Hybrydyzacja kwas�w nukleinowych

Kasia |

Metoda badania kwas�w nukleinowych oparta na zdolno�ci do tworzenia kompleksu dwuniciowego przez jednoniciowe, komplementarne fragmenty kwas�w nukleinowych.

Hybrydyzacja polega na wzajemnym oddzia�ywaniu pomi�dzy badanym fragmentem kwasu nukleinowego a sonda molekularn�, kt�re prowadzi do wytworzenia hybrydu (dupleksu) o dwuniciowej strukturze. W przypadku dwuniciowego fragmentu kwasu nukleinowego tworzenie hybrydu poprzedzone jest denaturacj� pod wp�ywem dzia�ania zasad lub wysokich temperatur. Proces ��czenia sondy molekularnej z fragmentem docelowym kwasu nukleinowego jest wysoce specyficzny w odpowiednich warunkach i zachodzi zgodnie z zasad� komplementarno�ci. Odpowiednio przygotowana sonda molekularna, w optymalnych warunkach rozpoznaje sekwencje r�ni�ce si� zaledwie kilkoma nukleotydami i tworzy trwa�e wi�zania tylko z komplementarnym fragmentem kwasu nukleinowego. Badany DNA lub RNA mo�e by� denaturowany i unieruchamiany na filtrach, a nast�pnie poddawany procesowi identyfikacji za pomoc� znakowanej radioaktywnie lub nieradioaktywnie sondy molekularnej.