所 , 上海)
ALBEE FR es IF SEE. Bergmann 及 Frnton 等 以 部
| Peg bli A> GIO eB Ue 8 UE, 4H A PSE DA OE KP
ABAREGMA, B,C UMW ARARAM, 甘氨酸 三 肽 酶 等 ， 在 全 胱 氨 酸 存在 下
AEE AG AK ARE. HSI Press 报导 从 和 牛 脾 中 分 离 出 蛋白 水 解 酶 D 类 ;
Lewell 也 和 发现 有 需要 牛 胱 氨 酸 激活 的 次 肽 酶 等 。 看 来 组 织 蛋 白 酶 可 能 不 止 目前 已 知 的
| HAE. | ee
)- RMSA ALE DH 7.8 及 后 胱 氨 酸 存在 下 能 催化 白 氨 酰 胺 的 聚合 作用 ,反应
TRA AURA, AMAR CTR. WEIR, Be BE
HOC RRARR. 聚 白 氨 酸 的 分 子 量 在 1700—2000 左右 。 聚合 物 不 溶 认 水 , 酸 或
时 琶 及 一 般 有 机 溶剂 ,但 可 溶 於 苯酚 或 甲 酚 。 从 氢 欢 子 省 度 的 影响 看 来 ，p 了 6 一 8 范围 内
BRACE ARR TEA ee ene see WER PARA
— 107 —
ANTE Jal. BURIAL, DHL, 温度 等 不 同 因素 对 催化 白 氨 栈 胶 萌 合 作用 和 对 已 知 的 朝 糠
EAMETS ETE, “PNR REL ET
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许 根 俊 。 孝 承 鲁 ee
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Jé# Michaelis-Menten tO BBE Nie Fv Ama, 形成 _ 个 中 间 物 : em i
制剂 存在 下 的 动力 学 方程 已 见 於 Botts 与 Morales AyHES. BH—SEA MMOS ，
蛋白 酶 、 胰 蛋白 酶 、 木瓜 蛋白 酶 及 乙酰 胆 龄 酯 酶 ,有 六 据 认 怖 它们 除了 生成 米 氏 猪 合 物 以 “
“外 , 傈 存 在 有 酶 酰 化 中 间 物 。 篇 了 适应 过 一 类 的 情况 ， A 4
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A tt 钙 二 奏 情 况 则 有 K! = oo， 根据 雪 力 学 的 要 求 必
AX = co, Kh 和 Ko 一 0 或 Ko = 0。 事 实 上 Ki 和 Ky 都 不 能 满足 此 条件。 因此 ，
这 两 种 情况 都 不 能 成 需 1/V 对 1/S 作 图 有 简单 直线 关 傈 的 依据 。
> IVS LVS 作 峰 有 简单 直线 关 傈 ,而 且 又 不 是 葛 委 性 抑制 ， 最 可 能 的 情况 邮 须 是 :
4 区 = Ki， 也 就 是 ks Kk. FE ks < ks FF, BEATING AER
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利用 放射 性 COPD
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mule & eudrcvi ristention sarevoland) 大 司机 和
小 时 后 显著 增高 。 USERS MRE DM OMAR, IIA RRR
种 不 同 的 类 型 ee
ep Sas il BRIE, Horton, Feigelson, Donald SAH GER
MLO RS EMAL TIPS RIM. 但 近年 来 Greengard 等 (1961 4¢) 发 】
HB 5 A SL ORO RE, LA PST OR IEE DE BSI 从 而 提出 了 ，
-. 辅 基 激活 的 作用 机 制 。 而 Pitot 等 (1961 年 ) 通过 体外 研究 讽 坊 基质 升 高 色 氛 酸 吡咯 酶
活力 的 作用 是 一 便 依 顿 能 量 的 过 程 。 先 前 Ecbumouknna 亦 便 报 轩 肝 切片 的 色 氨 酸 吡咯
酶 基质 评 导 可 被 能 引起 氧化 磷酸 化 解 联 ， 但 不 影 池 呼 吸 的 过 一 省 度 的 二 确 基 酚 所 抑制 。
在 激素 方面 ; Goodlad 及 其 同事 (1959 4) SRE SACRA ERR RZ
依 屯 於 食物 中 能 量 的 插入 水 焉 。 eh
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SPIE MS AeA ATP-ADP EERE. REE ATP-ADP 不
ASE DAIRY PHO RAO T SE
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将 成 年 .同性 、 体重 在 140 一 180 MARR RANA, PECL
物 在 条 死 前 一 小 时 或 四 小 时 腹腔 一 砍 注射 醋酸 皮质 素 (5 毫克 /100 克 体 重 ) 以 及 在 不 同时
关 腹 腔 注 射 NasHs?PO4 (20 微 居 里 /100 克 体 重 ) 一 灵 。 光 照 组 除 腹腔 注射 05 毫 升 生理
茵 水 以 代替 皮质 素 外 ,其 它 处 理 均 与 诈 遵 租 相同 。 两 组 动物 均 经 存 食 20 小 时 。
根据 文献 疼 料 ， 在 正常 融 物 ?? 磷 进入 肝 亲 胞 后 即 非常 迅速 地 参 入 到 ATP-ADP 的 ，
不 稳定 磷 基 团 之 中 ,在 数 分 钾 内 即 和 与 肝 帮 胞 中 的 仿 机 磷 -3?P 渤 到 平衡 。 因而 在 当前 的 实 ，
验 条 件 下 不 能 用 ATP-ADP 的 相对 比 放射 性 过 一 指标 来 刊 断 ATP-ADP 更 新 速度 的
BL. 本 文俊 测定 了 肝 ATP-ADP 不 稳定 磷 和 酸 溶性 炉 磷 的 比 放射 性 (AAR S.A),
然后 根据 计算 得 到 肝 ATP-ADP 7K RIE DEY ADH A COR. A =
ATP-ADP AB Face BRAN WR B/S) [oe ATP-AD aa yA '
ORG E/ AH) ATP-ADP KERMAN S.A URI
一 110 一
ATP-ADP 不 稳定 磷 S.A
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HS 之 比 (in Rs. PR TEMOE S.A )
ATP-ADP 的 分 离 是 探 用 Fiske (1934 年 ) 提出 的 木炭 吸附 法 略 加 修改 。 所 用 木 ，
pas E. Merck 制 ， 东 经 菩 明 吸附 性 能 和 良好， 吸附 这 在 80 多 ， 洗 觅 液 改 用 稀 三 氧 醋酸
和
ATP-ADP 不 稳定 磷 用 1N HCl # 100°C 水 解 10 eR epic bs Kut-
于 tner 7 Cohen 法 进行 测定 。
go “ 取 放 射 性 样品 0.2 毫升 铺 帮 口 碟 , 烘 茧 os Fk ene wl ae (复旦 6021) 64
LEAR THER TRO GEESE RRA 57 0 ANE —RAE 20 左右 。
sR R
Het PE Re — ASEAN Ann LIF 性 煽 磷 和 ATP- ADP 不 稳定 磷 放 射 性 的
SEC ZER AAR. 1, 其 动 紫 磷 化 由 图 1.2 中 表明 (图 略 ) 。 由 表 工 及 图 工 中 可 看 出 请 游 租
天 忌 趟 芥 在 皮质 素 注射 后 一 小 时 或 四 小 时 其 ATP-ADP 不 稳定 磷 的 S.A HE REA
60 FP SNES HAS PRM WA TR RTE OBRTE AG 120 5) ELI SEAL BBA AA PE,
LAE BRE A 4% 240 SB, 四 小 时 诱导 组 动物 的 肝 ATP-ADP 不 稳定 磷 8. A 亦 较 对
RSIS MIR, LB BILE se BES Pe PAN Ps RIL A ML, ELLE Ls SE
FY(P> 0.05). MAYA EAR S.A HEALD MEAL. HB 2 中 所 显示 出 的 在 9” 磅
注 六 不 同期 间 ATP-ADP BEBE R. A HAIL ATP-ADP RERIEDES. A 之 赤 化
AR, 此 外 和 从 表 2 中 可 看 到 肝 ATP-ADP AMAA “BHEAT AMM
半 租 多 数 均 比 对 照 组 篇 高 , 按 平 均 合 量 计算 , 在 皮质 素 作用 四 小 时 时 增高 甚 坊 明 题 (P<
0.05 接近 0.01) 。 酸 溶性 炉 矶 合 量 在 诱导 组 由 亦 比 对 有 照 胡 稍 高 ,但 冰 无 显著 差别 。 以 上 烙
林 表 明 在 输 予 大 忌 注 射 皮质 素 后 一 小 时 ,尤其 是 四 小 时 当 色 氨 酸 吡咯 酶 生成 旺盛 星 , 肝 合
磷 高 能 化 合 物 的 代谢 有 些 女 化 趋势 。j SLMS RM Bia mea RR
的 可 能 性 。 固然 在 没有 无 机 磷 8. A 的 情况 下 ，ATP-ADP AAREREY S. A 向 可 反映
无 机 厚 进 大 肝 下 胞 的 速度 ,但 由 ATP-ADP 不 稳定 碍 R.A 的 爸 化 来 看 , 后 种 可 能 性 较
水。 划一 见解 是 与 Derahe 等 (1957 年 ) 利用 “了 矿 研 究 皮 质 素 对 避 上 腺 皮质 切除 大 鼠 计
ATP 合成 的 影 玫 中 发 现 有 明 题 的 加 速 作 用 是 相 一 致 的 。
此 外 RS.A GRE RALANRHIRALZ AEE, ARE REN S.A. 包括 肝
HIE AML AH S.A, 所 以 它 指出 皮质 素 对 肝 ATP-ADP 的 稳定 磷 和 其 它 酸 浴 性
磷酸 酯 类 的 代谢 没有 题 著 影 澳 。
皮质 素 对 区 肝 中 合 磷 化 合 物 的 作用 趋势 ， 使 我 们 相信 皮质 素 促使 色 氨 酸 吡咯 酶 活力
的 增加 是 一 个 依靠 能 量 的 过 程 。 根据 Greengard (1961 年 ) 等 的 意见 , 皮质 素 的 作用
是 促进 肝 中 色 氨 酸 吡咯 酶 酶 蛋白 的 合成 ,而 Goodlad 等 (1959 年 ) 全 发 现 皮质 素 引 起 肝
ZARA HMSO RAY PRE REA ACE, SRBC ch ORES BTR HE
PACA, RST RIPE AMA
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二 些 阻 止 含 磷 高 能 化 合 物 的 物质 作 较 深入 一 步 的 探讨 。
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”大 自 筷 注射 皮质 素 知 肝 糖 元 遇 生 作用
人
wee 指导 人 : 张 惠 珠
“上海 第 二 医 和 院 生化 数 研 租 )
My “二 十 多 年 前 Long SA LARA BLE HAL ESL UR ROR e
糖 元 沉积 ,从 而 指出 过 大 动 物 的 蛋白 降解 和 糖 元 新 生 之 间 的 密切 关 傈 。 和 后 来 许多 学 者 的
se 碍 由 Silber 等 (1953 年 ) 性 明 皮质 素 特 别 能 促进 肝 外 蛋
A (肌肉 蛋白 ) 的 降解 。 近 类 年 来 Rosen SA SSUES MONIT ATM (GPT)
活力 有 特 轴 的 增高 作用 ， 降 床上 亦 看 到 接受 皮质 素 治 疗 的 病人 和 柯 典 氏 症 患 者 血 中 丙酮
机 西 转氨酶 活力 ,使 大 量 生 糖 氨基 酸 转 磷 成 三 败 化 合 物 ( 丙 本 酸 、 乳 酸 ) 供 作 新 生 糖 元 的 原 ，
Bo 但 另 一 方面 ， Engel (1950 年 ) so SRR BLA SRE 3 小 时 内 不 能 促进 蛋白 质
降解 ，Hess 等 人 (1957 年 ) 认 篇 皮质 素 不 能 促进 三 炭化 合 物 直接 形成 糖 元 。 Long 等
a se (1960 年 ) fe SEBS EE Oe AS BSTC BE HO TJ La
用 。 Me Rt 包括 新 生 糖 元 之 来 源 以 及 它们 的 作用 点 问题 是 值
BEAT RON. p
ARBRAMMMAAMES— AAR AIGEN ITE fn aR
JAF JULAS PSR RTE JO BE AL GH A UA GR, DIR Be PSO a
i ARE 140—180 克 ， PERE BEEE .随机 化 分 得 。 一 组 实验 动物 答 以 一 次 腹腔 注
， 射 栈 酸 皮 庄 素 (Cortisone Roussel) 125 毫克 /公斤 体重 , 一 组 对 照 动 物 腹腔 注射 同体 积
1 生理 业 水 。 所 有 动物 均 蕉 禁 食 后 24 小 时 末 死 作 各 指标 测定 ,但 动物 注射 皮质 素 时 间 分
4 批 篇 禁 食 和 后 第 21, 19, 16, 8 小 时 ,使 各 批 动物 机 死 时 间 篇 注射 药物 后 第 3, 5, 8, 16 小 时 。
LRA APARREH Wie Tonhazy 等 (1950 年 ) 比 色 法 改良 ， 改 良和 后 使 空白 颜色 沽
DE, RNB AR 8, 血 丙酮 酸 测定 按 Friedemann (1943 年 ) 比 色 法 改良 。 肝 糖
元 定量 用 Vanaer Vies a 年 ) FIEW EH = AAR HEIL
a 和 结 果 与 讨论
RR I.
从 表 列 可 见 :
LAR EEST RUSE 3 小 时 和 后 肝 糖 元 升 高 已 连 非 常 显著 (P<0.01) 此 时 伞 有 血 丙酮 酸
本 全 量 显 车 降 低 (P 一 0.05) ， 但 肝 糖 元 於 注射 后 第 16 小 时 仍 厅 持 蕉 高 水 平 , 而 血 两 醋酸 含
本 是 从 注射 隔 第 5 小 时 起 相反 题 著 增 高 。
; 一 113 一
RANA AE FUL WP ARO RARER IRATE
: WISe ERMA ARIS. PSS MOE.
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(RF | age (mg/g) | P| sea | Gng/t00 mi amy | * | P
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3 8 0.41+0.32 3.660/<0.01| 8 —1.36+1.27 |8.042/<0.05
5 5 1.41 士 0.48 “| 6.831|<0.oi 8 0.98+0.65 ”|4.298|<0.01
8 4 20.69+3.97 10.396|<0.01| 7 1.27+0.94 3.628 |<0.05
16 8 6.73+5.68 3.365|<0.05| 8 1.8441.60 | 2.380/<0.05
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pg | | 值 ae oe 增 & ff 是
对 数 | (mM PA/g/hr.) 对 数 | (mM PA/g/hr.)
3 8 0.06+0.43 0.026+0.21 | 0.11 |>0.05
5 10 2.18+1.97 3.499 |<0.01| 10 | -0.021+0.21 | 0.31 |>0.05
8 - 7 1.58+0.92 4.579 |<0.01| 了 0.061+0.16 1.00 |>0.05
16 8 1.84+2.66 1.965|>0.05} 8 一 0.070 士 0.25 | 0.77 |>0.05
a: * mT:
x = Bh - Xs) ths (2s 2
Xi = 注射 皮质 素 动物 指标 测定 值
Za = 注射 生理 多 水 动物 指标 测定 值
Xi=X,—- Xs ert
ne = 所 用 动物 对
* AU t = S_
2. 肝 谷 两 转氨酶 活力 在 注射 BATE th 5 NEBR, = 16 SE A |
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3. MLAS TSIM 1 CE PLR 6 小 时 内 无 是 革 帮 化 。
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AMR MAMA BRE BA TS PLe RR Mc. AE
WA EAE ESN FA a WF ELA ALS A IL
TTD Ee FZ ES PR EO SO PERT |
并 芯 皮 质 素 对 新 糖 形成 的 作用 点 ， 我 们 如 需 可 能 作用 姑 丙 醒 酸 合成 将 元 的 过 程 中 的
某 些 有 关 的 酶 系统 , 改 磷 了 它 的 活力 或 组 合 情 况 , 所 以 促进 了 该 反 巍 的 进行 ,而 在 肝 谷 两 ，
转氨酶 上 升 。 血 丙酮 酸 量 上 升 后 ,由 从 大 量 基质 存在 ,使 上 述 反 应 更 篇 加 速 。 至 套用 谷 两
转氨酶 活力 卉 高 的 现象 , TY A BS eS» 2
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—114—
应 用 SF eS RA IN eG
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Wes RH Le METRY RIK BA MIE BR ER o
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1, JEARBRML 12 只 。 取 其 中 6 BER AS Mh DLS EM) 1000 条 ,其 从 6 只 不 子 感染 , 作
& 正常 对 照 在 天 狗 接 种 一 个 月 (5 周 ) 及 三 个 月 (13 周 ) 后 ,抽取 各 动物 的 耳 静 有 版 血液 各
TK ET MIE AOD MERE RAK 1。
表 1 TE AR a MIRE eet 43
at a2 a |e Ra | Reo
tt _ (2%) (2%) (2%) WEAR
eS eae a 7.08 4.32 2.7 1.58
Le eee eee eee ee eee :
2. 注射 组 动物 6 只 。 取 其 中 3 Rae, RAMEE. 接种 三 月 后 进行
示 踪 试验 , 每 一 动物 按 每 公斤 体重 腹腔 注入 0.15 毫 居 里 之 S”- 甲 硫 氨 酸 生理 苛 水 溶液 。
3. 口 伺 组 动物 4 只 。 其 中 2 ASE MR, 2 只 篇 正常 对 照 。 每 一 动物 按 每 公斤 体
BABS eh 0.3 le Bey S$“- 甲 硫 氨 酸 。
表 2 注入 Ss- 甲 硫 氨 酸 合 不 同时 间 内 血 友 蛋 白 角 比 放射 性
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每 克 更 体重 注入 的 计数 率 、
Zh) ite ta 血 吸 mw 更
泪 楼 on
iL es 清和 蛋白 | 球 蛋 和 白 | 清 蛋白 | 球 蛋白
0 7.65 1.01 3.75 2.01
4 7.66 23.03 4.57 7.18
8 10.70 30.62*. 4.60 11.49 ad
24 12.78* 26.98 6.95 17.10
48 12.72 25.80 11.36* 17.53
96 8.95 13.06 8.35 22.83*
144 一 一 - 6.65 9.15
”一 一 上 比 放射 性 的 最 大 值 。
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SAREE Tre.
