《我的大叔》以擁有相同沉重的生活負擔40歲男人與20歲女人出發，講述他們互相觀察並治癒對方的故事。
第1集
東勳因為大學學弟當上代表理事，在公司的立場變得尷尬，而被調到安全診斷組擔任部長。大哥尚勳沒工作又和妻子分居，弟弟奇勳始終沒能完成拍電影的夢想，家裡只有東勳有穩定的工作。至安為了償還高利貸的債務，除了建築公司的約聘工作，還兼了餐廳的打工，每天縮衣節食過著疲憊的生活，因為積欠療養院費用，只好把無法行動的奶奶接回家照顧。
東勳收到了一個匿名包裹，裡面是五千萬的禮券，原本是尹常務派人想製造朴東雲常務貪汙，但快遞人員卻把包裹送給了東勳，目擊到整件事的至安，透過清潔人員的幫助，偷偷拿走了東勳抽屜裡的賄賂，想要還債。隔天公司網路上出現了匿名檢舉，東勳被監察部門的人帶走。
第2集
至安原想把偷來的禮券拿去還債，光日卻想送至安去坐牢，至安想辦法拿回禮券後，害怕惹禍上身，於是讓清潔大叔幫忙把禮券處理掉。因為五千萬賄賂從垃圾桶裡找到，因此東勳洗刷了汙名。至安偶然發現了俊英和允姬的婚外情，和俊英交易，以一人一千萬的代價，幫忙開除東勳和朴常務。不知情的東勳誤以為是因為至安幫自己把賄賂丟到垃圾桶，才能保住工作，因此對至安心存感激。
第3集
東勳想還至安人情，至安提出請吃一個月的飯，或是付一千萬兩種選擇。東勳想到行賄的企業可能是用公司卡買禮券，朴常務知道後說要查出買了五千萬禮券的企業並不難，打算從百貨公司著手調查。至安透過竊聽器得知後，把這個消息透露給俊英，並跟起範合作設計朴常務，讓朴常務趕不上與中國客戶的會議。尚勳頂下朋友的清潔坊，找奇勳一起做清潔公司的工作。東勳叫至安直接說把五千萬丟掉的人是她，至安為了讓東勳被開除，故意強吻東勳，再找起範拍下照片。
第4集
被至安設計的朴常務，被調去了釜山。俊英發現至安不是個簡單的角色，查了至安的過去，發現至安曾經殺過人。尚勳做清潔工作時，被財大氣粗的公寓主人羞辱，還恰巧被來送飯的媽媽看見，令三兄弟都非常難過。東勳私底下去找了公寓主人，至安透過竊聽器，發現東勳也有不為人知的另一面。
第5集
奇勳發現每週吐在公寓樓梯間的人，是以前合作過的女演員。東勳發現，至安辛苦的一個人照顧奶奶，他對至安態度和緩許多。尹常務和俊英繼續在打壓東勳，宋代理喝醉後，以下犯上質問了俊英各種事情。朴常務給了東勳都俊英的通話紀錄，東勳調查後發現，會用公共電話打給俊英，他為了找出打電話的人，來到了公共電話附近，卻看見了允姬。
第6集
東勳知道允姬外遇後，意志消沉。允姬勸東勳自己離開公司出去創業，並告訴俊英東勳會自己離職，叫俊英不要逼東勳。至安為了替東勳出氣，打了代理的事情被東勳知道，東勳告訴至安，有些事情要裝不知道才是禮儀。幼蘿三不五時就來找奇勳，說些諷刺的話，奇勳終於忍無可忍對幼蘿破口大罵。
第7集
東勳和俊英攤牌，東勳要俊英不要聲張，叫俊英默默和允姬分手。幼蘿告訴奇勳，自己為什麼喜歡失敗的人。俊英和東勳談判破裂，東勳決定對抗俊英。竊聽到所有一切的至安，就去找了允姬，然後給允姬聽了俊英的錄音，允姬終於知道俊英只是在玩弄自己，而不是真心愛她。
第8集