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0 Be 1.83 0.47 ? 0. 7 4
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24 . 26.77 61.39 12.99 |
96 30.15* 58.06 — 19.86*
144 28.85 30.14 14.47
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eC OTECRS TBE IRR 0, 4,8 24, 96, 144 IN, 由 耳 脾 抽取 血 楼 Bi
Petes tor oe 测定 其 比 放 射 性 , PERU 2.3 中 ， 此 外 ， 收集 噩 但 组 动物 之 每 24
JRE SEE, 测定 其 中 放射 性 ， SOLE ELAR ee ee
AERA 4, i
#4 Of SF RRR nau BA R
— K Ag G3O RZ eee oe a op Ce Pee S SEE VO Le =
Se ee ee ae rm 2 = cx oa oe 4
PREAH AMP EARRE AMIEL. 13 周 后 清 蛋 白 平均 含量 只 有 |
2.078 % , 清 蛋 白 球 蛋 白 比 值 自 1.58 降 至 0.35 (FE 1)。 HAASE TA AAD, i
然 清 蛋白 含量 以 及 清 蛋白 球 蛋白 的 比值 下 降 。
在 示 踪 实验 中 , 我 们 发 现 ,注射 $2 一 甲 硫 氨 酸 和 后 ， fn Seca MANGER
PRE RS RI LF EB) A, RT FE EE BR
EAS, WF PS ARETE RASA, Ti EA HEE, AE RE
TES Le AEE 24 小 时 过 到 最 高 值 12.78， 而 威 染 琶 之 血 北 清 蛋白 在 注射
ie 48 MEH ABBA 11.36, ESRAZSUMREA, FREI 8 FEE BIOS
此 放射 性 值 30.62 ,感染 对 之 最 大 比 放射 性 到 96 AEDT HSL, C1 AL OS ARR LE
” PAHO. MARAE MEMES, Hi Mi TC AK HCAS
正常 。 但 考虑 了 它们 的 省 度 发 生 的 不 同 轰 化 以 至 放射 性 物质 产生 不 同 的 稀释 度 的 并 保 困
所 以 我 们 计算 了 注射 S55_ 甲 奈 氨 酸 后 每 100 毫升 血浆 中 它们 的 最 大 艳 放 射 性 。 A Te
感染 的 动物 每 100 毫升 血 效 中 清 蛋白 的 最 大 炉 放 射 性 篇 23.52。， 而 正常 动物 需 55.26 ,前 ，
-116-
; 次 中 起 计数
( See x 100 ) ‘a
xe Fe] 正常 KR | hem < S
f 1 O18 | 0.29
下 2. Ohi: a> 0.22
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4 ， 5 0.00 0.96
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; fy 0 EPA IG: RAE aS AE Ae ee PE ,
heel FERRE OREN YESS 133.56, TE FRIAS 94.53, BO HCE RE
大 得 多 。 AVC RAIS ARE LY sa RE, GS UE a SE
pee ‘SRA, ERIE ee SIE, TRE BT A ，
Ail MITRE RRS. M. HAcaafr, 等 人 的 工作 中 指出 ,用 外 科 手 术 损 伤
Bur 后 So- RBA RBA SIM EA. HICH, A a HE A EH A
EA Se PY AE LS A EA HEI WG Ko .
”我们 在 探讨 甲 硫 氨 酸 的 吸收 情况 实验 中 , 发 现 家 有 在 口服 了 Ss5- 甲 态 氨 酸 和 后, 24 ，
| ce PS Mat CE ENA A TEN 0.17% (TERR) BE 0.29% (HHH) (HX
4) PRET FMC tn We a A BE "FT SLU ER ELA HP BP ic ED DS _ EB
Er BCH FRB BB BRE ABE BABEL, HIARERE
BUSCH De BR , PRISE KE CFT RE PS ES FR
也 不 能 直接 测定 。 过 是 因 篇 家 允 中 受到 严重 的 感染 ,其 腹水 量 极 少 。 但 是 如 此 正 可 以 排 ，
Jn i A SER GE WT MAE AICP HE |
Pe
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膜 水 痛 粒 线 体 有 氧 情况 下
对 酶 解 的 抑制 作用 、
AH BEEN HIKE
CHER WTA MOTHS, Ei)
_ teze, Aisenbery, Recker, Tiedemann SA} 3R BED ATES BEN AOL HS A
正清 液 ,研究 呼吸 与 酵 解 的 相互 调节 作用 。 SAMIR AES Wo Lea ee EE
的 用 ,项 少 极 六 对 酵 解 的 抑制 。 Graffi 等 合 绪 察 到 在 缺 氧 状态 下 , eA
障 抑 制 酵 解 ,但 过 熏 完 整 癌 炙 胞 的 有 氧 抑制 的 机 制 可 能 是 不 同 的 。
RAMEN pt, AG KHCO, 的 0.25 M BRR SSE, TERE
Het 1300 x g 离心 3 5 BERS ANAK , FAN 10,000 x g PED> 10 58H, HORE ANE
Ee 包含 微粒 体 )。 RPRLRE ABN 5)-Fe It ORE RA, 再 用 大 量 的 0.25 M Rew
Heth Ko LEHR EDA ERRIRMEA GE. BARE AAB IT, BOT Oe A eee
正 层 液 漫 青帮 30°C, 20 Jh-ik, SAMRAT CEP, 但 不 抑制 葡萄 糖 的 利用 (上 见 表 1)
表 1 腹水 痛 粒 线 体 对 阶 解 的 抑制 作用
a erate | 乳酸 生成 | Pi sl fi
r uM pM uM
上 清流
上 上 清 液 加 粒 线 体 4.37 3.04 0.83
3.59 | 5.15 4.60
一 117 一
和 均 能 将 99.7 儿 的 氨基 酸 吸 入 体内 。 因 而 我 们 认 乱 在 种 晚期 血 吸 串 病 时 , 蛋 ee |
We Awe: 葡萄 糖 11x10-? M; -KHCO, 12.5X10-3MI MgCl, 3x10-°M; ATP |
5x10-*M; DPN 5x10-*M; 4¢#% P 3x 10-* M; MRNAS 22ml, RH 5% CO2/95%
空 毛 。
FR Kornberg, Slater, eer oe ee 6B 44
HE (G 6P) APM ROR: 1,6, 二 磷酸 果糖 (FDP) EMR, wa ERE,
糖 代替 葡萄 糖 震 底 物 ,， 粒 萎 体 的 抑制 仍然 存在 。 用 Roe (LS iE RRR ，
示 显 明 的 积聚 ( 见 表 2)。 用 G6P, F 6P (6- 磷 酸 果 精 ) 坊 酵 解 底 物 ,抑制 仍然 存在 ; 改 用 ，
FDP Sk), HERI. DLR DABS: DC ，
AEA EER. DAR, ROE RAS 0.3 wM ERA (AR He
BAWABEROR
Fe 2 7 ABEL i Ba PES 间 产 物 的 含量 = uM / gro
底 | ii i i 果 和
wee NE E 上 清 液 | L#emnane | Lae | Leeman
乳酸 产量 5.98 5.05 6.86 5.24
Pi Hep 3.96 0.74 3.98 0.55
4 G6P 0.24 0.63 0.26 0.63
FDP* 0.02 0.09 0.06 : 0.20
磷 栈 果糖 兰 0.37 0.68 0.43 0.99
* FDP 量 用 Slater 酶 法 测定 包含 磷酸 三 粳 星 。
##k Peis gee a FDP 和 了 6 了 P。
粒 苇 体 抑制 磷酸 已 酶 激酶 机 制 的 初步 研究 表明 : 激酶 活力 的 降低 北非 由 於 上 层 液 中
三 磷酸 腺 昔 的 缺少 ; 图 1 ( 略 ) 表示 在 温 青 过 程 中 抑制 作用 与 不 含 粒 革 体 之 上 层 液 中 腺 嘎
喻 核 背 酸 含 量 的 天 傈 。 因此 ,激酶 的 活力 可 能 是 直接 受到 粒 芒 笨 抑制 的 。 粒 茂 硒 抑 制 栈
解 的 作用 需 二 硝 基 雁 , 毛 化 物 , 缺 氧 及 温 粒 粮 体 1 小 时 所 解除 。 过 表明 抑制 作用 生 粒 芒
体 的 氧化 帮 酸 化 是 密切 相关 的 。 粒 萎 体 通过 氧化 磷酸 化 降低 温 青 液 中 扰 机 杰 尖 度 可 能 是
产生 抑制 作用 的 重要 条件 ( 昂 表 1:2)。 在 温 青 液 中 增高 乱 机 磷 使 G6P 含量 趋向 下 降 而
增高 RDP 的 含量 (RES). 添加 通 量 的 三 磷酸 腺 昔 酶 , 亦 得 到 同样 的 结果 。 BADE
OLE, APL HO TS eiaiaiias 在 这 傈
AE ENO OE Ay SUI
Ze 3 rr ee
- 3 uM Pi/ml 7.64M/ml
酵 解 代谢 物质 uM uM
HAE RR 17.16 . 14.17
乳 栈 产量 5.19 8.82
$5 BETA BR 9 0.83 2.94
7 酸 不 稳定 磷 4.32 ， 6.62
G6P 0.51 0.48
FDP _ 0.16 0.59
SS AAT) , eA FREI A RE RL, RC
Ko 地
一 118 一
天 傈 厦 汪 “恶性 磁 脂 ”的 探 计
胡 兆 庆 李 文 俗
(中 EMR TAT IC, 上 海 )
车 求 大 瘤 生 化 的 特 接 ， Ws HGR ARBRE, 日 本 和 神 前 武 和 等 报 轩 在 用 总 和
和 中 发 现 由 胆 瞪 、 精 腕 脂肪酸 和 磷酸 组 成 的 所 请 “恶性 磷脂 "。 应 用 於 胜 瘤 患者 的 血液 珍
WEARER. 因此 , 引起 了 相当 广泛 的 注意 。 但 后 来 , 别 的 工作 者 重复 试 台 , 对
比 烙 果 则 表示 怀疑 ， 篇 了 澄清 过 一 问题 ,我 们 在 肝癌 患 者 亦 重复 了 血液 珍 断 , 小 且 按 种 前
攻 的 方法 , 反 允 地 从 大 量 艾 氏 腹水 癌 秋 胞 提出 所 旅 “恶性 磷脂 ”对 其 性 时 进行 了 分 析 。
。 所 用 方法 及 试剂 均 脾 格 按 神 前 氏 的 规定 。“ 恶 性 磷脂 ”的 存在 是 以 Whatman 工 号
“Wee, ARYA (吡啶 :二 甲醇 知 甲醛 :水 一 3.5:3:3.5)， 在 25°C fab De a
Bi(Re 值 各 需 0.38 和 0.51) 来 确定 。
FEMA A Mt | FEAT RT»
BBE 肝癌 、 肝 硬化 患者 与 正常 人 血液 EER” 的 检定
检定 例 数 | BE A HK 阳 性 mf
肝 硬 化 * 7 rT 65
es ee Ay 27 5 19
* PA FARE ASRS Da
(SE HSL aH AUTH HH ics “PERI” , 在 Whatman HAR FT HE 不
| 和 雹 乙 酶 或 丙酮 洗 腕 , 但 经 水 证 卡 理 后 旭 洽 失 ,表明 抽 提 的 物质 站 非 磷脂 类 。
| rt ae Ce ec eee et
TRIS HE AMA AMA AAS Re 值 相 同 。 用 吗 | 嗓 醒 (Isatin) 题 色 , 上 面 一
点 呈 蓝 称 色 兵 丙 氨 酸 相同 ,而 下 面 一 点 呈 业 色 奥 甘氨酸 或 谷 氨 酸 相同 。 改 用 酚 : 水 (8:2)
SG, BM SRS, R 值 与 丙 氨 酸 ,甘氨酸 , 谷 氨 酸 相同 。 在 溶剂 的 前 沿用
人 钢 酸 镍 题 色 ,有 一 与 卵 磷 脂 位 置 相 同 的 点 。 将 “恶性 磷脂 ? 帮 6 NHC] 水 解 18 ah HE
en, YHA $5 — If BB) 7K (8:2) , $4 — 1g ABOLME-7K (8:2), HH OBE, HARE BS
氨 酸 , 丙 氨 酸 ,甘氨酸 和 少量 的 谷 氨 酰胺 。 HOC_EAS HURT OOT, 抽 提 的 “恶性 磷脂 ? 们 乎
MEINEM Mey. IIS OAA, HAR, 丙 氨 酸 乱 样品 进行 人 工 摸 气
HOR, ERLANG I” EE A PSN
| HELA REEDS” OAT OTP, A A A 8B
RAD LLL IEEE OS “REEDS” 08 NT RES, Ze BDA IG BF Fah
“HATED SRI Ys HRSA ew BI I UL, Ha
. —~119—
|
|
A AO iy 2a
eck SHE T IAPS, BEAL BAS ALTER A eb REE BIS”’o RAM, HAD -
pi
Ia Aso
Gabtree 22 MOMMA Mei —,
内 源 底 物 ,反应 在 DH 7.4, 37°C 进行 共
SCOLAIRE
“利用 的 局 部 化
ASHER TKR
(RRS SOTA, 上海 )
和 2-H 5A 76) 7%) BFE LBS TE Ao
— 120 一
底 物
对 照 ，
ap |
残 珀 酸
2-525 Ait + BEST
2-8 TH
2 5 S75 wi
Fag WI + eT
FUME BEIT OR. IB SSA fe te q
xe i
A KR Mm
(45: 20 57 Fit BIT MO)
80
AE CORRIENTES
LEY RASTA AT BAS. IAS Crabtree SMAI RRS IEA Cha- “
» nee, Racker, Lehninger 等 很 定 能 量 ATP 在 纺 粒 体内 的 局 部 化 杰 进 行 解释 是 最 引 人
ER. LEM ALE ATP HAMLET AZ AER. / :
， 已 知 蛋 白质 生物 合成 主要 在 线粒体 以 外 进行 | REN PA AUCH ADL HERS |
ERLARIL EEE AIO > HERE AOL ALR ALI A ee 我 们 利用 CYBER
参 大 蛋白 质 作 篇 艾 氏 腹水 三 瘤 能 量 利用 局 部 化 的 指标 。 采 瘤 锈 胞 傈 经 多 次 洗 潍 素 量 除去 ，
30 SG, 用 13 久 三 氧 栈 酸 (最 后 洛 度 ) 停 止 反 应 ，”
沉 泪 经 三 氧 醋酸 洗 潍 数 次 后 再 经 热 三 氧 醋酸 (90"C, 15 FG) 及 有 机 游 剂 处 理 。
当 腓 瘤 钥 胞 加 入 琥珀 酸 ,可 以 引起 呼吸 显著 二 加 , 比 内 源 呼吸 增加 40% , fel “
到 C3- 标 均 甘 氨 酸 参 入 蛋白 质 增 加 壹 倍 以 上 ,说明 硒 瘤 和 胞 的 呼吸 系 葡 所 提供 的 能 量 能 ，
有 效 地 秩 利 用 於 蛋 白质 生物 合成 ,由 亦 蛋 白质 生物 合成 主要 在 线粒体 外 淮 行 , 因此 ,同时
也 说 明 线 粒 体 内 能 量 ATP 可 以 透 过 和 线粒体 膜 筱 有 效 地 利用 认 蛋 白质 生 有 合 成 , 我们 认
需 在 过 种 条件 下 , 线粒体 内 能 量 岗 察 不 到 明显 的 局 部 化 。 当 2- 腕 氧 葡 萄 酶 和 焉 珀 酸 同 时
加 入 即 在 产生 Crabtree 效应 的 条 件 下 ,呼吸 比 单 独 加 入 琥珀 酸 时 仅 降 低 攀 12% , 但 CM
aR BBB DA DAH 60%。 说 明 由 开 珀 酸 氧 化 所 提供 的 能 量 不 能 被 有 效 地 利用 ，
过 种 现象 同时 也 就 明 在 过 种 条件 下 即 引起 线粒体 内 能 量 ATP 的 局 部 化 。 葡萄 栈 能 引起
县 种 数
(每 毫克 蛋白 质 每 分 钾 奸 数 )
522
806
1182
B22
664
426
854
. \
q OH 萄 葡 狂 利用 量 | Lee mR
a 毫克 毫克
Ms ee Sh fect 0.25
E | 4.30 2.12
a ito | 4,29 2.10
B. ¥. i + 2 HT 4.10 | . 2.09 —
We a ee
= SARA DENRA Hea AM
PIE AKA <
(中 国 科学 院 生物 化 学研 究 所 ,上海 )
Siig es DNP 光斑 珀 酸 氧 化 的 影响 和 草 酰 乙酸 的 积聚 有 并。
Mil, EMA DNP 以 前 或 在 加 入 DNP 以 后 呼吸 仍 处 於 激活 阶段 时 加 入 无 机 磷酸 都 可
四 使 激活 延长 ; 但 若 在 DNP 加 入 呼吸 已 彼 抑 制 以 后 方 行 加 入 无 机 磷酸 则 不 能 使 呼吸 重
行 恢 复 。 镶 明 促进 琥珀 酸 氧 化 的 因素 不 是 无 机 磷酸 获 本 身 , 而 可 能 是 在 氧化 磷酸 化 作用
通 程 中 产生 的 合 磷 化 合 物 。 ATP 在 较 低 湾 度 时 对 DNP 加 入 后 琥珀 酸 氧化 的 抑制 没有
影响 ， 但 在 较 高 省 度 (7 X10-* M) 时 ,可 以 使 受 DNP 抑制 的 呼吸 缓慢 恢复 。
落 同 时 加 入 琥珀 酸 和 与 DNP, 或 琥珀 酸 在 DNP 后 加 入 ， 则 琥珀 酸 氧 化 开始 时 即 受 抑制 ，
激活 阶段 不 出 更。 在 加 入 DNP 以 前 加 入 68- 羟 基 丁 酸 、 丙 醋酸 、 棒 榜 酸 、 轴 杰 样 酸 、o- 柄
KAR. AIR, 5-ARELAB (Amytal)， 可 以 解除 DNP 对 琥珀 酸 氧化 的 抑制 ;
在 DNP 当 琥 珀 酸 氧化 产生 抑制 以 后 加 入 以 上 试剂 , 也 可 以 部 分 解除 抑制 作用 。
ARP LAGRIMAS DNP 对 琥珀 酸 氧 化 的 抑制 作用 似乎 不 能 用 草 酰 乙酸 的 堆积
呈 请 地 加 以 解释 。o- 酮 友 二 酸 等 底 物 能 使 被 抑制 的 琥珀 酸 的 氧化 重 行 恢复 的 事实 也 是 和
SERRA. 我 们 让 篇 在 驴 珀 酸 氧 化 的 过 程 中 ,氧化 磷酸 化 作用 所 提供 的 能 量 部 分 通
py
化 了 过 种 能 量 反馈 作用 ,而 使 残 珀 酸 的 氧化 无 法 杀 持 。
| DNP 当 琥 珀 酸 氧 化 的 抑制 受 “十 友 二 酸 等 多 种 试 帮 解除 的 机 制 可 能 不 缆 相 同 ， 但
量 值 得 注意 的 是 它们 都 和 辅 胶 氨 酶 的 氧化 还 原 有 关 。 利 用 公 光 路 自动 记 匀 差 吸收 光谱 仪 的
—121—
Me he a
= Ae
Sees le
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S oe 2 ol 一 “dl
Se RR a en eee a ee Te
2
， Aazone 等 过 现 矿 粕 体 径 砷 酸 钠 或 AMP-DNP BELG A ATP 可 使 琉 珀 酸 的
硬化 加 速 。 他 们 况 需 玻 珀 酸 的 氧化 需要 高 能 磷酸 化 合 物 加 以 促进 。Slater 等 和 Chance:
”我 们 利用 自动 妃 录 振动 白金 微 氧 电极 研究 DNP 对 琥珀 酸 氧 化 的 影响 。 大 白鼠 肝 脆
AUTEM A DNP (2x 10-5 M) 后 斑 珀 酸 的 氧化 明显 被 激活 , 9 1 一 2 7 、
DNP 夺 氧 化 的 激活 程度 和 DNP 加 入 前 焉 珀 酸 和 与 线粒体 一 同 保温 的 时 间 长 短 有 关 。
pas:
a ee
.
i ap
=
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wt ts Peles
: gine . aE
SORE hese ww
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研究 , 发 现在 DNP RPK AA PLUTON AE, A o BT pS
VST BBD ee PUR A ST ET eT PL
DNP Sy Be FA Pe se EU AM hl SOC MRE A BES ELE AN SE, EF] HE ANE A SE
些 调 季 机 制 有 关 。 厂 粒 体 经 超声 处 理 90 秒 以 后 DNP 将 琥珀 酸 的 激活 和 抑制 效应 即 完 ，
BAK, MET ASA ALE DER, AAAS S|
A Ko
\
a
FEY GRAS
(中 国 科学 院 生 物化 学 研究 所 , 上 海 )
自从 发 现 驴 珀 酸 引 起 续 粒 体内 源 DPN* SRS —TERE IMG, Azzone 和 Erns-
ter 根据 砷 酸 嗓 和 公 香 豆 素 处 理 和 线粒体 , 引起 玻 珀 酸 氧 化 抑制 ， 赣 能 需 ATP 所 激活 的 现
象 ,融入 焉 珀 酸 氧 化 需要 能 量 激活 。 另 一 些 作者 指出 引起 琥珀 酸 氧 化 抑制 的 种 种 措施 都
ROR, CLIC UIA, ATP TIDE ARMS. GERI
SAAC ASE Hl $59 AE, PPR OC STE
RASA ASU. 用 振动 白金 电极 测定 氧 吸收 sk。 BURT
DNP 和 厢 酸 昌 对 琥珀 酸 氧化 的 激活 作用 ， Se A He AEA Tn ;
Sit aR BAN P :
DNP SSA S(O Be EA, BE BEA TTR WRU BE (5 X 10-* mM, 10-2mM)
DNP S/R ARIS, TH RRS BYE (8x10? mM YE) DNP RA
RIEL SUCCEEDS AH, TEBE ETS, WORE ER), BEA, DNP
引起 的 琥珀 酸 氧 化 抑制 本 质 ，Slater SALA REMOER. AMI
DNP 当 草 酰 乙酸 的 形成 和 和 氧化 的 影 澳 情况 。 草 酰 乙 酸 是 琥珀 酸 和 荃 果 酸 的 氧化 产物 ,其
形成 的 量 应 当 和 与 氧 消 耗 量 相 一 致 。 低 滤 度 DNP 会 不 会 不 解 联 DPNH MAMIE bz
间 的 磷酸 化 作用 ,只 有 萃 果 酸 的 堆积 , 而 不 产生 草 酰 乙酸 呢 ? 需 DPN BART
DNP 的 作用 是 一 致 的 , (IR DNP PE REMC RIAA, WHEE DPN y(t
AAU DNP BMRA EER, bE DNP REI, RA.
因此 , bak DNP 当 琥 珀 酸 氧 化 的 激活 行 篇 无 法 用 草 酰 乙酸 的 堆积 来 说 明 。 BUMMER
BY Ey ara SR Ac WA HE TA PS Mihi] BL DNP BE, Le ere
的 水 解 能 力 相 关联 的 。
如 果 反 应 液 吉 预 先 加 入 2mM 5 5 RKEKARBA (Amytal) WE DNP 引起 的 昌
琥珀 酸 氧化 抑制 全 部 避 驶 。 此 时 10-:mM DNP RH RAKDARKA. mR DNP
已 引起 抑制 之 后 加 入 , 琥珀 酸 氧 化 仍 有 部 分 恢复 , 相当 於 预先 加 入 的 #o 5 乙 5 要 成 巴 比
_ * 本 女 简 得 如 下 : DPN Hag I; DPNH sawing 1; ATP =; DNP 2,4-—WILRM.
He Gh Ey Se EAI ABS Oe He (ERA GE DF ek, CPR ASE RS ay AVE Be, IL SAY 0
— 122 —
te ee da
“peste, BRT REML ABE BLD ity Sew ICANE DNP ap SHR ARH
的 激活 作用 。 y Ee
| 化 的 激活 作用 。 4mM FBS He A AAS, 省 度 升 高 , A
i DNP 作用 相反 , 知 酸 咯 单 独 作 用 ,看 不 出 焉 珀 酸 氧 化 的 抑制 。 在 有 2 mM 5 乙 5 BRE
比 委 酸 钢 存 在 时 ， 砷 酸 节 激 活 冰 珀 酸 氧化 的 第 三 分 甸 氧 吸收 这 开始 下 降 ， 而 丈 狐 趋 於 抑
制 。 此 时 华 果 酸 氧 化 完全 被 抑 制 ， 草 酰 乙酸 不 会 有 堆积 ， EOL APH EE Se
He ik, 提供 了 有 利 人 条 件 。
10-:mM DNP 引起 的 琥珀 酸 氧 化 的 抑制 , 氧 吸收 率 相 当 於 最 大 氧 吸收 率 的 2/3。 增加
的 琥珀 酸 氧 化 抑制 也 具有 解除 作用 ， 间 使 氧 明 收 率 略 高 於 砷 酸 咖 单独 作用 所 答 出 的 氧 吸
“28. LEAN WE DNP 的 单独 作用 下 , 草 酰 乙 酸 仍 可 能 有 堆积 ， 它 在 抑制 骇 珀 酸 的 所
化 中 仍 发 择 了 一 定 作用 。
5 乙 5 机 友 巴 比 做 酸 钠 的 作用 是 柳 制 DPNH 的 氧化 , 以 上 粘 果 双 指出 它 对 DNP 和
厢 酸 荔 数 活 下 珀 酸 氧 化 的 作用 完全 相反 。 因此 需要 分 析 一 下 其 对 腺 三 磷 酶 的 影 池 , 以 了
解 它 是 否 千 援 友 酸 化 的 中 间 过 程 。2 mM 5 乙 5 RELA 10- mM DNP 和 4
mM BREA BSS RED Te SEE. AL, 5 乙 5 机 友 巴 比 父 酸 钠 的 不 同 作用 ,全
“FER DPNH 的 氧化 彼 抑 制 来 说 明 。 在 正常 情况 下 , PERLE RES, 加 入
(525 BREA, Hil T DPNH 的 氧化 , 一 部 分 磷酸 化 作用 也 被 截 止 。 此 时 磷酸
ACRE HP ES BE PR RE SE, 和 过 种 高 能 中 间 物 的 分 做 情况 如 果
“WET DNP 激活 琥 珀 酸 氧 化 的 能 量 要 求 , 就 输出 了 最 大 的 氧 吸收 率 。 砷 酸 匣 对 DPNH
BUNNIES 5 之 问 的 磷酸 化 作用 较 入 特殊 , 它 奥 DNP ARE RA LACH Ue
激活 琥珀 酸 氧 化 的 能 量 要 求 ,可 能 篇 5 乙 5 RE AAA Ee RAED, 至 於 砷 酸
上 感 单 独 作用 不 引起 琥珀 酸 氧 化 抑制 ， 可 能 是 由 故 砷 酸 匣 双 筷 底 料 水 平 的 链 酸 化 作用 解 联
j 坤 ,在 其 单独 作用 下 ， 则 然 下 珀 酸 氧 化 抑制 了 ， 其 他 内 源 的 、 需 DPN PIER ORR
AG, 此 时 仅仅 和 从 氧化 的 测定 上 就 不 能 观察 到 下 珀 酸 氧 化 的 抑制 。
于 ”由 实验 粘 果 所 得 到 的 种 种 分 析 , ROM ARRAS. 但 是 在 一 定 人 条
EE, 由 共有 草 酰 乙 酸 堆 积 , 它 对 琥珀 酸 氧化 仍 可 能 表现 一 定 抑制 作用 。
(未 工 作 进 行 及 炉 千 中 , 承包 承 备 先生 提供 宝贵 意见 , 递 此 致谢 )。
一 123 一
FEA EAN ADP WR, RMB T 2 一 10 mM siRee as SEI
— HeIBE DNP 单独 作用 和 5 Z, 5 SEL EHO RCE SE Ta FNS RO WEAR A,
抑制 程度 差别 , MEARS. EMS ATP 的 影响 情况 也 有 区 别 : 1mM ATP 能 请 除
ATP 的 湾 度 , 氧 吸收 牵 也 不 再 改 释 。1mM ATP 对 5 乙 5 机 皮 巴 比 估 酸 钠 - 砷 酸 晓 引起
|
-
“” 酸 翼 构 酶 . 转 柄 酶 和 转 醛 酶 ,过 楼 看 来 已 糖 支 路 的 糖 降解 途径 也 是 具备 的 。
~
Fa 酸 酸 村 菌 _2990_6 号 的 代谢 、
—, ROTHER PS
Rw Bi ber
(ASE AE LIST, 上 海 )
a
: - 5 i
See eee saciid =
Sea
ALES OOH T FAME —2990-6 号 的 谷 氨 酸 酸 本 条 件 和 影响 公馆 酸 夫 ‘
积 的 各 种 因素 .以 下 就 各 一 菌株 的 葡萄 糖 降 解 途 径 作 一 些 探讨 。
。 2990-6 号 菌 的 休止 普 胞 可 以 氧化 葡萄 精 ， 28 8-6 i
Ys ABIES. |
DAS a I TT Dh EA EH A , Sa ORLA LUC ARS pines, 4
TEVA il BS BEE 6S SEH AC TL 是 必要 的 辅助 因子 , 碘 乙 酸 有 强烈 的 抑制 作用 。
测定 2990-6 号 菌 的 无 硼 胞 制剂 中 有 磷酸 已 糖 丑 棒 酶 、 磷 酸 果糖 ` 磷 酸 激酶 、 本 夭 酶 、 ，
3- 磷 酸 甘 油 醛 胶 氢 酶 .磷酸 廿 油 酸 伙 位 酶 . 烯 醇化 酶 和 丙酮 酸 激酶 , 亦 即 有 从 葡萄 精 -6- 磷
。 酸 到 丙酮 酸 糖 酵 解 途径 的 酶 系 。( 已 糖 激酶 另 有 报导 )。 er
2990-6 i RB JRE AI Ma ASA AHR LT nt 6 LAD 6- 磷 酸 角
i ORIEN, 6- 磷酸 葡 萄 糖 酸 觅 氨 酶 的 作用 产物 有 二 氧化 矶 和 友 精 ,以 核 糙 -5- 磷 酸 作
SJR BIAS, ESSE BORE. COREA SBE, IE ABH AS
糖 酵 解 和 已 糖 支 路 的 二 个 糖 降解 途径 是 以 区 葡 糖 -6- 磷 酸 作坊 分 支点 的 ， 葡 萄 糖 -6- “
RMSE RARE LOVER ER RAE ，
ARES TE Hy SUE EEE, AERA Os ee
_ Ftp BME FS AEE, C89 HI 6D A A CEB EE HE
RHA RRR TEE AES OIE MED HSER (MIRE) ISLET
PSEA LL By Cie BS Wo HE Ao
ize” 从 sa oe RT A -0—REREL 6- 磷 酸 葡萄 镀 酸
Es RRR TUES Ja LR 4
xy I II it
谷 & ih BR TC i
1 Eee 葡萄 糖 -6- 磷 酸 | 6- 磷 酸 葡萄 糖 酸 - ws IJIII 区 4
和
种 子 培 姜 基 0 0.22 0.047 0.23 0.96 | 0.200 |
酸 酵 培养 基 1.02 0.77 -0.164 0.12 |
-
* 表 中 所 指 腕 氮 复 活力 傈 在 相同 测定 条件 下 每 毫克 蛋白 里 使 分 光 光 度 奸 :340 mw eR Imm “a
Gk » AEA 85 7 7a RE UR Pe A Eo 一
9 参 Bee ER
[1] 6S. WR RRA RR: Ay eB ye BH 1 元 2 期，1961 年 。
一 124 一
e 和 机 -2000 6 号 的 代谢 ae
ae Po a See <a
as eS ae oe
¢ ‘esha LEST, 上 海 )
。 利用 元 找 测 策 法 忆 及 2.6_ 一 所 本 能 本 多 科 股 色 法 牌 明 2090-6 号 画 的 休止 能 氧
Cee ee ee ee ee er, ee bo
ARERR, RNR LI TER NORE AA CR SAE
7 利用 。 aan kel ’ 6
AURA Ape. est CLR Te vec An PE AOA
Hap TL A — ee AREAL. SNELL, TERE 或 辅酶 II eR
_ i AAI ARG Ie KEN PURAR LGA DS PSAN ; a"
A. ae.
3 AULT a RR RA RULER, HEAR ARE FL oR — ee a
1) daria RPL ESI AER AE 2990-6 号 苗 具 人 备 三 次 循环 的 完整 体系 。 oe
FRED RAR SEER SI Hy UK It ALOR RAEI ERE RASR
六 本 症 明 有 天 门 冬 氨 酸 栈 的 存在 。
ENR AMMAR RED BARR.
AER IL ASR Oe II RNA) 保温 的 pee tae
BARRIS oH
ELEVA AA ARES IG MR, A AUR TALE AE
| RRA RAR o ROM, FERRIES ELT A BRAT TERS ERR, ESKER 1S
| ROM, RAE — KL. |
上 由 此 看 出 2990-6 HEM — AAR AIS BARR (AW ERS 3 一 4.3 微克
， 人 子 氧 /1 微克 分 子 谷 氨 酸 )， 另 一 方面 双 能 酸 酵 交 葡 糖 或 利用 其 他 底 物 累积 o- 酮 成 二 酸
上 或 谷 氨 酸 ， 将 酸 酵 培养 基 培 养 二 日 的 菌 体 以 胜 萄 糖 、 谷 氨 酸 和 o- 酮 成 二 酸 作坊 底 物 测定
国 氧 豚 收 的 千 果 如 下 表 , 可 以 看 出 葡萄 糖 的 氧化 速度 比 谷 氨 酸 狗 大 十 倍 。
i AiG ”289 pl O:/ 小 时 /毫克 菌 体 氢
Ae. 80 wl 0:/ 小 时 /毫克 落体 氢
o- 酮 成 二 酸 6 wl O2//biF/2E Fe ARE
HE: ALAA EA te th EB .
上 ”从 以 上 粘 果 初 步 看 出 , 2990-6 BER MEAT SEM = ATER, REIL o- 酮 成 二 酸 和
| ARR, Lh ALR RL, 因此 有 利 礁 本 酵 液 中 大 量 堆积 oO MINA,
/
一 185 一
谷 气 酸 酸 醇 菌 --2990-6 WENGE
=. KPA ARS RE
Bert = JADE
— CRB GA ETS AT, 上海 )
FERRARI: 在 酸 酵 培养 基 中 培 #0 2990- Coen PY
RRR AR. SAMAAMNKMZAME ARM AMOI, BME: |
RAMA ARH IEH, Kinoshita #3% Micrococus glutamicus 的 氨 同 化 作用 ， |
LUGAR MSEN, JEPREAM Shiio “SALARIES STE, 1
但 他 们 没有 进一步 肯定 鼓 酶 在 谷 氨 酸 酸 酵 中 的 作用 。 :
” ”我们 发 现 : 2990- -6 号 邯 在 种 子 培养 基 中 培养 的 北 体 没有 天 门 科 氨 酸 酶 的 活力 , 只是，
在 进入 酸 酵 培养 基 后 始 产生 此 酶 ， 而 谷 氨 酸 脱氧 酶 在 两 种 培养 基 中 培养 的 菌 体 内 都 能 测 ，
出 ,由於 两 种 培养 基 成 分 的 主要 差别 是 在 认 前 者 含有 蛋白 胰 和 较 低 量 的 化 曲 ,后 者 不 合 蛋 ，
白 胰 及 合 有 吏 高 量 的 狠 晤 。 因 此 ,我 们 研究 了 在 不 同 培养 休 件 下 蛋白 胰 ` 伊 世 等 对 天 门 冬 ，
氨 酸 酶 活力 及 谷 氨 酸 堆积 量 释 化 的 影 沟 , 结果 指出 : (1) 在 酸 酵 过 程 中 随 着 酸 酵 液 中 谷 氨 “
酸 的 堆积 菌 体 内 即 出 现 天 门 冬 氨 酸 酶 的 活性 ; (2) ' 在 含有 不 同 量 续 旬 的 酸 酵 液 中 谷 毛 酸 ，
堆积 量 与 菌 体 内 天 门 冬 氨 酸 酶 比 活力 有 平行 天 傈 ; (3) 将 种 子 培养 基 中 收获 的 菌 体 大 量 ，
_ 县 恤 在 酸 酵 培养 基 中 10 小 时 和 后 菌 体 内 即 出 现 天 门 冬 氨 酸 酶 活性 , 同时 酸 酵 液 中 即 有 少量 ，
谷 氨 酸 堆积 ; (4) 当 过 株 菌 生长 在 1.0 匈 蛋白 胰 乱 唯一 氮 矶 源 的 培养 基 中 时 菌 体内 缺乏 天
门 冬 氨 酸 酶 的 活性 ， 同 时 亦 不 堆积 谷 氨 酸 ; (5) TERRIA SESE} Om A RAMS (0.1 y/
100 ml) 可 使 谷 氨 酸 堆积 完全 抑制 ,同时 苘 体内 亦 无 天 门 冬 氨 酸 酶 活性 。
EVES RRR THAR AMO IIE MBAR He Ae, MR
(MNHs/ 毫 克 蛋 白 / 小 时 ) 一 般 只 有 天 门 冬 氨 酸 酶 比 活力 的 1/10 Jez, ae EE A
合 整体 内 酶 活力 的 情况 , 划 菌 体 中 天 门 冬 氨 酸 酶 比 谷 氨 酸 脱氧 酶 活力 狗 大 10 入 。
根据 以 上 的 车 果 指出 的 谷 氨 酸 堆积 和 与 天 门 冬 氨 酸 酶 活性 增长 有 着 密切 的 天 傈 看 求 ，，
2990-6 号 菌 在 酸 酵 条 件 下 其 天 门 冬 氨 酸 酶 对 谷 氨 酸 的 形成 是 起 着 主要 作用 的 。
一 126 一
3 RBA NET 2990-6 WER
ie 四 、 逮 原型 六 酰 氮 核 苦 酸 的 氧化
eB 周 光 宇
(中 国 科 学 院 生 物化 学 研究 所 , 上 海 )
在 和 良好 的 SHIT 2990-6 Se Gal Al Fil hi 20 DB BE 4 ESET a LAE 50%
SUA BEES TEA, 猎 膛 原 性 的 氨 化 或 (2) 经 转 氨 过 程 。 但 是 无 痊 经 过 那 一 条 路 产生 谷
氨 酸 都 稳 是 个 直接 或 间接 痊 耗 还 原 辅酶 的 通 程 ， 而 是 否 由 艾 还 原 辅酶 的 氧化 受阻 或 由 克
4 的 问题 。
观察 到 它 具 有 利 动物 组 积 在 光 讲 上 相似 的 番 胞 色素 a, b,c 三 组 ， 蒋 酰胺 核 苷 酸 , REA
AAERL CO EA HOMES, HIF MEH PER ICHED [AHS a, ag, As, ay 和 0。
依照 B. Chauce (Adv Enzymol 17, 65, 1956) HHBAK, CHR tMBMAR
PR (从 种 子 培 养 基 内 收获 的 菌 体 , BEE PE SEE RHE A) 和 酸 酵 菌 (从 酸
酵 培 养 基 内 收获 的 菌 体 ,此 时 黄体 只 繁殖 的 很 少 ,但 堆积 大 量 的 谷 氨 酸 ) 在 呼吸 链 的 粗 成
上 没有 性 质 上 的 差别 , HERO, ERR, 但 是 吸收 举 在 440 mw 的 那个
RAK ILA AERA CO 和 结合 的 呼吸 酶 。
用 DPNH HEH 2990-6 号 菌 的 无 组 胞 制剂 或 从 它 分 熟 而 出 的 碎片 Cnc
RE?) 具有 很 强 的 DPNH 氧化 酶 ,此 酶 系 是 受 氧 两 嗪 ,BAL,，KCN 和 CO 的 强 抑 制 ，
BAH MERA, OS BBC ERR AIL
用 TPNH SK 74840 2990-6 BF ASSEN EHS “ATA A” BA
TPNH 氧化 酶 ， 此 氧化 过 程 不 受 BAL, KCN 的 抑制 但 受 奎 字 的 抑制 , 而 且 是 氧 分 压 敏
BLAST HATH) BB MAS 60 一 70 儿 ,初步 及 需 它 可 以 不 通过 呼吸 链 而 氧化 。
”我们 比较 了 生长 菌 和 酸 酵 菌 二 者 的 无 普 胞 制剂 中 某 些 酶 的 比 活力 和 忒 酰胺 核 昔 酸 的
Pit. RIP: 比 活力 单位 : 4 0. D. 340 mw/ 毫克 蛋白 /分 猎 。 温 度 25"C。
表 1 生长 菌 和 酸 酵 菌 厅 种 酶 活力 的 比较
DPNH 氧化 酶 系 4.9
TPNH 氧化 酶 1.4
转氨酶 4.4
BARRE AT 0.45 TPN 要 一 的
Wiis -6- PERE RAS 0.64 TPN 4—%
DPNH 3686 (FEE 218 )
反应 温度 10°C
一 127 一
左右 ， 谷 氨 酸 的 矶 架 是 w- 酮 成 二 酸 。 从 o- 酮 友 二 酸 生 成 谷 氨 酸 的 过 程 可 以 是 : (I) 由 谷 ，
氧化 型 辅酶 的 缺乏 而 急需 周转 等 等 原 A, DRAMA RRR. 过 就 是 我 们 想 探索
妈 了 研究 还 原 辅 酶 的 氧化, 我 们 得 先 了 解 2990-6 号 菌 的 呼吸 链 组 成 。 用 分 光 光 度 法 、
re.