王永根這方為了搞垮俊英，打算推派東勳出選常務。允姬知道俊英對自己不是真心的之後，難過不已。俊英為了自保，和允姬提了分手。東勳順利的進入常務候補名單，俊英知道之後開始擔心自己的位置不保，找了至安，要至安去勾引東勳，和東勳談戀愛，好讓自己手中能有東勳的把柄。
第9集
光日得知至安喜歡東勳後，故意告訴東勳當初的五千萬，是至安偷走想拿去還債的真相。東勳要當常務的消息在兄弟中傳開來，奇勳忍不住就告訴了母親。允姬為了隱瞞自己外遇的事，希望至安能夠消失，至安告訴允姬，東勳早就知道她和俊英外遇的事。春大告訴東勳，至安的過往，以及至安為什麼要偷那五千萬的原因，東勳知道後，跑去找光日和他大打出手，光日告訴東勳，至安殺了自己的父親。
第10集
東勳和光日打架，兩人都傷得很重。東勳對所有人謊稱自己是在街上和人發生衝突才打架。酒館裡，大家七嘴八舌的討論如何讓東勳回家後能夠騙過妻子，最後大家說好就說踢球時和奇勳吵了架。允姬誤以為東勳是和俊英起了衝突才受傷，說要毀了俊英。俊英派人調查東勳，發現東勳是為了幫至安還債，才和光日大打出手。
第11集
東勳上班的途中，突然跑到朋友的寺廟裡，朋友告訴東勳，還是先讓自己幸福起來吧。公司高層帶著東勳模擬面談，都認為至安可能是最大的阻礙。俊英懷疑至安對東勳動了真感情，至安巧妙的掩飾過去。東勳和允姬說開之後，痛苦不已。至安聽著監聽裡東勳痛苦的聲音，感到非常難過。
第12集
至安聽從東勳的建議主動和同事打好關係，主動陪著大家加班。回家的時候，只有東勳和至安趕上了末班的地鐵。東勳問李至安為什麼要改變。奇勳向幼蘿坦承了當年在片場折磨幼蘿的真相。祥泰為了阻止東勳當上常務，臨時更換下屬面談的人選，指定至安來回答。至安在會長面前，說了很多東勳的好話，東勳當選常務勝券在握。
第13集
朴東勳知道了至安為自己說話的事情後刻意請至安吃飯，並表示感謝，他告訴至安其實自己沒有她說的那麼好，至安卻肯定的說很好，非常好，東勳忍不住露出一絲得意的微笑。奇勳和尚勳知道了允姬出軌的事，震驚不已。警察追查到了起範的身分，至安透過監聽知道消息後，起範開始逃亡。祥泰為了阻止東勳當上常務，在面談會上提起了至安曾殺過人的事情。
第14集
東勳發現至安買給他的拖鞋，想到至安傳給他的簡訊，慌忙起身去找至安，而至安的房間裡已經是人去樓空。至安怕自己拖累東勳，四處躲避警察的追捕。警察抓到了起範，查出了起範和至安的關聯。東雲發現東勳的手機被安裝了竊聽裝置，東勳回想起過去至安的各種行為，跑去找俊英，逼問俊英都指使至安做了什麼事。
第15集
至安怕被抓到會拖累東勳，還在四處逃跑。東勳知道一切之後，焦急的想找出至安。允姬也同意說出所有的事情，幫助至安。東勳去監獄找起範，詢問李至安的去處，起範卻什麼也不肯說。春大告訴東勳至安的下落，東勳找到受傷的至安，東勳將至安送到醫院，將至安被車撞受傷的手包紮好。
第16集
至安來到療養院看奶奶，奶奶覺得東勳是好人，非常感謝他。起範和至安在允姬的幫助下順利自首。鳳愛過世了，尚勳拿出所有的錢，幫忙辦了體面的喪禮。光日最後把錄音檔案寄給了東勳。至安在會長的介紹下，去釜山工作。東勳離開了三安E&C，自己成立了事務所。至安和同事們一起到餐廳吃飯，聽到了東勳的聲音，至安猛然回頭卻沒有看到東勳，還以為自己產生了幻覺，可是熟悉的聲音再次響起，至安找到了坐在裡面的東勳。