~
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二 二-
“ay ae «
利用 营 光 法 测定 了 2S AUP PSB RE ARIA T=
AGL: 微克 分 子 / 克 蛋 白 。
表 2， 蔡 攀 胺 核 芽 酸 的 含量
he DPNH 氧化 酶 系 和 TPNH 氧化 酶 在 竹 胞 内 的 分 做 不 同 因此 我 个 测定 了 亲 种
与 DPN 或 TPN 联系 的 酶 的 分 做 结果 如 下 : (在 本 实验 条 件 下 得 正 辕 果 的 用 “十 ”表示
反之 用 “一 >)。
才 3 数 征 和 区 栈 胶 本 苦 酸 有 并 的 酶 的 分 人
|] | 一 一
G-6-P 股 氮 酶
FBS AS
CARAS
RS
DPNH 氧化 酶
TPNH ifthe
DPNH 36K
TPNH yeRe
转 & és
(Cie ea ae
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ee LF ee ee ee eee eee tn
na ree Fe ad «4
Se aE ee ha
从 表 3 RULER ETE SOE ARE TPN BF OO ERE AER MA
伤 在 碎片 上 , 仅 有 和 与 DPN 联系 的 酶 才 分 伪 在 碎片 上 ， 过 可 能 奥 二 征 精 酶 生化 功能 上 的 分
工 有 关 。
以 上 千 果 表明 : nee
REARS HS ART MR SA OS ee a
2990-6 Be 菌 的 已 糖 aan
J pp DEF
(中 国 科 学 院 生 物化 学 研究 所 , 上 海 )
-
Ra -SA
佘 微 明 等 的 报导 中 已 经 指出 2990-6 号 菌 具 甸 从 葡萄 糖 -6- -磷酸 到 丙 醒 本 的 粳 栈 解 和 ¢
BE SC BR AS BE AR. TERRE ES AS A A HE FRR HA dT SE Al Te :
一 128 一
| po) ee
。 我 们 的 工作 指出 如 果 在 制备 无 硼 胞 制剂 前 用 底 物 (葡萄 糖 ) 进行 保护 , 则 酶 制剂 即 能
显示 葡萄 糖 氧 化 能 力 。 阔 且 丛 明 丙酮 乾 粉 无 需 底 物 的 保护 能 长 期 保持 酶 活 。 只 有 在 进行
抽 提 时 必须 加 入 交 葡 糖 溶液 ， 抽 提 液 置 认 冰箱 酶 活 仅 能 保持 数 日 。 抽 提 的 最 适 休 件 篱 :
‘10°C UT, PH 72—7.6, 时 间 多 三 小 时 AAS HE PR IB 5 毫克 /毫升 时 酶 的 活力
ERB |
Ra mR ONES, ATP、Mg++、 辅 酶 工 或 辅酶 II 45 28.2250 A oD
| 因 闻 。 普 亦 分 光 光 度 计 上 可 以 测 出 辅酶 的 还 原 。 应 用 醋酸 钠 组 本 溶 液 (pDH 7.8) 进 行 电泳 ，
， 千 果 往 明 ， 仅 加 ATP、Mg++ 作用 人 需 辅 助 因子 所 得 反应 着 物 的 电泳 行 需 与 葡 糙 -6- 磋
Bo
。 2990-6 BE iH CLAIRE 53-4 100,000 xo ely LRA, PF FAA GAYn ORR URE 8
—1X107°M, BR2X107°M MA MHRR. (EA PH B73,
’ A. KK
SNORE RA DHA EMRE RE ERT RE
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CET NEMA MP IA 2, 6-— ES, A Ey eC HE SR
| SER DWAREHAR, RAR Pe PAE eS
q ASE HS BIT REA RAE. AIRFARES Baa An HRA
TER iP ESE HOE
4 成 年 大 鼠 (体重 140 一 160 Fe) HER 52K SK PAN HY HIRE PSE 35 FG, HTP
上 动物 在 氧 仿 处 理 前 三 小 时 ， 每 天 分 别 注 射 锥 生 素 By, (20 7/150 FERRER) BP AR (1
上 mmM7100 克 体 重 )。 共 20 K. WARM RE ARR RR. RM
轩 粉 内 抽 提 ,在 磷酸 组 种 液 (0.2 M pH74) 内 利用 无 氏 测 压 计 量 氧 吸收 (37"C)。
国 。 氧 仿 中 毒 普 不 引起 肝 内 酷 氨 酸 氧 化 酶 系 的 破 款 ， 酶 活力 保持 正常 对 照 动物 的 水 平 。
图 预先 注射 B* 的 中 毒 硬 物 肝 有 酶 制 旗 氧 化 酷 氨 酸 的 能 力 降低 ， 单 独 注 射 Bis 亦 导 至 同样
| 的 车 果 。 说 明 氧 仿 和 四 氧化 碳 引 起 肝 肪 损 嘎 是 通过 不 同 的 途径 ,只 然 它 们 两 者 都 造成 肚
一 1239 一
利用 无 氏 呼 吸 器 测 氧 吸收 ， ATOM, em: BET> , 透析 和 后 的 葡萄 糖
。 酿 相同 。 利用 研 酸 酯 本 作用 则 该 产物 生成 交 萄 糙 。 没有 测 册 CR a RR AA
3 以 上 千 果 着 明 Marr Re SOL RELA AA ESAS 0 9 — LS :
Beem BE RE ER BRE BLP PLM A BLO OR EE FL, ACHE LPI
. head . = = ad ~ ad
“= Se eB rm FS ae TES me Eee, ee I cede
he ee ee oe eS OM Rb eet ee ee ‘ 4 <
BU VARY BY TPF aE A ma A BAER TR PA A A 对- 洗 示 两 醒 酸 人 氧化 的 强 ，
et Sa - he
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内 脂肪 的 堆积 过 砚 前 人 的 对 和 果 相 符 。 基 期 注 射 3 Se RARER IRA
题 有 待 进 一 步 天明 。
气 仿 中 毒 动物 注射 栈 氨 酸 后 本 所 酸 氧 化 酶 条 活力 不 诉 小 天 高 。 长 期 注射 B HAE
在 注射 酷 氨 酸 和 后 酶 活力 显著 增加 。 说 明和 后 者 保持 酶 的 诱导 合成 的 能 力 。
长 期 注射 甲 硫 氨 酸 , 肝 肌 酶 制剂 氧化 酷 氨 酸 的 能 力 有 微弱 地 升 高 。 atic 4
Hy BLS A Eo . |
A GE Ey FB ALS Le AC I LE Wh RA, 】
但 氧化 对 - 拔 茶 丙酮 酸 的 强度 与 单独 注射 甲 硫 氨 酸 的 动物 相同 ， SAO PEEL LRH j
tin FF PS BA e—o—H y3 — OR RTE SE 1
， 粗 织 学 观察 结果 表明 ,与 氧 仿 中 毒 动物 相同 , 注射 厅 生 素 Bae 下 oF LEE Di
肝 内 都 有 脂肪 的 堆积 。 有 趣 地 指出 ,单独 维生素 BL 长 期 注射 同样 造成 肝 内 脂肪 严重 地 ，
gear ERB, 特此 致谢)。
可 溶性 核 及 核酸 的 栈 促 降解
I KB Re A EB
可 溶性 核糖 核酸 的 作用
EL ee
CF BSc crac, 上 海 )
已 知 可 溶性 核糖 核酸 (SRNA) A ALR CABLES ER, 某 些 核糖 核酸 酶 ，
”水 解 SRNA 和 与 大 分 子 核糖 核酸 (HRNA) 的 情形 也 有 不 同 。 关於 大 肠 桂 菌 核糖 核酸 酶
(E. coli RNase) 对 sRNA 的 作用 , RAWAM, Dunn 等 报告 E. coli RNase.
可 以 水 解 sSRNA 而 产生 四 种 单 核 苷 酸 , 但 Zillig #2 E.coli RNase (FAR sRNA ，
时 ,只 能 增加 其 酸 溶性 ,而 得 不 到 单 核 苷 酸 或 低级 多 核 背 酸 。 RMS TSN, 网
es E. coli RNase *EI# E. coli sRNA MSIE T —2RE. . |
E. coli RNase 基本 上 按照 Spahr 和 Hollingworth 法 制备 ， 但 用 EDTA PRR
RAVUREBERKEAHR. BMEAMABEB HRNA 按照 Crestfield See ib A BEREAN
K/BHA sRNA 根据 Monier 等 法 提取 。
上 还 各 种 RNA 和 E. coli RNase 制剂 此 用 了 DTA 透析 上 处 理 ， eer re |
i, UB FY BEA FERS S BBE ot FEA !
I, Nat 和 Mg*+ 对 酶 活力 的 影响 :
Elson 以 及 Spahr 和 Hollingworth 报告 Nat 可 提高 E. coli RNase 的 活力 ，
FORGE IE 0.3 Ms 而 Mg 将 酶 活力 有 抑制 作用 。 我 们 发 更，Nat Wawa
~~ 130 一
]
0.1M; 而 Met+ #MRBET, 不 但 不 抑制 酶 的 作用 ， 反 能 提高 其 活力 , kB 湾 度 篇 ，
0.025 M。 但 在 低 省 度 (0.0025 M) 与 高 省 度 (0.05 M) TF, # sRNA 的 水 解 则 表现 特殊
的 抑制 作用 。
ARK Elson 以 及 Spahr 和 Hollingworth 在 制 血 酶 的 过 程 中 没有 用 EDTA 成
EAB Mott 抑制 酶 活力 ,可 能 是 酶 制剂 中 含有 过 多 的 Met, AR RNA
样品 中 的 Mg++ 抑制 了 酶 活力 , 因 息 我 们 用 不 经 EDTA 处理 的 RNA 作 实验 ， Mgt+ 仍 ，
有 提高 酶 活力 的 作用 。
II. sRNA & HRNA ‘ena tate pashan:
E. coli RNase 降解 酵母 HRNA, 酵 峡 sRNA, E.coli HRNA #0 E. coli sRNA
不同 。 在 Mg++ HBT SRNA BA FP HRNA tie 其 顺序 如
后:
酵母 HRNA > 了 .rceoli HRNA > wate 8 sRNA>E. coli sRNA,
在 Nat SRET , HAT:
E. coli HRNA > 酵母 HRNA > E. coli sRNA > 酵母 SRNA。
é DEH: , Fess BBE sRNA 对 E. coli RNase 分 解 HRNA APE
_III. 提高 sRNA KMREO MBER:
篇 了 探讨 sSRNA 水 解 速度 较 慢 的 原因 , 作 了 以 下 准 个 实验 :
(一 ) E. coli sRNA AY 4) 28 ee .
SRNA RAMEN, MOET REE EA. 把 SRNA 分 别 用 下 远方
法 处 理 : (1) HNO. MA (4 Marini 法 )，(2) 在 S M 尿素 溶液 中 加 热 ,然后 透析 去 除
尿素 ，(3) 在 PHO 保温 以 除去 SRNA ERE BE HE
。 “用 上 述 任何 一 种 方法 处 理 的 sRNA ， 其 水 解 速度 奥 未 经 处 理 的 SRNA 基本 相同 。
(—)-E. coli sRNA 的 提纯 ;
-篇 了 排除 SRNA 样品 中 含有 某 种 杂质 抑制 了 酶 活力 的 可 能 性 ,用 公 氢 链 才 素 熏
isRNA 形成 不 洲 扒 水 的 复合 物 的 方法 进一步 提纯 SRNA, HAIG SRNA 的 水 解 速 度
PERRI ASI.
BA SRNA 水 解 速度 慢 的 原因 ,正在 炎 续 研究 中 。
IV. BREMNER:
(—) 用 大 量 的 酶 水 解 E. coli sRNA, 在 Mg++ 和 Nat MiewiweeT, 都 可 以 得
到 四 种 单 核 苷 酸 RK IED EEE ) 0
= (=) 当 用 酶 量 很 少 ,在 HRNA 完全 降解 需 酸 溶性 的 核 昔 酸 上 时， 了 .eoli sRNA 仅
有 部 分 降解 , 大 部 分 仍 可 用 酸 沉 泪 下 来 , 其 电泳 行 篇 与 未 径 RNase 处 理 的 SRNA 相似 。
但 在 酸 溶性 部 分 仍 可 以 得 到 四 种 单 核 苷 酸 。 本 文 报 告 的 粘 果 和 与 Dunn 等 一 致 而 与 Zillig
不 同 。
V. 其 他 RNA 降解 酶 的 检查 :
ABHARGA RNase 4, BE ASTRO. BTR
SRNA @& E. coli 酶 制剂 水 解 成 单 核 苷 酸 不 是 由 於 后 两 种 酶 的 作用 , RP PE
HET TRA, 磷酸 二 酯 酶 在 最 通 pH (pH 9.2) ，Mg++ 存在 下 , 降解 热 楼 性 的 股 氧 核糖
“#202 (DNA) 3c RNA 快 ， 但 在 上 述 条 件 下 ，，eoli RNase 制剂 对 热 感性 的 DNA
一 131 一
EERIE, BEDI ER ERC. 4
2 HEREOARRACREPEAR RNA EORACRRDRAN Mgt++ 同时 存在 。 CIR,
没有 无 机 磷 , 因 此 ,不 可 能 有 多 核 苷 酸 磷酸 化 酶 的 作用 。 此 外 ,水 解 生成 的 四 种 单 核 蔡 酸 上
HSC —TANE, TBAT SIR. 产物 的 性 质 也 排除 了 多 核 并 酸 奔 酸化 本 作用 的 可 |
pies 全 | 2
«SPR ADR 中 特殊 时 外 光
: 吸收 物质 的 研 完
王 昌 材 RK OD
( a 国 科学 院 生 物 人 LTA: 上 海 )
4)
TARR a eee ere ee Te TMM .
WOR, CHC ARE 258 mm, 低 举 在 227—228 my, 295 mw HEA —A WO, 250 ，
my. /260 my HIGH HES 0.83, 280 my/260 my 4% 0.38, 290 mu /260my #8 0.37, —
“收集 肝 瘤 病人 尿 液 ,用 HC) 调 到 pH 2, 通过 Zeo-Karb 225 阳离子 交换 树脂 柱 , 然 ，
BA, HE PORK Awe BE, ie} NHOH 9%) pH9, 38 ，
Zerolit FF 2 REF-ZeROM EAE, FAIKVCIRS FEA IG IGE ET LEVEE TG ，
HE DMEIG SIE ZOE ADD, IO NE , HF BL ETE 3 号 渡 狐 在 要 成 醇 - 氨 - 水 的 ，
YER MEAT ETD RE, 剪 下 Re 在 0.3 附近 的 此 外 光 吸 收 带 ,用 水 洗 膛 , 洗 膀 液 乾燥 全 得 白 ，
Re, PRR, GO ROE, FEBS 209 一 210"C sea:
—C=55.26, H=6.34, N=17.66, RABAT, H—H N—CH, 或 N—C.H; Jt, HF )
量 测定 需 160， 推 算出 它 的 分 子 式 应 是 C*Hao0:Ns 和 从 分 子 式 计算 C=5453, H—6.54, ©
N=18.17, 分 子 量 一 154.17 BERLE MARK LA CEMERARE Bee,
SEM RR RKO LES. ROKR, PAIR RR NS
SSL Dy te a BER ALY TET - e, SE -B-7k, TET -,
7) SEER AER, BA 4B) ASR EON a Ae BRP ARE PA ERE
PATS HGR. ly PR mE ROME FP BRE , DBE NT DG ARIE EECA |
BR. HE PH 3.0 & pH 9.0 PMP RR, HM AMBH, He DH 3.0 ame
的 泳 动 速度 与 尿 喀 喧 和 胸腺 吵 喀 相 接近 ,而 在 HL 9.0 IRE PA Hy y 1h BR Oe A I
相反 。 1
CH RAED ma, 自 PH 2 至 pH 12 均 相 同 , 最 大 吸收 在 258 mp, 最 水 吸收 在 时
227 my, 在 295 my 处 有 -一 小 吸收 尘 ; 250 my. /260 mye 的 光 吸 收 值 之 比 篇 082, 280 mu/
260 my 篇 0.36, 290 mp /260 mp 4 0.35; 在 260 mp 的 克 分 子 消 光 傈 数 ©-10-° = 14.84, 1
GRAPES REE, SEAL ROLE RS BL; 与 1N HC] 100°C ©
保温 1 小时，295 my EA, MC ARAN AB, AMIR IERIE AI | i
:
¢
i
— 132 一
| ei; 921N NaOH 100°C 保温 1 小 时 ,吸收 高 尝 移 到 254 my, 低 罕 移 到 223 mys 3h
四 氧 酸 加 热处理 后 的 光 吸 收 改 和 情况 和 与 TEN HC] 热处理 类 似 ，295 mp 的 小 罕 亦 消失 ， 语
| 明和 过 个 化 合 物 针 酸 碱 在 加 热 的 情况 下 不 稳定 ;在 室温 条件 下 可 与 省 作用 ,产物 的 紫外 光 吸
收 图 于 负 原 化 合 物 完全 不 同 ， PMRW; Wheeler 氏 颜 色 反应 呈 队 性 。
“em pee BiB AY eH C—O 基 所 致 ，3400 em-~: 从 有 一 强度 不 大 的 吸收 举 ， 可 能 这
Meee > OH He
Coc Veet ee ee ye re tae)
A CHC; USBI, ATMA, L1H Wheeler 氏 颜 色 反应 旺 除 性 的 灶
38, AR C=C 中 至 少 有 一 个 矶 原子 上 的 氧 已 彼 其 他 基 轩 替代。 和 综合 元 素 分 析 ,电泳 行
， 子 和 二 个 氮 原 子 所 组 成 的 杂 环 化 合 物 , 杂 环 中 二 个 氮 的 位 置 可 以 是 卷 位 ,， 间 位 或 对 位 ,和 从
VETTE, PRT SMO ae Sie ALL ET AO I AS
y 近 ， FASEB A as RES FT BEI 它 的 构造 式 可 能 是 :
2 . 7
y ety
j A a Bt fs an
q 一 R 一 N 1 42COHUII)
\s ¢ | oe 5 ss
式 中 RRR 至 於 车 构 的 最 后 肯定 ， AS EAC a SERA
FULHAM RGR , F HERE Ao .
:
5
a
;
” ， 秆 内 光 谐 分 析 粘 果 : DUKA 9 1400—600 cm-: IIE BEBIME, HA BATT,
; 很 可 能 是 杂 环 芳香 化 合 物 ， 1600cm-: pir A Ke BEA A C=C 或 C=N 键 存在 , 1660
RULER RATS, DTCC TUT ERO ITE, ALLIES
FS CBRE SEA BAT PSE OT BEER , 推 想 过 个 化 合 物 的 结构 , 有 可 能 是 由 四 个 矶 原 ，
| 46300 mp 附近 ， 奥 过 个 化 合 物 相差 颇 大 ， me We ES Ay Hn PR EO I Be ENE BS BE
ba “4
Tries Pa haat
" = is I . 4 wana
‘ ae POs Se a ae a Te
PS ee eee ae. ee ee hc
sx
he Ne 了
FET EAE RE ER,
sitamuliie .
多 新 垣 fate
Ca
SURNOLETLeRERA, EB A AER, RE (Bombyx mori)
ee ee
PEAR WAR 412.8% ， 丙 氨 酸 32.4% ------ BFE (Attracus ricini) HE STAM ;
| 27.8% , 丙 氨 酸 50.5% «+ BEBE A A I CE DORE BEES TERE
RNA AOS RHR RNA HERCARIA I, HERE RE RNA WARE AER,
作者 全 经 研究 过 (未 发 工作 ) OBER MILB: SRNA 及 HRNA* 的 结构 ， 本 工作 将 报
Hage yt ieee SRNA 及 HRNA 的 和 结构 分 析 。
3
;
|
$I OT 天 ( 即 上 敌 前 1 一 2 天 ) OA HSE (HE) RAM ( 辈 九 雪 漠 ) E
和 后 按 Crestfied 法 及 Kirby 法 制备 总 RNA, HA NaCl 4B sRNA Ba HRNA, yan
Deli il fis BS es AT, 不 过 SRNA 中 有 时 会 混 有 HRNA， 此 时 如 将 5RNA ~
再 用 NaCl eR 1X, A] HRNA REA PMRRK.
也
57804 RNA 用 1M HCl 水 解 测定 其 碱 基 钥 成 ， Fae ARE :
Fe DLE ERE DLA SCARS 计算 时 以 每 毫克 RNA Bie 和
的 微克 分 子 数 篇 100， 其 他 粘 构 以 其 百分数 表示 之 。
‘MAR HRNA 的 碱 基 租 成 基本 相近 ，Matthews 也 分 析 过 草 麻 营 RNA 的 碱 基
粗 成 ,他 所 报告 的 粘 果 和 与 本 工作 中 草 麻 曲 HRNA 相符 ,他 没有 分 析 RNA 的 烙 构 ,全 测定 “
其 碱 基 租 成 , 碱 基 钥 成 固然 反映 一 定 的 粘 构 规 律 , 但 烙 构 分 析 会 更 露 敏 地 发 现 不 同 RNA
的 差别 ， 两 种 秋 腺 HRNA 的 碱 基 和 组 成 内 然 相 近 ， 但 其 桔 构 则 有 相当 差别 ,家 均 符 腺
HRNA 中 所 含 PypApCpNp，PypApUpNp，PypGpUpNP，PypUpNP 等 糙 构 的 百 ，
分 数 高 於 草 麻 仅 , 而 PypGpCpNPp Aime mi.
MAM SRNA MASE OR, RLM SRNA ofa PypAADCD
Np, PypApApUpNp, PypApCpNp, PypGpCpNp, PypApUpNp, PypGpUpNp, q
PypUPNp SRR ADEE SRNA, ERE RBS ee oa oid .
anf Aba ASE Ee i RE A — RR
同一 来 源 入 腺 SRNA 和 与 其 HRNA 有 题 著 的 差别 。 了 RNA 其 所 合 PypApApAp 3
CpNp, PypApApCpNp, PypApCpNp, PypApUpNp, PypGpCpNp, PypGpUpNp, ~
PypUPNp 等 结构 的 百分数 均 较 sSRNA 高 很 多 PypApApApCpNp 及 PypUpNp 7 ~
HS. 前 者 在 SRNA 中 闪 乎 找 不 到 ,啤酒 酵母 及 天 包 酵 母 SRNA 或 HRNA 也 有 类
* HRNA: 大 分 子 核糖 核酸 。sRNA: HSER,
** Ap, Gp, Cp, Up, Pyp 分 别 代表 跟 嗓 哈 , 扁 便 嗓 哈 胞 喀 人 至, 尿 喀 定 , 喀 吓 的 单 核 昔 酸 。NDP 代表 注意 里 核 普
酸 。
一 184 一
位 的 规律 。 WRU, HOARE: Je ONE, URI HRNA 的 嗜 啶 推 中 ，Up>
Cp, 而 sRNA 哮 啶 堆 中 则 Cp> UP， 比值 ，sSRNA #948 HRNA HORI
”分 析 了 四 种 来 SRNA，HRNA cans ueavanaaeuees, 两 种 条 腺
ER, TAR ANE I |
CSCS re BR i A FT A TA, RT TEE
TR ERS. RASH L eK SH SG — TE BB) »
RRB ACI We
a MERU
VO AE
(复旦 大 学 生物 系 , 上 海 )
”天 艾 应 用 瞪 基 关 似 物 来 进行 核酸 粘 构 和 和 蛋白 合成 关 傈 的 研究 ， 文 献上 已 经 有 不 少 记
Wh: Creaser 研究 了 8- 氨 马 叮 喻 对 金黄 色 癣 萄 球菌 中 6- 牛 乳糖 昔 酶 形成 的 影响 ; Naono
“等 人 研究 了 5- 氟 尿 喀 啶 对 大 肠 查 菌 中 B- 牛 乳糖 苷 酶 及 龄 性 磷酸 酯 酶 形成 的 影 萎 ; Ha-
mers 等 人 研究 了 2- 硫 尿 喀 啶 对 大 肠 查 菌 中 B- 和 牛乳 糖苷 酶 形成 的 影 兆 , TET AS
| 活力 但 具 驶 疫 相关 性 的 蛋白 质 。 前 人 的 粘 果 都 说 明 龄 基 类 似 物 参 入 了 核糖 核酸 , 闭 致 蛋白 、
ACH, AMAT EH, 过 些 实验 都 没有 肯定 龄 基 所 参 入 的 是 那 一 种 RNA?
HM RNA 双 是 和 和 蛋白质 千 构 的 关 傈 最 需 密 切 ? 直到 最 近 Champe 和 Benzer 用 5-
RMR EARS PT 4 噬菌体 7 II 突 达 型 的 回复 突 达 时 才 认 篇 5- 氟 尿 喀 啶 所 参
AMEE EGR RNA, 我 们 选择 了 大 肠 查 菌 的 确 酸 还 原 酶 作对 象 ， maT 2- Tie RE
| eM AY RSE, SAREE HAE.
POS DEL HEAL a ECA PT: 膛 原 需 亚 硝酸 离子 的 反应 。 K LE
| NOs- 的 基本 培养 基 上 繁殖 时 ， 或 先 在 不 含 NOs- my IEA HERE LF PH BRASH
NO; HAMA PAE 10 分 钾 后 ,都 可 以 观察 到 确 酸 还 原 酶 的 活力 。 我 们 所 用 的 菌 种 是 大
(BBA P 15, HAA NO.” sy HHL PRK HK PE, OE L,I SS
| 个 菌株 内 粗 成 部 分 的 确 酸 还原 酶 含量 是 很 低 的 。 酶 活力 定量 测定 是 根据 所 形成 的 NO
的 量 的 测定 市 进行 的 。 在 进行 酶 活力 测定 时 样品 中 都 加 入 一 定量 的 氧 徽 素 ,使 酶 的 糕 炉
”形成 略 止 。
RRR:
—. BRHASME: WHERE NO. IEA FEI Py A AA, BRA Gory NO:-
AMM, FFE 10, 20, 30 MAME ,进行 酶 活力 测定 。 测 定 得 酶 活力 是 和 请
| 团 时 间 成 直线 增加 的 关 傈 。 如 在 诱导 液 内 同时 加 入 2- 硫 尿 喀 啶 , ERE IES 50 me%,
同样 在 四 个 不 同时 间 内 取出 样品 测定 酶 活力 。 在 过 种 情况 下 诱 半 30 分 猎 的 样品 中 的 酶 ，
一 135 一 .
活力 也 只 URE 2- it MEME A 3 RSE I, Ti ABDI LS By 60 se |
sits bacon
=, GMM AA RE 2- ett feimabNe
IM A. 2— Frit i Mae Mie BE ik he UE BE 4s 10 me % iF LH A, SEA ETE 77 9 SSR 60% 5
当 2-H MEME D) 30 me % KF, BREA 6% Pez. MAREE
HS 2B PR ORME EL OTE, LAY BRET Ja BS SN, FR) 9S FS SE 0 A PRP A, 2- 硫
尿 喀 喧 ， 抑 制作 用 一 般 自在 10 多 以 内 , SHES 7a WF A Ae A hd AR Be, 偶然 也 人 经 出 现 过 接近
50 儿 的 抑制 作用 。 和 过 种 抑制 作用 在 本 质 上 也 和 在 诱导 时 加 入 2- 硫 尿 喀 喧 的 影响 不 同 : 前
do 而 后 者 则 可 被 天 然 龄 基 所 解除 。
三 、 天 然 龄 基 对 2- 硫 尿 噬 啶 影 叶 的 解除 : 如 果 在 诱 遵 时 除 加 入 2 Ro Si 4
BES 50mg%) 外 再 加 入 尿 吵 啶 (最 后 省 度 篇 50mg%), 便 可 以 使 酶 活力 恢复 过 到 对 照
组 〈 不 加 2- BM GEAT SR MEME) BY 867% 0 RAR AL nh Se SU RE, Hamner te
FEMS AAR ORE. HORM ME LY RET AE, 7% Fea :
四 、 在 繁殖 过 程 中 加 入 2- Bi PRO ES I A ASHE Ba y
EATS 100 mg 多 的 2-H RUE RACE, BDU, WHET, 然后 )
— ‘iinet
ees oa
— ese
E47 ML, A 20, 25, 30 Ge Hh RTE, BERNER LT CAMARO
PRUNE He FETE Po TE A EH MEP ER, TS
RBI A 2-H MOEA RE: EI eI PA
RFE NOs- 的 诱导 液 中 进行 诱导 ,在 10.20 30 SIMA 2-H ORME EAE
50 mg 匈 )， 取 出 一 份 样品 测定 酶 活力 , 另外 一 份 旭 焰 蒜 保温 一 定时 间 合 测 酶 活力 , 精 果 表
明 在 加 入 2- 硫 尿 喀 喧 后 确 酸 渤 原 酶 的 形成 开平 立即 停止 。
和 从 上 面 的 实验 粘 果 看 来 ,可 以 训 篇 2- 硫 尿 喀 啶 对 硝酸 还 原 酶 的 诱导 形成 有 抑制 作用 。
从 胞 吵 啶 和 尿 喀 啶 的 解除 作用 看 来 , 也 可 以 初步 认 篇 2- 硫 尿 叶 啶 参 入 了 与 合成 硝酸 酶 有
天 的 核酸 中 ,更 篇 可 能 的 是 RNA, 而 不 是 DNA。 在 2-H ENE RA ，
原 酶 的 族 半 形成 照常 进行 , 不 受 限制 ,过 和 2- 硫 尿 喀 啶 对 大 肠 杜 菌 已 巧 的 B- 咎 乳糖 昔
酶 的 影响 显然 不 同 ( 江 行 娟 等 , 未 发 表 ): AMAZE 100 me% 的 2- 硫 尿 吵 啶 中 繁殖 到 当 数 |
期 ,收获 洗 兆 ,用 含 乳糖 的 诱 半 液 加 以 诱 潮 时 ,，B- 牛 乳糖 苷 酶 的 活力 在 多 次 实验 中 都 有 极
篇 显著 的 降低 , 酶 活力 仅 过 对 有 照 的 3 一 40 多 。 本 文 所 报 六 的 实验 事实 足以 支持 Jacob 等
人 所 提出 的 信息 传 甫 体 假设 ， 内 篇 根 据 过 一 假 屋 可 以 发 想 在 芳 革 时 才 有 和 硝酸 膛 原 酶 有
关 的 大 量 m-RNA 形成 ， 因 此 也 和 窟 有 在 诱 闭 时 加 入 2- 硫 尿 喀 啶 才能 参 和 人 过 部 分 上 NA，
ETTORE HE, 於是 就 不 能 合成 正常 的 酶 蛋白 。 但 是 6- 牛 乳糖 昔 酶 的 例子 却 不 能 这
样 来 解释 ,似乎 决定 6- 牛 乳糖 昔 酶 粘 构 的 核酸 不 仅仅 是 思 -RNA,， 而 可 能 和 核糖 核 蛋 白
体 或 ,s-RNA 都 有 一 定 的 关 傈 。 HME DBM A 2- 硫 尿 喀 啶 的 实 孜 千 果 看 来 ，
WRB SA WIE Jacob 等 人 提出 的 m-RNA 是 不 稳定 的 假说 , Aw m-RNA BE
定 的 ， 那 应 在 加 入 2- 硫 尿 吵 啶 之 前 所 形成 的 m-RNA 必然 还 可 以 炎 纺 起 作用 , BE
半 中 涂 加 入 2- 硫 尿 吵 啶 后 酶 活力 仍 将 秋 炉 增加 , 而 事实 却 与 此 相反 。
= 136 一
a 和 DNA 的 由
Be 人 ian REE 全
IL . aReAO MORRIE dnt 3
te: ae ae 景 沛
中 国 科 学 院 生物 化 学 研究 所 , 上 海 )
| 前 文中 , 我们 售 报 告 , 小 牛 胸腺 DNA 在 有 保护 物质 存在 之 下 , 可 经 受 6X 104 偷 照射
而 扰 降 解 发 生 ; 值 照射 合 即 潮 笃 隐藏 破坏 , 阔 评 剂量 成 正比 地 发 展 。 大 分 子 的 降解 是 隐藏
破 壤 累 积 的 烙 果 。 即 单 键 打 断 的 累积 洲 致 允 键 对 映 部 位 同时 打 断 而 产生 分 子 的 降解 。 本
CREAR ARES FES OAT ae. 而 且 在 较 低 剂量 下 , 即 近
| 於 一般 整体 照射 所 用 的 剂量 水 平 , 利 用 可 以 检查 隐藏 破 壤 的 方法 ER DNA 也 可 以
测 出 无 天 分 子 降解 的 车 构 破坏 。 兹 提出 实验 根据 ,说 明 隐藏 破 壤 轩 致 的 氨 键 不 稳定 性 与
。 氢 键 破坏 之 间 的 区 别 。
pig HR DNA 360 榜 品 傈 按 Zamenhof WR; 在 0 一 4?C RAR. 8 0.2 M
NaCl 透析 48 小 时 , 换 外 透 液 5 一 6 次 ,不 同 剂量 照射 后 , 按 前 文 所 壕 的 方法 测定 一 原 粘 度
(7sp/C)。 糙 果 表 明 , 当 剂 量 小 套 1000 偷 时 ，DNA AEE EI, (LIL 76°C 保温 60
分 子 降解 。
利用 甲醛 反应 也 苹 明 了 上 壕 隐 藏 破 款 发 生 礁 分 子 降解 之 前 的 规律 。 未 照射 的 DNA
] FE 1% REAM 70°C 保温 15 分 钾 , 间 无 紫外 奴 收 的 改 罗 ,而 1000 ARRAN, WEAR ARSE
和 致 分 子 降解 ,但 10°C 保温 15 分 甸 可 使 紫外 奴 收 发 生 明 题 的 增高 。 另 一 方面 由 Tm (3%
外 吸收 增高 过 去 最 高 值 的 允 度 ) 的 释 化 看 来 ,未 照射 的 DNA 篇 78.3"C, 500 偷 及 :1000 偷
照射 后 分 别 降 低 外 77.3°C $d 76.4°C 足见 ,利用 检查 隐藏 破 撤 的 方法 ,可 以 枫 察 到 小 剂量
”照射 所 引起 的 DNA 千 构 损伤 ,过 个 记 体 照射 的 剂量 可 以 低 至 一 般 整 体 照 射 的 剂量 水 平 。
隐藏 破 下 的 主要 表现 篇 氨 键 的 不 稳定 性 。 如 前 所 述 ， 照 射 后 的 DNA 和 与 未 照射 的
DNA 相 比 ,可 以 在 较 低 的 渤 度 就 出 现 粘 度 下 降 、 紫 外 明 收 翰 高 .甲醛 反应 顺 赐 进行 等 。 此
外 ,降低 溶液 的 DH, RRS DNA 也 表现 有 较 高 的 氨 键 不 稳定 性 ; HU pHs RARE
起 了 DNA 的 氧 键 破 壤 而 使 0” sp/C 下 降 需 原 二 分 之 一 的 p 吾 值 , 则 未 照射 DNA & pHs
篇 2.9, 6X10* 偷 照射 后 增高 篇 3.3。 由 引起 msp/C 下 降 10% & DH 值 分 析 , 前 者 篇 3
而 后 者 篇 4.0。 一 些 其 他 方法 也 可 利用 於 检查 氨 键 的 不 稳定 性 。
射线 导致 的 氨 键 不 稳定 性 与 射线 直接 引起 的 氨 键 破 壤 二 者 之 闻 是 有 明显 区 别 的 。 人 和合
上 经 100°C PRISE DNA, 加 甲 醛 后 可 在 室温 (25°C) ADM aE
| HARB ATEY DNA SERRA IS Ay SB Te, BOB T AP Bic al SES ESE 5 TEL AHS RR
MEEKER, AGE im Beet, PRE BE RIL RCE — 2 HOE ea» TT ELSES RAS at BE — FE tt
ff HS 137 一 一
已 ea: 随 剂量 增 大 ， eol oo
GREE She. Ath, RNB, DNA 二 授 粘 构 的 破 副 ,会 使 其 奥 金 局 中
见 子 粘 合 的 能 力 大 篇 下 降 。 RMR SRA CANE, RT DNA 在 ，
100°C Pate SATE Ba Cutt 烙 合 的 能 力 便 显著 地 下 降 。 而 6X10: PRR H IEEE. HB
ANSE DAE RR Se DNA 分 子 即 或 已 有 显著 的 降解 。 但 伙 螺 旋 氨 键 粘 构 系 狂 冰 未 遭受 磋
重 破 壤 。 可 网 在 研究 射线 对 DNA SMH, 若 不 注意 到 氢 键 不 稳定 性 的 存在 ， 应 用
影 都 氨 键 稳定 性 的 条 件 来 研究 氨 键 的 破 副 , 必然 导致 解释 上 的 混 亿 。
FMS BR By ss ie DNA Be Re MABEL. 另 一 方面 ,在 单
键 断裂 的 末端 , 特别 是 位 於 双 螺旋 大 分 子 发 生 降 解 的 未 端 , 必然 有 氢 键 的 破 闵 。 因此 , 照
射 后 出 现 的 氢 键 不 稳定 性 奥 由 照射 直接 引起 的 氨 键 破坏 可 能 都 是 单 键 断 裂 引 起 的 精 果 。
———
2
ee X- 射线 照射 对 大 白鼠 胸腺 ，
核 蛋 自 (DNP ) ) 的 影响
Beak | WAC
《中 国 科学 院 生物 化 学 研究 所 ,上海
电 兄 辐射 的 各 种 生物 效应 ， 如 条 胞 分 裂 之 受 抑制 ， 染色 体 的 折 弄 ， 遗传 突 克 等 都 指出
竹 胞 核 或 其 租 成 部 分 的 损伤 可 能 是 较 关 键 性 的 问题 ， 允 体 实验 也 有 不 少 六 据说 明胶 氧 核
糖 核酸 (DNA) 及 DNA 蛋白 (DNP) 在 生物 大 分 子 体 系 中 间 是 对 辐射 最 敏感 的 5 但 是 ，
整体 照射 实验 中 却 不 易 测 出 明显 的 分 子 水 平 较 原初 的 释 化 。 因 而 Hagen 关 亦 照射 引起
DNP 稳定 性 扫 化 的 报导 值得 重视 。 他 利用 Kirby &®}—B (m=AZMM TCA) 上 处“
PERS ETE DNA 和 与 蛋白 的 方法 , 以 在 一 定 群 涉 度 的 条 件 下 , DNA 拍 入 水 层 的 量
测 断 DNA 和 与 蛋白 粘 合 键 的 稳定 性 ， 发 现 照 射 后 胸腺 组 织 水 匀 浆 的 DNP lee
条件 下 较 正 常 租 经 DNP 之 抽 提 棕 需 高 ,以 篇 可 能 是 照射 破 坟 了 某 些 DNP 的 金属 键 ,使
ZEAE Zi. 和 这 种 抽 提 奉 的 委 化 出 现 得 很 早 ,对 小 剂量 如 50 LA, I
化 程度 伍 剂 量 成 正比 。 过 种 磷 化 的 敏感 度 似乎 是 以 DNA 粘度 或 层 析 行 乱 等 篇 指标 的 工
作 中 , 不易 见 到 的 ,因而 引入 典 趣 。 但 是 显然 ,从 研究 射线 原 发 损伤 的 性 质 的 角度 而 言 , 征
种 磷 化 的 意义 要 取决 从 其 原初 程度 。 胸腺 是 对 射线 极 篇 敏感 的 ,小 剂量 照射 后 立刻 有 大
EWI, ERS LRA SM EI, URE MOR, TBA
倒 化 完 傈 发 生 在 条 胞 死亡 后 抑 死亡 之 前 ? RRB. BY MiB T RM
的 分 析 :
BET Kirby MHA, 沙 做 了 小 修改 ,我 们 首先 重复 了 Hagen HHA. BH
了 同样 趋势 的 车 果 , BDA (BDA DNA RSE DNA MGT HL) SIRE BE
作 图 ， 照 射 800 ASS BHO BR SE TE BR Sos DNA 抽 提 曲 态 移 向 较 低 的
申 淡 度 ,但 是 仔 帮 分析 在 不 同 克 江 度 下 照射 引起 的 抽 提 李 提 高 是 不 画 相 同 的 ,特别 是 工 5 多
K10% TCA ZEWKBAE:
— 138 —
eet
ee
er *
ey
(1) Vimy eh} 800 偷 后 构 化 的 时 间 曲 线 来 看 ，1.0 狼 TCA 抽 提 棕 的 境 加 随 昭 射 和 后
了 蛙 间 增长 而 增加 ,过 到 一 定 水 平 后 不 再 有 枕 化 。 而 LOD THERM, eB
罕 后 旋即 下 降 。 过 种 趋势 与 胸腺 秋 胞 在 照射 后 固 蓉 率 杰 化 曲线 极 篇 相似 , TS
MPR RMR, Ba AA A LAT TPs PAS BY SE A BE
HRSG 6 小 时 左右 。 as
Boars Peete ire. (ae Paes 1% TCA Fhe SA LH Bl 300 Ht
PERE 15% AL, iti 1.5% TCA HEAT ULE ECD 和 后 者 的 情
DL BU MAES A
(3) Fo FBR Sh Be HEE — PA AO — A CBE 104),
PUP READ) 1.5% Thee AL SB A BA HE. EA 10% ,中 然 此 种 药物 就 动物
存活 这 来 制 断 是 没有 保护 作用 的 ， 另 一 方面 ， 用 已 知 药 物 AET 及 我 们 过 去 发 现 的 C 10
(代号 ) 等 者 存活 率 的 提高 起 一 定 作用 的 区 和， 其 实验 粘 果 则 1.0% 88 1. 5% 2H RAK
Fo
Heh 1.0% Be 1.5% TCA Zabtba itis SALARIED.
LEER RIL: 1.5% TCA Z HEMLINE
| 是 死亡 己 后 的 现象 ,其 抽 提 棕 反映 的 DNP i WE ALFARO BL, 75 A A Ba
«Ro
BH 1% TCA 所 能 抽 提 的 DNA ATER TSR FRE, IRS BREN AL ARTI,
A ERI LETS A Rb A ABE 15 儿 左右 ,似乎 表示 胸腺 匀 北 中 DNP 只 有 一 部 分 在
KM BUR EET AA BE, Ties DNP 可 能 是 稳定 性 较 低 , 也 可 能 是 性 质 稍
- Ro 由 套 胸 腺 中 的 普 胞 组 成 比较 均一 ， 过 部 分 DNP 不 像 是 代表 某 一 类 估 全 体 机 胞 狗
苇 儿 的 特殊 敏感 硼 胞 ,更 可 能 是 由 於 相同 的 普 胞 中 , 都 有 过 样 一 部 分 敏感 的 DNP,， 因 而
«SOBEL HE A HS, MEPS PAT ARE, ED eR
”是 相符 的 : BACAR HE RT ER, RA AEEAR 300 BHAA
， SE ME, SIT LT SSS SUA ST STL AT RE OS,
RESALE EAE ESR, 300 偷 足 以 损伤 公 部 得 胞 的 设想 是 与 Trowell
| 的 千 果 相 符 的 ,不 过 他 是 以 照射 合 48 小 时 迁 留 的 胸腺 普 胞 数目 需 指 标的 ,而 在 我 们 的 实
| 礁 条 件 下 , 在 六 小 时 后 即 能 观察 到 。 以 上 的 推论 说 明 1% TCA 抽 提 牵 做 篇 反映 射线 损伤
的 指标 有 一 定 的 原初 价值 ,值得 进一步 加 以 苹 实 和 研究 。
( 林 良 蜗 同 志 参 加 部 分 实验 工作 )
1
Ms,
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:
ES ee ees | ae
(A) PAR 8 RABUN Ee a AS AA AP EAI
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a fae ae eee eee eS ee a Te,
ARCH
nee 的 研 完
(pista ectoncaeorse. 上 海 )
Kowlessar His, 大 白 秘 经 整体 照射 全 尿 中 DNase HAF 由 让 DNase q
AUR GU AR KEE OE, Kees RR DNase 活 ©
IER GOO IE. 近年 来 有 关 DNase 的 研究 已 有 不 少 进 展 , 研 究 方法 也 不 】
断 改 进 。 新 的 成 就 都 指出 ,对 扒 Kowlessar 等 早年 所 观察 的 现象 有 必要 作 淮 二 步 探 讨 。，
我们 就 大 白鼠 尿 中 DNase sid iain eau X- AED TEP HES ，
了 以 下 粘 果 :
1. Kowlessar A501 — SRC IIE ELBE DNase YI Ao 我 们 发 现 尿 】
| S-OHKAK, 其 内 含 物 对 二 共 胺 发 色 有 服 重 干 援 , 不 能 反映 DNase 的 实际 活力 ,只 有 ，
将 尿 透 析 处 理 和 后, 二 苯胺 法 方 能 使 用 。 此 外 利用 Kurnick. PEI RELL F
酶 活力 ,也 可 得 到 较 可 靠 的 结果 。
2 我 们 探 用 上 壕 雨 种 不 同方 法 分 析 了 透析 尿 中 DNase 的 反应 条 件 ， 得 到 相同 的 灶 |
果 。 发 现 只 有 -一 个 最 通 p 也 高 宣 , 在 6.5 附 近 , PLAT AEAS DNase I $a DNase II 3th]
作用 的 车 果 。 篱 了 区 分 两 酶 的 最 通 DH, 全 观察 了 激活 剂 和 抑制 剂 的 影 咯 ,发 现在 反应 液 |
内 加 入 0.01 M 砷 酸 咯 时 ， 在 pH 5.6 和 7.6 HAWS. 在 两 种 DH 条件 下 都 需要 |
Mg++ 激活 , 3: 1.98 Kurniok 看 法 相符 , 即 其 最 通 滤 度 与 pH 相关 , 较 低 的 DH 条 件 下
要 求 [Mg++] 较 高 。pH 5.6 时 的 酶 活力 随 [Mg++] 之 增加 而 腊 高 ,到 [Mg+i] & 0.025 M
Siri. RSET [Mg 1 Pi Bea HB PH 7.6 酶 活力 划 在 sacha #8 0.012
M 时 即 到 过 最 高 值 。
3. 用 甲 基 丈 法 比较 透析 前 后 尿 中 DNase 的 活力 ,发 现 尿 对 水 透析 24 IE, DNase ，
HBA TE, MAB 100°C 者 过 一 小 时 的 全 尿 可 使 活力 全 部 恢复 。 REGAEAE
中 含有 可 透析 对 热 稳定 的 DNase 激活 因素 。
4. Bhp X-AE NCH 500 偷 , 尿 中 DNase I 和 DNase II 活力 增高 2..3 伪 。
POEM, NEVA WARK, ERMA. 加 孝明 的 照射 租 尿 ，
BOER KP RACH IER RRB AUR PW RSE. ,和 过 些 千 果 指出 了 照 ，
射 引 起 的 也 Nase 活力 增高 可 能 是 酶 蛋白 本 身 和 它 的 激活 因素 两 者 都 受 了 影 澳 的 丢 故 。
* 山西 分 院 进 修 生
一 140 一
H
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g FER ATR 17-8
o PEW AEB IK) LE
sas ‘PRG WOE mar = 亮
Be oa (上 海 第 一 恬 单 院 生物 化 学 致 研 组 )
| 病 COE SAMS Se LESS ENR RE ALT A AE
Bee Li cus Fe AMAL Se » RUE EAC ep i Be ee OF Fe LT BT AAR
BLAIR RRR. HSI ITI
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| ik, HIRE LR BROW RBA EEE
ASCHER Reddy F2k WE Rp 17- 羟 类固醇 合 量 。 除 78 IE MI A OR A.
Hh RAPES TY SRE OE EAE ( 4S 23 一 30 BE) 41 A HOR EAA TUE LES IE AR
WERKE. 如 表 所 示 : 41 位 正常 人 的 24 小 时 尿 中 17- 状 类固醇 含量 平均 值
乱 772 二 2.95mg ,其 中 男子 23 人 的 数值 篇 8.16 土 2.9mg ,女子 18 人 的 数值 篇 7.33 上 3.06，
mg, 辟 阳 唐 病 人 40 例 的 数值 篇 2.504 1.76, REMI A 38 PCNA 7.91451. BS
人 径 中 医生 凤 药 物 治疗 后 , 尿 中 17- 返 类 ] 固 醇 的 含量 均 有 升 高 (如 表 2 所 示 )。 展 阳 虑 者 在
沙 的 第 二 周 未 已 回复 至 正常 值 ,在 随访 的 一 至 一 个 个 月 内 , 亦 复 正常 。 由 此 可 见 , 我 们 冕 ，
察 的 病人 中 有 七 种 不 同 病 种 ,但 就 其 中 共同 表现 的 展 阳 处 者 而 花 , 都 有 尿 中 17- 故 类 固 醇
含量 的 降低 。 当 阳 虚 症状 由 秦 应 用 稍 寡 药物 而 改善 时 , 则 尿 中 17- 羟 类固醇 含量 亦 随 之 回
BERGE WMI AL He BSE EK, AZ EER a BOE FA AL A AB, FE
后 内 有 升 高 , BHA iv). kp 1-RRABa LE LR RARER AS mK,
| ULC Re, SAH EE Ae A RAE 1-H,
| CRP salt iit es A. 17 FFB] BE ED a SG SN eR Ts PEE — 2 SAT OPE 0 8
CS RMSE LR RAS ACTH ARATE. BARES 25 单位 ACTH 静
> WRITE 8 ANE K ( 共 50 单 位 ACTH) fh, TEA AO LR A EE BERGA 24 小 时
PY, PR PLT SE RA CAR AR A 3—5 4B) , BCRP AREE HS Al 24 小
了 时 ,第 一 个 24 MIRE PS HP HS SS A 24 ZRH BY 1.80/1.75, FEF 11 位 无
Prim Zee AAR, 结果 见 表 3。 在 20 RMA AA, AT MIRA (44 14 |
PA Ria hi SP HP BAP) EE SS — ATH 24 小 时 内 的 反应 低下 ,在 第 二 个 24 小 时 始 过 正常 高
Ao eR ASY ACTH 的 刺激 能 过 正常 的 最 高 值 , 但 在 反应 时 间 上 则 题 著 延 运 。 过 种
一 141 一
PATRI LN, AGE SLINTT RACES BR ERR
病 ) MEAT PER a Ye RANCHES IAS Th AS EW Me SE HY, PA a
§ REA HEL BB , 均 获 是 著 疗 效 。 我 们 推 想 : 相同 辟 虚 的 不 同 疾病 可 能 具有 共同 的 ，
代 衣 调节 机 制 失常 ， 因而 用 相同 祖 臂 方剂 可 以 币 正 此 种 失常 的 共同 机 制 。 如 果 我 们 能 够
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现象 正如 甲状 腺 机 能 低下 症 者 一 样 。 甲状 腺 机 能 低下 症 患者 对 ACTH 的 应 答 试 硬 亦 有
两 种 情况 ,一 类 反应 正常 , 一 类 反应 延 还 加。 a ES LA
过 到 最 高 反应 值 , 因此 可 以 更 篇 其 皮质 从 无 器 质 性 的 损 吏 ,但 功能 已 发 生 降 配 ,此 种 障 研
可 能 是 由 礁 长 期 受 体 内 分 泌 过 量 的 ACTH 所 造成 的 衰竭, 或 者 恰恰 相反 ,而 是 由 基体 内
ACTH 分 泌 太 少 (其 原因 亦 可 能 是 衰竭 引起 ) ， 以 至 平时 皮质 少 受 ACT 也 的 刺激 ， 所 以
对 注入 的 ACTH 亦 表现 反应 失 露 的 一 种 惰性 现象 ， 以 还 相 闪 全 可 以 天 二 中 信人 六 及
“ 必 ? 的 意义 。 或 是 其 他 原因 , 何 待 今后 作 进 一 步 的 研究 。
表 FEAR A BIER A 24 小 时 尿 中 17- 关 类 固 醇 的 含量 aa
mB! it : & 虚
尿 中 “17- 郑 RP We
mg/24 小 时 尿 mg /24 小 时 尿
3.06 士 1.62 10.38+3.9
(250.10)
11.4.0
oe
>
-00.37
(Pee 01)
Pa TENS i,
6.16 士 3.34
(P>0.10) ,
1.80 一 -了
2.90 士 1.62 一 j
2.30 9.20 a
0.90 4.30 ;
. 2.6041.76 司
pies 7.91 士 4.51 上
7.72 士 2.95 |
7.33 士 3.06 )
表 2 BaD A CRUE RARER 24 小 时 尿 中 17- 郑 类 固 醉 的 含量
mg 17- 狐 类 固 醇 /24 小 时 尿
在 fit i 转 P@
AHA | 治疗 前 RK 例 数
| 一 |
治疗， 前 15 3.24-+0.46 (0 一 6.566) ie
阳 i | 15 7.64+0.82 © (2.95—18.3) P<0.01 |
vole 3 15 10.30-+0.82 (5.04—15.7) | P<0.01 5
治 疗 前 18 9.87 士 1.6 (2.40—24.6) as
wa | OH 13 10.52+1.7 (3.35—2.9) mS
or 第 二 通 13 10.73 士 1.7 (4.80—30.60)
* P faS8 fal CEE 4 HAL
一 143 一
表 3 ERARP RAMS ERR AS LIRR ARR (ACTH)
应 答 试验 的 转 果 (24 小 时 尿 中 17-ARAE & AC)
| 一 | 一- 一 -一 一 | 一 | 一 一 一 -一
一 3.3
1.18 | +0.6
17.84 47.9
3.1
"7
BS SD
pecan oi se x & |
1 W. J. Reddy: Modification of the Reddy-Jenkins Thorn methods for the estimation of ;
17 hydroxy corticosteroids in urine Metabolism. 3, 489, 1954.
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tered states of adrenocortical function.
The now England Journal of medicine. 253, 747, 1955.
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in myxedema and a em Journal Clinical Endocrinology. 19, 895, 1959.
‘
} WE i a AA FE at AR a FE
LEAR A ZAIRE RAIA ERP BIE EAE
何 开 给 2 亮 He MAF
iE Be why Bes
(上海 第 一 医 单 院 生 化 数 研 组 )
租 国医 学 名 篇 ” Eee PAK, 赣 视 命 门 筷 生 命 的 根本 。 在 多 种 不 同 疾病 中 发 现 有
BHRDARRR, ARMM P BEAN ik, 能 获得 极 好 的 冶 效 。 借 助 於 近代 生物
化 学 来 识 哉 展 虚 的 病理 机 制 , 是 研究 祖国 医学 理 葵 的 一 个 新 途径 。 降 床 上 常 观 察 到 病人
BRR EAB PR EDR AeA“ SA”, Walt AE“ FE” BYTE AR. Be“ AR” BLS BA” 路 属
病人 主诉 ， 但 经 中 药 调 整合 ,此 等 症状 均 可 消失 。 因此 我 们 推测 其 必 有 物质 基础 ,最 可 能
的 是 与 能 量 代 猎 发 生 障 在 有 关 ,而 克 物 治疗 作用 的 一 种 机 制 可 能 在 芯 对 能 量 代谢 的 调整 。
因此 ,我们 企图 从 机 量 代谢 的 角度 上 , 对 展 的 除 阳 失调 进行 探讨 。 本 文 报 告 了 一 些 辟 处 病
欠 能 量 代谢 方 融 的 测定 以 及 其 释 化 机 制 的 讨论 。
本 广 所 择 研 究 的 病例 篇 上 海 第 一 医学 院 腾 像 专题 研究 相 岂 和 祖 寺 药物 治 冶 有 题 车 央 效
有 渚 ,其 中 包括 哮喘 、 和 神经 误 弱 、 硬 皮 病 、 功 能 性 子 富 出 血 .血小板 减 少 性 紫 疾 等 种 , FARE ES
。 *# 1961 年 上 海 第 一 恬 捕 院 生化 专业 班 学 生 。
人
是 ; Tea ier ane ce ae |
Scie eat ia ely la ila
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ee Me Re ME SO es LL
OB 例 数 | Ry ft a. ee
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治疗 前 | 14 | 0.880.038 0.78-—-1:00; <a Mone es
| Wm | ames 14 0,800.12 | 0.70—0.96
; om _ | oem) 1 0.89+0.05 | 0.88100
a ‘as 治疗 和 后 13 0.81+0.09 0.70—0.95
ote 50 Zn RRR PLAIN ACH DEAE SOU oh ABNER TE Fale
RACE OAT MBC, 由 此 分 别 表示 红血球 之 糖 酵 解 及 磷酸 成 糖 氧化 通路 的 强度 。 EEE |
| 2) BAER A LEME ILIE NS AA PED ARETE, 其 下 均值 人
| 筷 正 常人 之 76 卿 左右 ,而 除 目 者 反 较 正常 值 高 出 47 多 左右 , 当 经 治 下 后 ,两 组 病人 之 本
1 ， 香 都 有 改 释 , 阳 记 者 的 低 值 提高 , 险 虎 者 之 高 值 下 降 ,都 向 正常 值 靠 撒 。 氧化 率 的 狠 化 7 卫
OPERA A, TE VERE A, WIR BUS A NE ERR, FIRS We BS BETES ce 有
PITA T AT Bet
BEA, BRA Ss Bil BE Ee FE TE EPO BEI LE ST T SORE Preys
ar eae mc Am, RA ee RAL A RS AOR a
3 af TERS ALPS (图 略 )。 |
om BB, BUNT ELS BL FE T SEPSIS
PARA BE SC BUTERS AEA SED, HUET FL, S82 ED” RO
FER BISCO FR” BU” BEBE AE 0 : " |
BLE: GUE ABET US HRI A EE CAO A. (ELIOT RE REC
本
Ps
a
- spmmtcwese An TEAL HBR ep AE BBE BEE AR ea EB: RR Ba
者 加 强 ， 同时 在 其 中 另 一 条 道路 上 一 一 糖 的 磷酸 友 糖 氧化 通路 也 有 相似 的 释 化 趋势 。 在
”各 租 病例 中 ， 两 休 糖 分 解 途径 中 耗 糖 量 的 比例 都 与 正常 粗 极 近 位 。 PRB HY A Ga 2 ht es
ARRAS T SL RRR SS APE No BE GT I 5 SR A REE CB Hott , HA
- ARSURERE 90% , D-LAM ATIM TRIE 15-81. SCALE HENCE CART AER
BEARD HSE “AR” Be -部 ”等 症状 的 原因 之 一 。 中 药 的 治疗 起 到 了 调整 能 量 代谢 的 作
用 。
表 2 正常 与 必 虐 病人 红血球 糖 酵 解 与 氧化 强度 的 释 化 ( 比 容
BO 毫升 ) 的 不 血球 在 37 度 保 温 1 小 时 的 数值
- 492.4+87.1
| (367.6—888.0)
. 375.0+92.1 28.0+6.4
we 前 (220.0—861.1) (19.4—45.9) 9
P<0.01 P>0.05
eee 551.9+156.4 40.2+12.4
mR 和 后 (348.0 一 873.1) (23.9 一 60.5) 9
P<0.01 P<0.01
; 727.8 士 311.4 39.747.9 sae
we 前 (477.0—1190.0) (26.5—82.8) 7
P<0.01 0.05>P>0.01
on en otal SR ee Cee Da R FRNA CD TART ap. UTE,” Ai
. 545.2+90.7 28.6+7.5
He 和 抬 (400.0 一 718.6) (19.0 一 42.6) 7
0:05>P>0.01 0.05>P>0.01
450.5+72.8 38.5+6.0 ;
JE BRE (370.0 一 490.0) » (30.246.1) 10
P>0.05 P>0.05
“ 酵 解 反应 体系 含 1 部 升 此 容 504 5 ZAMIR 3 毫升 含 60 微 克 分 子 之 pDH7504
| MBER.
氧化 反应 体系 合 0.5 毫升 比 容 50 土 5 SAT M ERM 1 ET 30 微克 分 子 之 p 也 7.5 0.4
MBER 0.3 SH 0.05% PRB
PER P fi SIEM MA HAZ P HARTA Heit.
— 145 一
x:
BE ie Hs A 8) Hk A TE
‘IL (ERE L We SR DEA MARAE CHM A
ibiss 22 9G WORE pie
(二 海 第 一 医学 院 生化 数 研 租 ) |
RASRE HACIA AREA. BRBSLEE GH
人 每 日 尿 中 1-DAY LR ACTH 应 答 性 的 低 -
VRE. ARSE LR ABR AE TEAL Seb AL AL MR
MAMA TE JOR LS SEA SORA. Jo F. Vaccari SHM,—AE
SHAPES FY Be S| ARE ME , TE LR SR (ACTH) RAE
制 其 酵 解 的 进行 。 近年 Luis Angelone VHEWERKAREEREN TOME, Ai
PROSE WUE 21% , TA LAR RAS RAL, RPE I A ERE
SECT RE LR AE A, HEAT TE ACTH 将 皮 质 激 素 分 泌 功 能 及
RACER |
受 试 者 在 8 小 时 内 接受 静 县 满 注 ACTH 25 单位 。 在 酒 注 前 后 各 朱 血 一次 , 按 了
Demoor 等 法 测定 血 半 中 氨 可 的 松 的 含量 ， 同 时 按 何 开 珍 等 法 测定 其 红 血 球 之 糖 酵 解 及
氧化 棕 , 精 果 列 於 附 表 中 。 如 表 所 示 , 无 渝 正 常人 或 病人 ,在 涌 注 ACTH 和 富 , 血 中 氨 可 的
松 的 售 量 都 一 致 升 高 ,而 红血球 中 糖 醇 解 这 一致 下 降 : 正常 人 在 涌 注 ACTH 和 后 , 酵 解 这
下 降 了 427% » PERE A AE EM EAE 92% , TERRE TM 39 匈 ， 各 棚 之 下 降 值 乱 是 著
ZH, (BLE ACTH BALMER HALAS,
itz ACTH BL SE ST By HA Rh HC
a a
MF BY AR SS
BY 酵 、 a | 氧 化
例 数 ug/ml 例 % | FURR ue/ml| 例 数 | Spe ug/ml
18.5+4.3 “g “| 464.3-+58.6 32 31.2+6.3
ge cash | (10.8—27°3) (367 .6—553.0) (22.0—42.6)
o> Ds ae 46.6+10.0 | 8 247 .4+96.3 12 32.8+9.1
(21.6—64.5) (174.0—425.5) (20.1—49.6)
前 6 16.3+3.25 8 319.2 士 56.8 12 31.5 士 9.2
a (10.7—18.7) (180.0—488.0) (25.0—66.4)
ous |: & 6 52.8+8.0 8 218.8-+63.5 12 34.5+9.6
: (43.3—68.8) (113.5—405.0) (21.0—63.4)
前 4 16.5 十 6.5 4 507.0 土 106.3 4 41.4+10.7°
A al (11.0—27.3) | (354.0—646.0) (29.4—B7.4)
Gee) | ® 4 42.7+12.8 4 309.3-+39.9 4 40.2+13.5
(20.6—65.4) (287 .0--392.1) (19.3—88.5)
oe ora.
| (1) 无 痊 正 常人 和 病人 在 洱 注 ACTH &, th} AT SLEEK BTA, pa beat
5 ACHES — PS LR LIE 人 皮质 的 应 答 性 较 差 ， 但 不 影响 其 血
证 所 可 的 松 的 水 平 :
(2) 秆 血球 的 糖 酵 解 受到 ACTH 渗 注 的 抑制 作用 ， 其 作用 与 皮质 激素 的 增高 相 平 ，
千 , 当 血 中 氨 可 的 松 含量 增高 时 , 红血球 的 酵 解 即 受到 抑制 , 赣 且 病人 与 正常 人 无 显著 差
别 。 因 此 推测 到 ，ACTH 可 能 是 通过 增加 血 中 皮质 激素 的 省 度 影响 到 血球 中 糖 代谢。
| (3) 涌 注 ACTH 前后， 红血球 中 氧化 支 路 的 释 化 不 大 , 因此 况 需 其 作用 点 在 6- 磷 ，
PRAM LT A HERE » DSM — HRY 我 们 目前 WEAF TRE
ASEAGAATEE
ee 7 a a a
VL 26-56 A DS SD EEA,
: TORE Bamoe. Tee
Bie (中 国 科学 院 植物 生理 研究 所 , 上 海 )
”在 常用 的 希 尔 氧 化 剂 中 , 2,6-— em} (DCPIP) HUMMER: (1) BTS
速度 特别 快 ; (2) 无 显著 的 偶 联 磷酸 化 。 一 般 认 需 ，DCPIP 接受 电子 的 部 位 在 偶 联 磷 ，
酸化 之 前 ,因此 电子 传 表 的 过 程 短 , 反 崔 速 度 快 。 但 是 上 述 现 象 用 DCPIP 具有 解 联 作 用
也 同样 可 解释 。
”我 们 利用 了 高 比 放射 强度 的 ??P ,得 以 测定 不 同治 度 的 DCPIP 存在 下 短 时 间 内 (5 一
10 秒 ) 的 希 页 反应 和 磷酸 化 活力 。 粘 果 发 现 当 DCPIP 省 度 低 时 ,与 其 他 人 的 报导 相 反 ，
短 时 间 内 光合 磷酸 化 的 活力 很 大 ，P/0 值 也 过 到 1。 随 着 DCPIP 省 度 的 增加 ，P/0 值 ，
逐渐 降低 (Ze 1)。
表 1 ARIAL BERS DCPIP He PTE AAO EE FE De RE
DCPIP ft @ BR £ +h # wR
(G58 |1.2 毫升 反应 液 )
80 . 670 0.02
40 590 0.23
20 446 0.37
10 400 1.05
5 440
照 光 时 间 除 5 微克 /1.2 毫升 的 篇 5 BH, HRI 10 秒 。
在 实 台 中 我 们 发 现 DCPIP 系统 的 光合 磷酸 化 活力 高 於 同 量 的 DCPIP Hs Ait, A
一 147 一
从 表 1 可 以 看 出 ,磷酸 化 活力 与 电子 倩 珀 间 有 一 定 的 关 傈 (P/0=-1) ,肯定 了 ATP HH
fist DCPIP 的 光 还 原 相 偶 联 而 不 是 DCPIP ESR DCPIP 于 先行 的 氧化 此
磷酸 化 的 精 果 。 sa
。 ，， DCPIP 省 度 高 时 P/0 4 PAAR FT REAL HHS DCPIP 的 解 联 作 用 ， 过 点 在 下 述 的 实
中 得 到 症 明 。 在 没有 磷酸 化 系 往 存 在 下 ,人称 体 照 光 若 干 秒 链 后 ， ‘shih SRM A AD
Be Pi, RAB DH ATP 形成 表 2 的 烙 果 指出 ,在 此 情况 下 ATP 的 合成 受 DCP!
Ai], DOPIP He RUM EES
#2 DCPIP 及 DCPIP Hs SIA EF ATP WO
ATP 形成 & eh
(mz mole ATP / 53H) heel Fe
DCPIP | DCPIP Hz,
at 料 mA B.
(Hite |1.2 SEAL IZ MEH )
40 1.7 10.6
10 7.9 ' 13.8
5 11.2 7 9.8
11.2 11.8 >
LIRR, ALE DCPIP 和 与 其 他 希 硝 氧化 剂 一 样 ， 禄 受 电子 的 者 位 在 个
磷酸 化 之 后 。 其 他 工作 者 未 能 发 现 与 DCPIP 30H 相 偶 联 的 磷酸 化 的 原因 可 能 是
(1) DCPIP 的 省 记过 高 , 它 本 身 的 解 联 作 用 使 在 至 部 漫 原 过 程 中 APT JE RBIS; (2)
定 的 方法 不 够 去 敏 ,一 般 根 据 反 应 液 中 Pi 的 减少 来 测定 磷酸 化 。
HEM, HE DCPIP 光 还 原 过 程 中 未 能 测 到 题 著 的 磷酸 化 活力 ， 不 少 作者 假 计
DCPIP 接受 电子 的 部 位 在 偶 联 磷 酸化 之 前 ， 碍 由 此 峙 光合 链 的 机 制作 了 种 种 的 推测
.Jagendorf 训 坊 不 同 希 页 氧 剂 系 和 统 在 释 氧 方面 都 是 共同 的 ，DCPIP HERRERA
ATP 的 形成 表示 偶 联 磷酸 化 发 生 在 “ 光 渤 原 物 ” SUL 7 CZ I
中 。Arnon 发 现 将 DCPIP 和 KsFe(CN)。 RIRFI AS HHH, KsEe(CN)e 的 膛 原 刘
速 ，ATP 的 形成 受到 抑制 。 烙 合 了 他 的 所 谢 “ 光 合作 用 的 闵 一 学 说 "，Arnon BATE
情况 下 电子 的 直接 受 体 是 DCPIP， 薄 进一步 企图 利用 DCPIP KERHD KEG
,用 的 两 个 步 屋 一 一 光合 磷酸 化 与 水 的 光 氧 化 。 根 据 本 女 的 结果 DCPIP 光 渤 原 过 程 中 后
样 发 生 偶 联 磷酸 化 ,因此 在 电子 传 尼 的 过 程 中 DCPIP ARIAT BD FB E
AES DA AS LABAR EH. t DCPIP 上 KasFe(CN)e 系 芒 中 ,电子 的 直接 受
， 体 大 概 仍 荔 是 KaFe(CN)。 而 不 是 DCPIP。KasFe(CN)e RH MBAR ATP BMS
-抑制 的 现象 可 以 用 DCPIP SAME ADIT wie ee
— 148 一
BS WA ey F Nap } warns
“Wl We ee ae Bed ie a
Ag Fa a’) Wee ph.
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i 下
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Wan 的 i ; 人 jz
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徐 京华 ， eee
¢ 中 国 科学 院 生 物化 学 研究 所 ,上海 )
Ati | Bh Gi Athi 自动 装置 的 调节 现象 有 很 多 相似 之 处 ， 反馈 现 象 就 是 其
ALO. UE MMT. AOR
SHE BRT SAS Bes, TASC Ch LS AI AEA CA
ARORA. 近年 来 大 量 的 实验 事实 告诉 我 们 ,在 生物 体内 很 多 代 兴 过程 都 存在 有 反
人身 更 象 。 因 此 使 得 我 们 澳 得 有 必要 对 演 类 的 反馈 于 题 加 以 特别 的 探讨 。 过 内 我 们 进 一
PRR ERA. ALAMOS BR.
ERE LE EN ORR. RTE EA
BOS, 生成 了 和, 它 的 速度 常数 需 k: 。 ik X RMT ARI RMT Y, 其 入
， 和 速度 常数 篇 ks 。Y AME 的 抑制 物 。 过 就 形成 了 一 个 负 反馈 循环 。( 昂 图 )
[EY]. me
篇 了 简化 过 个 计算 , Pe AAR He > 整个 反馈 过 程 所 需 的 时 间 主 要 筷 ks rE. Y Sib
卫 形 成 [BEY] 及 [EY] PMR X BR Y 相 较 要 快 得 多 。 因 此 了 、 卫 及 [EY] 之 间 ，
很 快 就 处 基 平 衡 状 态 。 如 果 汉 个 抑制 是 非 芒 委 性 的 , 那 床 我 们 就 有 以 下 的 关 傈 ;
da [EY] _
dt
[Et] = [Ef] + [EY] (2)
*KGRt
| i Bog Ki+ Y
其 中 [也 力 一 自由 酶 省 度 ; [Et] = meee se.
Ki = Kes
3
(3)
mm 149 一
> ee Fo ror
= 一 k_s [EY] + ky: [Ef][Y] = 0 (ly.
Se
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Pe 4 bs eh ae
FT SEMBLE BP A BD) BAS: eee
| X = k,, [Ef][S] 一 (Ka + Kya) X ae
ie 6) : er ES aa,
X = ky [SI[Et] Ki(— 二 ~ ea + ka) a ne By eS |
YekeX—kyY ， : ae (5)
: ae Panes toot
将 (5) 微分 代入 (4), MER ee
AL | eae
¥ bees Sa 0 (6
¥t+a +B “Kit y (6)
Sop a=k. + kin + ce B = kin Kis © tie ie 是
A= Kyi ki, [Et][S] Ki 7
Jas RAPT — KH AD, 经 常 使 [S] 保持 恒定 。 Po ee
Feo WR EAS Ph ss PEN , HOI KA KER, BRIA AL SEA
PRED IA TBR a a it 35 To Fe BS Fo
RECT EACKMR. BIR Y Mii. 我 们 可 在 将 =0 附近 把 (6) ze ‘
开 。
4 4 4
Wav + spy === Y-— y3 = 0 8
fiw ifs PE ae Gea Ki Bae eee
取 展 开 项 至 Y —xH.
人 | 二 ee ;
TLRS : . pane
Y= C,e™" + Ce” + Yo (10)
其 中 篇 当 夺 = 0 ww, Y=0: Y=0,
Cd=-)xa) ，c 一 Zd=7o)，
Ihe ae he at
和 1 (11)
Ki 人 BE 十 长 本)
yas a+] a? 4( Ki ) | a2)
2
根据 物理 意义 ， 方程 中 所 有 常数 都 是 正 的 实数 ， Y RX th 员 能 取 正 实 数值 。 3S EARL
A 可 以 是 负 的 或 者 是 复数 (EES). LMG, Y AUR Wee (如 果 A 1844) oh
以 阻尼 振 强 的 形式 (如 果 A EB) 趋向 藉 定 驴 Yoo
在 体外 人 条件 下 , ERO RUE ERR. ABBE A 的 数值 很 小 , 阻尼 振 给 式 的 反应 不 易 颖 察
到 , 如 在 体内 局 部 酶 省 度 可 能 提高 ,因此 反应 在 局 部 区 域 形成 振 温 是 可 能 的 。 特 别 生物 体 国
反应 在 开放 系 六 内 进行 ,反应 与 其 他 作用 偶 联 ,不 可 道 性 很 强 。 作 用 I2 等 反 速 度 很 小 以
至 可 以 忽略 不 计时 , 振 刘 式 的 反应 出 现 的 可 能 就 更 大 。
EY 数值 较 大 时 ,上 述 的 近似 就 不 能 锡 篱 合理 ,因此 进一步 我 们 用 狼 数 方式 求解 : 融
= 150
n=0 —
Y= ‘Yo + Yse™ + Mgr Yaeaxt 十 = TY， enti: WEEE 4B
, lh
”这 楼 算得 的 解 与 以 上 用 粗糙 的 近似 所 得 烙 果 具有 相位 的 行 篇。
Uk 0 Me TR fe
HERES Pot Ee
(中 国 科学 院 生 物化 学 研究 所 , 上 海 ) <a
在 蛋白 质 生 物 合成 过 程 中 ， 第 一 阶段 是 氨基 酸 的 激活 ， 过 点 已 了 解 得 相当 清楚 。 生物
体内 是 否 有 肤 的 激活 作用 , 至 仿 只 见 Tuboi 等 在 一 篇 短文 中 述 及 有 些小 肽 在 鸟 肝 pH5
meet ATP 存在 时 ,可 以 生成 慷 羟 肝 酸 霹 , 但 对 肽 激活 后 的 产物 未 作 话 粗 鉴 定 。 本 文 报 六
由 酵母 拍 提 出 一 个 可 使 某 些 小 肽 坊 ATP 所 激活 的 酶 制 玫 ， 以 及 对 此 种 激活 作用 的 性 质
与 产物 所 进行 的 一 些 观 察 。
酶 制 者 是 根据 Van de Ven 等 由 酵母 制备 酷 氨 酸 激活 酶 的 方法 ， ee RASTA
Bo BREDA We ARERR RIE
Fi 18 种 氨基 酸 (HA. LA. RAH. We A (6, 3D ABA FLAS
KA) 进行 实验 , 表明 酶 制剂 只 对 酷 氨 酸 有 激活 作用 。 在 同样 条件 下 , 门 冬 酰胺 也 有
反应 ,而 谷 氨 酰 胺 作用 较 弱 。 用 9 MD (KARR ARMAM, FARE ARA
AMAR. “KARR NB ARRARA AR, KARE ABA Rly
Sk HARMAR, FRREAARMAR. i BRET RRAARR, ARABIA ©
RTARTA) (RD, BADIA 5 种 小 肽 也 有 明显 反应 。
由 对 小 肽 的 反应 可 以 看 出 : 带 有 共 氧 狼 基 或 与 对 甲 茶 磺 酰 基 保 访 基 团 的 小 肽 可 被 激
活 ; 而 没有 过 些 基 团 的 小 肽 也 有 反应 ,所 以 女 羟 肝 酸 咯 的 生成 不 是 过 些 基 团 所 引起 的 。 以
膊 氨 酰 酷 氨 酸 作 底 物 进行 实验 时 ,在 反应 系 业 中 取消 了 酶 制剂 或 ATP 的 任 一 者 ,都 不 能
HEALS GM, AWS ME SSE ATP 的 酶 促 反应 。 小 肽 的 效 基 端 不 必须 是 酷 氨
酸 ,表示 肽 的 激活 与 酷 氨 酸 激活 酶 似 无 直接 关 傈 。
将 用 且 氨 酰 酷 氨 酸 作 底 物 所 生成 的 酸 溶性 产物 在 pH 4 AEAT MCE, BHAT
Si) ABE, AKAM, ARG IR. 此 点 洗 股 液 的 紫外 吸收 高 从 在 260
my, 其 公 光 谐 及 光 密 度 比 值 与 膊 氨 酰 酷 氨 酸 : A-5'-P=1:1 RA Wm. VERN
— 151 一
(14)
(15)
a solietialictlaal MEE TERI RSPB SEARS Hele BS 1 (0.9: De ED:
。 可 以 排 除 :
， 层 析 法 检查 , 烙 果 在 与 对 照 酷 氨 酸 相 应 的 位 置 未 能 观察 到 显 色 点 ;
”等 洒 度 酷 秘 酸 所 产生 的 。 而 用 肺 氨 酰 栈 氨 酸 及 栈 氨 酸 分 别 作 底 物 , 各 保温 5、10 及 15 分
钾 , 粘 果 在 同一 时 间 训 ,二 肽 所 产生 的 尼 匈 且 酸 桌 仍 都 比 酷 氨 酸 产生 的 篇 多 ;
。 的 生成 量 有 进一步 的 增加 ,增加 的 趋势 与 且 氨 酰 酷 氨 酸 单独 作乱 底 物 时 相仿 ;
所 激活 。 :
REA ART, ERG AD nl AR RRR ELL OR
BREE A AE TE q
BEF USI LE AS Se EE, IRS ARE 国
的 位 置 相对 应 。 “HOVER. yo SIEMPRE 7 resins
Kip plan ABP pppistailMe hs 在 同样 pH 下 ， Fa
相应 的 氨基 酸 ,因此 推 知 肽 与 A-5'-P 2 1 JE REE SIRT EY Liat tel a
明 ,和 氨基 酸 一 样 , 肽 也 可 以 酶 促 激活 。 ， oe ae
FoR eA AAS, 将 含 酷 氨 酸 的 小 肽 水 解 ,产生 自 由 的 酷 氨 酸 ， ae 7
UEDA Ha WOE RAE TT EBL BOER TREAT NORA :
Ca.
1) Kin ATP, 1 I ee FA ACT I LC ROR ae ‘
2) 在 同样 实验 条 件 下 ,保温 60 23-Bs,5 LIN A SR As PRG RNB HS
3) EGEOE MAMMA WES IS, I ARR, ua q
© 4) BERRA hE UNS LATA LATE MCE
5) PIA PA NON AM ER!
此 外 ,由 3) 及 4) A HID I LT EA — OR — TAL ARs
DIRS HH, WEBER ME AE AO BIG NRE we |
CARPE FA Hk a EEE AE AL da EH ABBY)
- Ime 酸 的 相 五 作用
FRE ”台新 法
(中 国 科学 院 生物 化 学 研究 所 , 上 海 )
工 钙 郁 子 与 核酸 千 合 的 光 谭 研究 : q
eRe AE LEA LOE Se EE 5 NETO TF EFT HT RET,
SUBLET AWA TH LAL FTE EA TR RA All 但 是 金
—, RUBS HS RETO Fel, ERRAND ATA, DIUM, ET 国
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mass, ‘eta TaN RNA nx DN: A 的 迷人 外 汕 呈 的 彤 才 ES
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eee A eo
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RRA, FM Na.SO, 1M, Eo BAB Zntt 对 RNA Exaoo 的 影响 可 解释
dak, Zot+ RNA ABER RMS HE BERR, 在 低 [Znt+] nF, SSE
“MEBT RNA ATMA, SORE TI, se AMT HoH Pe RM Sis
ik ceca (Bnei) He Pe (ant) 的 最 略 浪 度 记 0 005 ie 时 ， 降低 值 全 3
TIS 20% JEM MRAM, Zn) BSE 1 a, Baw 又 可 上 升 省 原 值 。 由 亦
“ZnSO, BRAS, & ZnSO, 1M 的 溶液 的 pH MATE 49. 但 是 RNA 在 省
“ZnSO, 中 的 Bo 复 升 作用 普 非 由 礁 DH 的 影响 。 当 [Znt+] 蕉 持 在 0.05 M 时 ,同时 加
BARING DH 4.8 了 so 仍 厅 持 在 降低 20 匈 的 水 平 不 楼 。 另 一 方面 过 也 不 简单 是 硫
a we
RSS HER Dn a 5 cpa ai 增高 ， AERER Zutt gig, HRPM CSE 上
了 aee 回升 。
上 58.4 BS (DNA) 的 0.2 M NaCl wx, mA SERORE ZnSO, aM, me one
| Bago 3 [Zn**] 释 化 的 影响 很 小 ,但 100°C 保温 30 FHS, EVO RNA BATH,
Bais 可 以 因 低 江 度 Zn** WEE AETT TW, AE AEBER [Znt+] 下 再 逐渐 升 高 。DNA 加 中 性
WARES BSR PE 1% 100°C 保温 20 分 甸 , 痊 却 后 加 入 ZnSO0,, Exo 只 表现 因 [Zn*+] tea 5
i PM, AR RETT. MAF baeetciia -NH, 基 团 和 与 甲 醛 反应 后 , 即 失 去 和 侠 Zn++ #5 ap
合 的 能 力 。
aS | Sa ae ere oe yy He** APPRAISAL, 我 们 疝
RNA 溶液 中 加 入 HeCl, BISA 1.25x10- NM ， 光 谱 高 党 即 由 259 mm 移 至 270
me 若 溶液 中 再 加 入 ZnSO:, 则 可 议和 性 地 抑制 Hett SIMA Be Znt+ 的 最 终 ，
滤 度 篇 051 时 , 即 可 使 DNA 的 光谱 完全 恢复 ,所 需 Znt+ 的 省 度 恰 奥 前 述 引起 核酸 此
ABST GEE, MTT CM, META Hgtt
Pee AIR Pe Na,SO, 阔 不 能 更 动 原来 高 举 的 位 置 。 可 见 Znt+ 也 可 三 核酸 的 ，
BREE o
Zn+t Ti ABA KAS AR SE DRM BEIM EA GEA DERE EBA lng AT DL sea aR ee
& EKA PER RAE. Zn+t+ SAS MAR SEE WH, iS
xen DNA, 当 了 磷酸 基 团 先生 Zn++ HA, —RERR BER, Zot RBH
HRA. sete DNA 在 Zn ARR BDA ia. PUB Zt 与 核
Rea RA FP AA Tie — Bio MRR EF UR S RET ARE
Fete Fei ANI] BEA ARATE ee, WARHAS RET MIR AE
可 能 具有 一 般 性 的 意义 。
Il. 钙 喜 子 对 核酸 的 沉 泪 作用 : :
& BEF FY BUR A RNA RESTOR, MRS HR ABST FE, SCE FBR il
至 今 不 清 。
本 广 报 半 了 锌 风 子 与 核酸 结合 沉 泪 的 基本 人 条件 ， 攻 明 了 逢 见 子 与 核酸 和 辕 合 帝 泪 的 能
力 与 核酸 的 构 型 .分 子 的 大 小 有 关 , 齿 基 也 可 参与 灶 合 。
一 153 一
全 多 省。 仅 加 甲醛 而 不 保 瘟 则 全 无 作用 。，
In, 当 DH>6.4 时 并 姑 出 现 Zn( OH)。 HBR, RNA AHR RAT. rs
RNA HUES Re fi ,而 DNA S4e [Zn**] 高 速 1.5 M 时 也 不 能 起 Zntt prPTR.
“的 部 分 可 秆 Zn++ 定量 的 沉 潍 , 而 且 将 此 沉 溅 的 上 清 液 加 棒 样 酸 钠 ; 再 100°C 保温 , 即 出 ，
‘TERT, AUwEOy DNA 需要 较 商 的 (Zn*) 7 BJ SU mB
Bee
100°C fRAGEBLIN ZmSO,, PETA HY U2 F EL — AL PRI, RPE TT BL Zin
验 和 辕 果 表明 多 核 苷 酸 链 越 短 旭 与 2n"” STIR HE DR. AA Be
用 ZnSO, 可 以 沉 激 核酸 , 沉 设 的 产生 受 溶液 的 DH 与 [Zntt] 的 影响 。 在 [Za
一 0.25 M 时 ,由 於 溶液 pH 的 不 同 ，Znt+ 对 核酸 的 精 合 作用 可 以 分 篇 三 个 p 卫 区 段 。 在
pH<5.4 5 RNA 与 DNA RAE ZnSO, ArH, pH #5 5.4—6.4 BE, MERE RNA 和
酵母 可 溶性 核糖 核酸 (s-RNA) 可 以 与 Zn*+ AT, Ti LUCE pH Fae |
牛 胸腺 DNA 则 只 能 在 PH>6.4 45 Zn(OH)s RAT, TARE Zn ATR. |
5) ail, Mey DH FE 5.76.2 的 范围 , 改 帮 [Znt+] , HUMP LARVAE [Zatt] 8 0.1
天然 DNA 之 所 以 不 能 篇 Zo 粘 合 沉 溅 ， 由 以 下 实验 说 明 DGS: ETERS SCE ie
aon DNA Yin} ME ESE ARHEAB EAS 1% , 100°C 保温 20 fr, 即 可 篇 Znt+ 52
。 过 将 保温 与 未 保温 的 DNA- 甲 本 溶液 接 不 同比 例 混 合 ,加 入 ZnSO, #, ne
更 里 棍 反 认 所 具有 的 各 外 吸收 夫 训 的 现象 ， 过 都 生 明 不 这 下 部 分 站 仍 具有 区 如 放 千本 的
ogee ie 保温 20 5-88 DNA 也 可 与 Zat+ RATER, ALES C04) BS
DNA 溶液 中 加 入 DNase (RYR77 FIRFWMGR LADO, 直接 加 入 ZnSO, skseIm IPE
ATR ATLA T OT Ce, A BT BS, TOBE
Dh. MpRIE ALE , REAR IED 1 BU), BL Znt+ SEAT AE. TE
HOLT ARS En PR ESS — AREA IS HR
条件 下 酶 解 产 物 与 Zant ies UPA HE II ZC, RAE HP PRE I He, SE Zn ies
Pr VUPR AS BEAD EDK BL, SP REI A Zt BREE
FA RNA 进行 碱 水 解 ， 不 同时 间 的 水 解 产 物 与 Zn fee CRON eh a AR EE |
而 降低 。 RNA BRIE. BILE A, HIRE Zn++ AIA AED SE
— DERRY SL, Znt* Pea SUPRA BE IE AR TERS RNA Bk DNA 的 区 别 ,而
ERR hi Akl. 音 链 的 RNA Bs Zn++ MAIR: 而 具有 公 螺 旋 构 型 的
DNA 则 不 能 ; s-RNA 在 我 们 的 实验 条件 下 具有 单 链 RNA 的 性 质 ， 除 了 构 型 因素 之
外 ,多 核 昔 酸 键 越 长 就 越 易 沉 溅 。 在 与 Zn CSTR APU ARR eee
作用 ,而 龄 基 也 参与 千 合 , 小影 多 着 沉 泪 作用 的 强 弱 。 不 同 金属 离子 的 作用 可 能 有 所 差
SL, (ALA) BEDE LIRA LEE 3
Zn(OH)» ¥E A LUE HWM RNA, s-RNA 或 DNA, 3b HATA NasHPO,
溶液 洗 腕 。 本 文 将 报导 利用 Zn(OH), BEAL RTA REBERE RNA 与 s-RNA Bi) 44 hig
Bt DNA 的 一 些 初步 观察 结果 。
一 154 一
Fey? 和
人
届 衣 子 与 核酸 的 相互 作用
oe ae
Ch 国 科 学院 生物 人 上 亢 研 究 所 , 上 海 )
1957) 静香 Cutt 傍 能 使 核酸 侧 婉 聚集 ,而 不 与 瞪 基 桔 合 。Eisinger et al (1961) we
人 人 但 未 能 在 核酸 互 分 子 的 实 险 中 得 到 直接 的 王 明 。
度 人 条件 下 而 有 所 不 同 。
(一 ) UV 光 谐 释 化 是 反映 瞪 基 是 否 受到 影 兆 的 一 种 指标 。Zubay 和 与 Doty eae Bis
MHD Cut+ 所 引起 的 TNA see, MBS Cut+ TARAS. RAEKRRE
NaCl 的 中 性 TNA 溶液 中 (TNA) =4 x 10-> M-BR), BI Cut+ 对 TNA 光 讲 的 影响 ，
发 现在 实验 条件 中 除了 CuCl, 的 作用 省 度 ， 介 质 的 NaCl 省 度 也 起 着 很 大 的 决定 作用 。
党 溶液 中 [CuCl] 一 0.016 M, Hl) 了 sse (波长 259 my 时 之 光 密 度 值 ) 有 题 著 的 增加 ，
同时 奴 收 高 党 也 移 向 长 波 。 过 应 该 是 Cut+ 烙 合 了 瞪 基 租 成 而 使 核酸 你 螺旋 粘 构 中 瞪
AMARA GW SOMO. (FE [NaCl]>0.016 M 时 , 则 内在 相同 的 [CuCl] 条 ，
件 下 也 不 导致 UV 吸收 的 增加 , 过 可 能 是 由 於 介质 中 NaCl Ewe RRS, Bee HER
mim, SRA RR Mise. 因而 对 Cutt 的 侵 费 有 一 定 程度 的 保护 作用 。 过 也 解释 了
Zubay 与 Doty 在 0.2M NaCl 人 条 件 下 所 得 到 的 负 粘 果 。
iE 100°C 保温 15’ Hy FSH: TNA 样品 则 表现 不 同 , 在 无 Cut++ 存在 时 ,其 UV 吸收
已 处 大 较 高 的 水 平 , 增加 [NaCl] 中 也 能 使 Easy 降低 ,但 即使 在 [NaCl] 3) 0.1 政 时 ，.
一 径 加 大 低 省 度 的 CuCl, Rss。 即 已 开始 在 此 基础 上 炎 续 增加 ,直到 [CuCl] >8x10->M
FARGO. 过 说 明 在 公 螺 旋 粘 构 遭 受 了 热 物 性 严重 破 壤 之 后 ， nt TREES
Cut+ 所 作用 ,而 NaCl 的 保护 作用 则 很 不 题 著 。
(=) 3AM (Murexide) PTE SS 2 ANC EE 525 mp se C Cu"? ssh
至 478 mp,
US ee PAPE IRERBEEE Out el Se EE MEAN AY
Be, BHP AY [Cut] 增加 时 , o 则 迅速 随 之 下 降 。 在 有 TNA 样品 存在 时 ,部 分
Cutt 篇 核 酸 所 灶 合 ,就 会 观察 到 此 w 的 下 降 受到 抑制 。 夭 此 可 以 比较 不 同 的 样品 对 Cutt+
。* 本 工作 在 张 友 端 先生 指 游 下 进行 。
了
ae tL SAA TSUIRIBAG EMPIRE
“文献 中 对 Cut 奥 核 酸 作 用 的 灶 合 部 位 奥 机 制 都 没有 -一致 的 现 垢 。 Zubay ee ‘baie |
A Out HA RCT RE LR ORIEN. 另 一 些 作者 观 坑 Cui+ 可 能 oe
“我 何 应 用 了 紫外 (UV) FPG 36 BEE BLS IR SB Re PRB SE DER, He
MA TNA UF RRS) 制剂 进行 了 比较 研究 ， 闪 需 Cut+ PERERA aR
FEU, WL RERE RAE SoS AR RUE Tl As ka A RI BE DR Cur tate le :
a ar 7 AB: rey ; the) % wife) ashy ni Vom ~ “eae -
iwi es ye eden
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Sang witli
aid i : *
st ®, Eira . EBAY [CuCl] (1x10-5 M) 开始 , KAR TNA BREA Cutt eR ae
合 。 TNA Wilh 90°C, 30’ BAMBI, fA RE ATH MEME, TT 5% = RBA 90°C. a
水 解 后 的 样品 , SEARED OEE SE, 染料 满 定 法 所 反映 的 TNA Bl Cutt iy
烙 合 路 不 能 分 辨 具体 结合 部 位 ,但 上 述 实验 粘 果 指 出 磷酸 基 团 应 该 是 主要 的 。 因 怖 就 天
然 TNA 而 言 ,前 述 UV 对 察 已 说 明 在 本 实验 所 用 骆 溃 度 较 高 而 CuCl, 省 度 较 低 的 休 件 *
F, Cut 不 奥 瞧 基 桔 合 ,至 友 达 性 及 降解 的 TNA ,由於 核酸 二 级 灶 构 遭 到 破 坟 , 其 磷酸
SES A BRET RE KSA, PR AERA RATA AER Cut, OG eR
是 低 於 天 然 TNA 的 。
Shack 与 Bynum (1959) HGS T 染料 篇 指示 剂 ,测定 核酸 样品 对 Mgt+ eee
能 力 , WEBI: TNA ES Mg++ 能 力 较 弱 的 相似 粘 果 。
值得 注意 的 是 , TELE BRET. Beso [CuCl] BUEN, BREA ES
BREA RISO ARGAT C. 过 可 能 正 是 磷酸 基 团 被 Gut+ 人 和 和 后 ，Cuit+ 稻
GPRBLAA SAR RECEDERKAERHER. BR TNA 的 无 味 喻 制剂 ,在
ROGGE AAD OATS. 过 可 能 是 由 芯 它 的 二 级 精 构 已 严重
BSR, 同时 龄 基 钥 成 中 糙 合 Cut+ 能 力 较 强 的 味 哈 瞧 被 大 量 除去 ,以 致 闪 磷 酸 基 团 与 龄 基
RAKED AES TER | ae a
、 DbRSSR BHI Cut+ 与 DNA AAS LR Zut+ FE, BARA aA
REBEL ARSE RA OE. 在 我 们 的 实验 条 件 下 ， 天 然 DNA 的 磷酸 基 ，
Mis Cutt 较 易 结合 ， 而 瞪 基 的 粘 合 则 要 求 较 高 的 [Cu++] 及 某 些 减 低 氨 键 稳定 性 的 条
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